初發急性白血病患者外周血T淋巴細胞亞群的表達探討

潘苑 任建敏 任茗睿

[摘要] 目的 探討初發急性白血病患者外周血中相關T淋巴細胞亞群表達情況。 方法 選取2017年2月～2019年3月于我院診治的34例初發急性白血病患者作為研究對象（試驗組），選擇同期于我院體檢的34例健康體檢者作為對照組。檢測兩組外周血中相關T淋巴細胞亞群指標，對兩組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10進行比較。 結果 試驗組初發急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平分別為（61.20±4.64）%、（30.53±3.70）%和（1.02±0.23），均明顯低于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）;而試驗組初發急性白血病患者CD8+水平為（44.14±3.50）%，明顯高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）;試驗組初發急性白血病患者IL-2為（11.60±1.13）pg/mL、IFN-γ為（23.25±2.50）pg/mL，均明顯低于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。試驗組初發急性白血病患者IL-4、IL-10分別為（41.36±3.50）pg/mL和（34.50±2.75）pg/mL，均明顯高于照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。 結論 初發急性白血病患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ表達下降，CD8+、IL-4、IL-10表達提升。

[關鍵詞] 初發急性白血病;外周血;T淋巴細胞亞群

[中圖分類號] R733.71 ? ? ? ? ?[文獻標識碼] B ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-9701（2019）31-0116-03

Expression of T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with initial acute leukemia

PAN Yuan ? REN Jianmin ? REN Mingrui

Department of Clinical Laboratory， Lishui Central Hospital in Zhejiang Province， Lishui ? 323000， China

[Abstract] Objective To evaluate the expression of related T lymphocyte subsets in the peripheral blood of patients with newly diagnosed acute leukemia. Methods Thirty-four patients with initial acute leukemia treated in our hospital from February 2017 to March 2019 were selected as the experiment group and 34 healthy subjects admitted to our hospital during the same period were selected as the control group. Relevant T lymphocyte subsets in the peripheral blood of the two groups were detected. The CD3+， CD4+， CD8+， CD4+/CD8+， IL-2， IFN-γ， IL-4 and IL-10 levels were compared between the two groups. Results The CD3+， CD4+ and CD4+/CD8+ levels of the experiment group were （61.20±4.64）%， （30.53±3.70）% and （1.02±0.23）， respectively， which were all significantly lower than those of the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. The CD8+ level of the experiment group was （44.14±3.50）%， which was significantly higher than that of the control group， with statistically significant difference （P<0.05）. The IL-2 and IFN-γ levels of the experiment group were （11.60±1.13） pg/mL and （23.25±2.50） pg/mL， which were all significantly lower than those of the control group， with statistically significant differences（P<0.05）. The IL-4 and IL-10 levels of the experiment group were （41.36±3.50） pg/mL and （34.50±2.75） pg/mL， respectively， which were all significantly higher than those of the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. Conclusion The expression of CD3+， CD4+， CD4+/CD8+， IL-2 and IFN-γ decreases and the expression of CD8+， IL-4 and IL-10 increases in the peripheral blood of patients with initial acute leukemia.

[Key words] Initial acute leukemia; Peripheral blood; T lymphocyte subsets

急性白血病為造血干細胞出現惡性克隆而引發的一種疾病，屬于造血組織的惡性腫瘤，又稱為“血癌”，目前臨床尚無有效的治療方法，且在診斷、治療以及預后過程中缺乏有效的且檢測方便的指標，因此尋找有效診治急性白血病的指標成為臨床醫學工作者不斷探尋的課題。文獻報道[1-3]急性白血病患者的發病和疾病進展與身體免疫紊亂存在嚴密相關性。于抵抗腫瘤的機體免疫反應過程中，與體液免疫對比，細胞免疫存在更加重要的影響效果。急性白血病患者體內外周血T淋巴細胞及NK細胞主要發揮機體細胞免疫作用，在抵抗腫瘤過程中存在重要價值[4-6]。本文將2017年2月～2019年3月我院診治的34例初發急性白血病患者納入實驗調查研究資料，對初發急性白血病患者外周血中相關T淋巴細胞亞群指標檢測結果進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月～2019年3月于我院診治的34例初發急性白血病患者作為研究對象（試驗組），選擇同期到我院體檢的34例健康體檢者作為對照組。對照組：年齡20～71歲，平均（39.62±4.63）歲;男14例，女20例。試驗組：年齡21～70歲，平均（39.55±4.45）歲;男15例，女19例。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 ? 兩組患者一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 ELISA檢測IL-2、IL-4、IL-10以及IFN-γ水平 ?檢測外周血中白細胞介素-2（IL-2）指標、白細胞介素-4（IL-4）指標、白細胞介素-10（IL-10）指標、干擾素（IFN-γ），方法：患者早晨空腹取靜脈血，離心后收集血清，-80℃保存待測。血清因子水平使用酶聯免疫吸附試劑盒（ELISA試劑盒）（Thermo，上海）進行測定，操作方法依據說明書進行。

1.2.2 流式細胞術檢測CD3+、CD4+、CD8+水平 ?試驗組初發急性白血病患者和對照組健康體檢者早上維持空腹采集5 mL肘靜脈血，將2 mL肘靜脈血放進EP管中，在4℃放置30 min，以800 rpm離心處理10 min，得到上清液，用于指標檢測，將其余3 mL血液放進EDTA抗凝管內實施混合[7-8]。于2 h內采用PBS緩沖溶液開展稀釋處理，分離得到單個核細胞，采用DMEM細胞培養液對細胞濃度調節至2×106個/mL。將100 μL細胞懸液添加CD3相關抗體、CD4相關抗體、CD8相關抗體，放在4℃遮光半小時，以800 rpm離心處理10 min，采用PBS緩沖液開展2次洗滌操作，將上清液吸出，添加染色緩沖液，采用流式細胞儀予以檢測[9]。

1.3 觀察指標

統計對照組健康體檢者及試驗組初發急性白血病患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平。

1.4 統計學分析

數據分析采用軟件SPSS 23.0。計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用獨立t檢驗，計數資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較

試驗組初發急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平分別為（61.20±4.64）%、（30.53±3.70）%和（1.02±0.23），均明顯低于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）;而試驗組初發急性白血病患者CD8+水平為（44.14±3.50）%，明顯高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.2兩組IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平比較

試驗組初發急性白血病患者IL-2為（11.60±1.13）pg/mL、IFN-γ為（23.25±2.50）pg/mL，均明顯低于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。試驗組初發急性白血病患者IL-4、IL-10分別為（41.36±3.50）pg/mL和（34.50±2.75）pg/mL，均明顯高于照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

急性白血病作為起源于造血干細胞的惡性克隆性疾病，主要表現為骨髓中原始細胞大量異常增殖，且出現骨髓外浸潤，正常造血受到抑制。眾所周知，免疫系統受累在白血病發生發展以及后續轉歸過程中起重要作用，而CD8+T細胞、CD4+T細胞以及NK細胞于急性白血病患者機體抵抗腫瘤免疫過程中存在一定效果[10]。本研究通過觀察急性白血病患者外周血中相關T淋巴細胞亞群指標變化，以期為急性白血病臨床診斷治療以及預后提供有效指標。

CD4+細胞可以促使T細胞及B細胞得以激活，促使T細胞以及B細胞產生細胞因子，促使CD8+T細胞及吞噬細胞激活情況加快，對B細胞抗體的合成過程帶來一定影響，促使機體抵抗腫瘤相關反應加強[11-13]。CD8+細胞于免疫應答過程的后期出現增加，予以靶細胞發揮細胞毒效果，對可溶的相關抗原予以辨別，合成抑制因子位置，對免疫應答實行抵抗，抑制CD4+細胞[14]。CD4+/CD8+有助于保證機體免疫內環境相對穩定性，在免疫調節過程中存在重要作用，能夠對體內免疫反應調整作用予以反映。本文相關數據值指標體現，初發急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于健康體檢者，而初發急性白血病患者CD8+高于健康體檢者[15-17]。急性白血病患者因自身疾病所致其體內輔助性T細胞含量減少，或輔助性T細胞功能下降，對白血病細胞辨認能力降低，對白血病細胞殺傷作用減少，輔助性T細胞和急性白血病發病及進展均具有相關性。

細胞因子能夠將腫瘤細胞殺死，或將抗腫瘤效應細胞予以激發獲得抵抗腫瘤效果，在抵抗腫瘤過程中存在重要作用[18]。輔助性T細胞包含Th1細胞及Th2細胞，而Th1細胞因子涵蓋白細胞介素-2（IL-2）、γ-干擾素（IFN-γ）指標等，參加機體細胞免疫過程;Th2細胞因子涵蓋白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-10（IL-10）指標等，參加機體體液免疫過程。Th1相關細胞因子/Th2相關細胞因子出現不正常表達為引發腫瘤細胞不被機體免疫檢測的原因之一[19-20]。本研究結果顯示，初發急性白血病患者IL-2、IFN-γ水平低于健康體檢者，而初發急性白血病患者IL-4、IL-10水平高于健康體檢者。提示：急性白血病患者體內免疫平衡往Th2發生轉移，為引發抑制體內抵抗腫瘤效果的因素之一，建議予以Th1相關細胞因子/Th2相關細胞因子平衡調節，促使Th1細胞引發的細胞免疫加強，有效抵抗腫瘤。

綜上所述，初發急性白血病患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ指標表達減少，CD8+、IL-4、IL-10指標表達增加，檢測以上指標有助于對初發急性白血病患者病情狀況予以評定。

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（收稿日期：2019-06-26）