甲狀腺癌組織中lncRNA CCHE1水平及其臨床意義

許春暉

(杭州市余杭區第二人民醫院普外科，浙江 杭州 311121)

甲狀腺癌是常見的內分泌惡性腫瘤，甲狀腺癌的發病率呈上升趨勢，其主要病理類型為甲狀腺乳頭狀癌，最主要的治療方式為甲狀腺癌根治術，多數患者術后總體生存率比較好，但部分術后患者預后比較差〔1，2〕。甲狀腺癌起病隱匿，早期診斷比較困難，主要依靠癥狀、體征、超聲、CT、穿刺細胞學活檢等方法進行鑒別和診斷，穿刺細胞學活檢是甲狀腺癌早期診斷的有效方法，但有依從性差、無法確診、存在假陰性率等問題，使其難以在甲狀腺癌篩查中普及，因此研究甲狀腺癌早期診斷、預后評估的生物標志物具有重要意義〔3，4〕。CCHE1為一種新近鑒定的長鏈非編碼(lnc)RNA，在宮頸癌等多種癌組織中表達異常〔5，6〕，宮頸癌組織中CCHE1高水平表達和宮頸癌的FIGO分期、腫瘤大小、淋巴結轉移和人乳頭瘤病毒感染關系密切，低CCHE1表達患者的5年生存率高于高表達CCHE1患者。CCHE1在甲狀腺癌組織中的表達及臨床意義尚不十分清楚，本文對甲狀腺癌組織中CCHE1表達水平進行研究，探討其在甲狀腺癌診斷和預后評價中的價值。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇杭州市余杭區第二人民醫院普外科2010年1月至2013年12月行甲狀腺癌根治術的80例甲狀腺癌患者的甲狀腺癌組織和癌旁組織(距離甲狀腺癌組織5 cm)。年齡(54.36±6.57)歲，男25例，女55例，乳頭狀癌54例，濾泡狀癌14例，髓樣癌12例，腫瘤最大直徑≥1.0 cm者57例，腫瘤最大直徑<1.0 cm者23例，有包膜浸潤者36例，無包膜浸潤者44例，TNM分期Ⅰ期14例，Ⅱ期24例，Ⅲ期39例，Ⅳ期3例，有淋巴結轉移41例，無淋巴結轉移39例。

納入標準：病理確診為甲狀腺癌，術前未進行放化療等其他治療，首次手術，簽署知情同意書，經倫理委員會批準。排除標準：其他惡性腫瘤患者，患心、肝、腎等其他重要臟器疾病者，甲狀腺功能異常者，肺轉移或遠處轉移者，不配合研究者，未進行正規隨訪或失訪者。

1.2甲狀腺癌組織和癌旁組織中CCHE1水平測定 取患者甲狀腺癌組織和癌旁組織，采用Trizol提取總RNA，將組織RNA反轉錄為cDNA，以甲狀腺癌組織和癌旁組織cDNA為模板，采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(QPCR)測定甲狀腺癌組織和癌旁組織中CCHE1水平。CCHE1上游引物序列為：5′-AAGGTCCCAGGATACTCGC-3′，下游引物序列為：5′-GTGTCGTGGACTGGCAAAAT-3′。甲狀腺癌組織和癌旁組織中CCHE1相對表達量以2-ΔΔCt表示。

1.3隨訪 所有患者通過電話隨訪和門診隨訪，術后1個月時隨訪1次，第1年內3個月隨訪1次，第2年內6個月隨訪1次，以后每年隨訪1次，隨訪至2018年5月結束，隨訪率100%，記錄隨訪資料。

1.4統計學方法 采用SPSS20.0軟件進行t檢驗、方差分析，CCHE1對甲狀腺癌的診斷價值采用受試者工作特征(ROC)曲線下面積分析，5年總生存期采用Kaplan-Meier生存曲線分析。

2 結 果

2.1甲狀腺癌組織中CCHE1水平 甲狀腺癌組織中CCHE1水平(1.83±0.13)顯著高于癌旁組織(1.00±0.07，t=50.280，P=0.000)。

2.2CCHE1對甲狀腺癌的診斷價值 CCHE1診斷甲狀腺癌的ROC曲線下面積為0.821(95%CI：0.818～0.824，P=0.000)，診斷閾值1.68，診斷靈敏度為71.43%，特異度為78.14%。見圖1。

圖1 CCHE1診斷甲狀腺癌的ROC曲線下面積

2.3CCHE1與甲狀腺癌臨床病理特征的關系 甲狀腺癌組織中CCHE1表達量與甲狀腺癌患者的年齡、性別、病理分型、腫瘤最大直徑、包膜浸潤無關(P>0.05)，與TNM分期和淋巴結轉移有關(P<0.05)，Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移患者CCHE1表達量顯著高于Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移者。見表1。

表1 CCHE1與甲狀腺癌臨床病理特征的關系

2.4CCHE1與甲狀腺癌預后的關系 術后隨訪5年，80例患者死亡38例，存活42例，其中31例死于甲狀腺癌本身，7例死于遠處轉移。以CCHE1≥1.68為高表達，<1.68為低表達。Kaplan-Meier生存分析結果顯示，CCHE1低表達患者5年生存率為67.35%，明顯高于高表達患者(31.24%，P<0.05)。見圖2。

圖2 不同CCHE1水平甲狀腺癌患者生存曲線

3 討 論

大部分甲狀腺癌患者經手術治療及輔助治療療效顯著，預后良好，但部分甲狀腺癌呈多灶型，出現包膜侵犯、遠處轉移、淋巴結轉移、TNM分期高等高侵襲性特點，容易復發，對甲狀腺癌患者的生命健康造成嚴重危害〔7〕。早期手術是提高甲狀腺癌預后的重要手段，因此早期診斷甲狀腺癌對改善患者預后具有重要意義〔8〕。超聲和細胞活檢術是鑒別和診斷甲狀腺癌的主要方法，超聲檢查受超聲醫生經驗和個人主觀因素影響比較大；細胞活檢術雖然靈敏度和特異度比較高，但其取材不當可影響結果，且患者依從性比較差，因此尋找靈敏度和特異度比較高的生物標志物對甲狀腺癌的早期診斷、靶向治療、預后評估具有重要意義〔9，10〕。

lncRNA為一種不參與蛋白編碼的RNA分子，長度大于200個核苷酸〔11〕。lncRNA雖不參與蛋白編碼，在可在轉錄、轉錄后以及翻譯等水平調控基因表達〔12〕。lncRNA參與細胞增殖、分化、凋亡等生物學過程，在惡性腫瘤的發生發展中具有重要作用〔13，14〕。lncRNA在甲狀腺癌的發生發展中也扮演重要角色，可用于甲狀腺癌早期診斷、預后評估及治療靶點的尋找〔15～17〕。CCHE1為新近鑒定的lncRNA，定位在人類10號染色體基因，最初在宮頸癌組織中被發現呈高表達而命名。后來研究發現CCHE1在多種惡性腫瘤發生發展中具有重要價值：CCHE1在宮頸癌組織中呈高表達，和宮頸癌腫瘤大小、臨床分期和生存率關系密切，CCHE1可通過增加增殖細胞核抗原的表達在宮頸癌細胞增殖中發揮重要作用，可作為宮頸癌的潛在治療靶點和預后生物標志物〔18〕；在非小細胞肺癌組織中CCHE1呈高表達，CCHE1表達水平和腫瘤大小及患者存活時間關系密切，CCHE1可通過ERK/MAPK信號通路促進非小細胞肺癌細胞的增殖、侵襲和轉移〔19〕；上調胃癌細胞中CCHE1可促進胃癌細胞增殖、抑制胃癌細胞凋亡〔20〕。

本研究表明CCHE1可能參與甲狀腺癌的發生發展過程，在甲狀腺癌的診斷、預后評估中具有重要價值，有望成為甲狀腺癌早期診斷、預后評估的潛在標志物。