黑皮雞樅菌工廠化生產關鍵技術

葉雷 劉定權 趙建龍 李小林

摘? ?要? 簡介黑皮雞樅生物學特性，以及工廠化液體菌種制備、工廠化制袋及接種、發菌及菌絲后熟管理等技術要點。從覆土材料選擇及預處理，設施廠房層架排袋，出菇管理及病蟲害防控，采收和貯運幾個方面闡述了從生產實踐中總結提煉出的工廠化出菇關鍵技術。

關鍵詞? ?黑皮雞樅菌;工廠化生產;關鍵技術

中圖分類號：S646.1+1? ? 文獻標志碼：B? ? DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.31.002

黑皮雞樅菌是四川近幾年快速發展的人工可栽培珍稀菌類之一，其子實體富含多糖、氨基酸和微量元素等，可生食，同時菌絲體發酵物和子實體含長根菇素（小奧德黃酮），具有抑制霉菌等生長和降低人體血壓的作用。四川省農業科學院土壤肥料研究所早在2000年就選育出了黑皮雞樅新品種[1]，對該類菌株的碳源、氮源、酸堿度、溫度等栽培特性進行了全面研究[2-3]，并在德陽、廣元和成都等地推廣應用，至今每年都有小規模的農法栽培。隨著科技的進步，工廠化生產成為食用菌產業發展的新方向。本文系對黑皮雞樅工廠化生產關鍵技術的總結提煉。

1 生物學特性

黑皮雞樅菌（Oudemansiella radicata），又名長根金錢菌、露水雞樅、長根小奧德蘑等[4]，屬中偏高溫型菇類，為擔子菌亞門（Basidiomycotina）、傘菌目（Agaricales）、白蘑科（Tricholomataceae）、小奧德蘑屬（Oudemansiella）的腐生菌[5]，野生種在四川、云南、廣西、河南和安徽等地有分布。其菌絲體喜pH值5.5～6.5的微酸性環境[6]，菌絲體生長溫度5～35 ℃，最適溫度18～25 ℃;子實體發生及發育的溫度15～32 ℃，最適出菇溫度22～27 ℃;菌絲有后熟特性，一般要經過30～40 d的生理成熟期;喜覆土出菇，但不覆土也可少量出菇。

2 工廠化液體菌種制備

2.1 母種制作

母種制作多選用固體斜面培養基或固體平板進行，常用培養基配方為：1）馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，pH自然，加水至1 L[7];2）馬鈴薯180～210 g，麥麩25～30 g，葡萄糖15～20 g，磷酸二氫鉀1～3 g，硫酸鎂0.5～1.0 g，維生素B1 5～10 mg，瓊脂18～22 g，pH值5.5～7.0，加水至1 L。

培養基制作按照常規方法進行。生產用菌種應選擇無雜菌、純度高、活力強的菌株。長期不用的菌種應采用蒸餾水法、液氮保存法等方式進行低溫保存。

2.2 液體菌種制備

2.2.1 一級搖瓶菌種制備

多采用容量1 L的三角瓶進行，其部分液體培養基如下：1）玉米粉2～4 g，酵母膏3～4 g，蔗糖18～22 g，磷酸二氫鉀0.2～0.5 g，七水硫酸鎂0.5～1.0 g，維生素B1 8～12 mg，消泡劑（聚二甲基硅氧烷乳液）0.2～0.4 mL，輕質碳酸鈣適量，pH值調整至6.5左右，加水至1 L。2）豆粕粉3～7 g，葡萄糖15～25 g，磷酸二氫鉀0.5～1.0 g，七水硫酸鎂0.5～1.0 g，維生素B1 8～12 mg，消泡劑（聚二甲基硅氧烷乳液）0.2～0.4 mL，輕質碳酸鈣適量，pH值調整至6.5左右，加水至1 L。

按照配方組分配制液體，在磁力攪拌器上加熱攪拌后分裝在容量為1 L的三角瓶中，液體裝量為三角瓶容量的45%以下，蓋好硅膠瓶塞，放在高壓滅菌鍋中按照張偉[8]所述的方法進行滅菌后，取出培養基放置在干凈的超凈工作臺上冷卻。

待液體溫度冷卻至28 ℃以下即可開展接種，整個接種過程采用無菌操作流程，將固體培養基上的菌絲體用接種工具劃為3～5 mm×3～5 mm×0.1～0.2 mm的接種塊，接種量控制在5～20塊/瓶，然后將接種塊轉移到液體培養基中，瓶口用無菌硅膠塞蓋緊，然后放置在黑暗的搖床上搖瓶培養。

搖床參數：溫度22～25 ℃，濕度自然，無光，轉速90～160 r/min。一般培養6～7 d，質量檢測合格后即可用于后續深層發酵接種。對不能及時使用的菌種，可先暫時存放在4 ℃冰箱，但是不能長時間存放。

2.2.2 液體菌種培養罐深層發酵

采用專業的食用菌液體菌種深層發酵培養罐進行液體菌種擴繁。所用液體培養基配方與一級搖瓶菌種用液體一致，按照組分進行擴大配制，采用成套設備對液體培養基進行滅菌并冷卻到28 ℃以下，用無菌方式將培養基導入深層發酵培養罐，并對液體進行合格檢測，對合格液體按照無菌操作流程將上述一級搖瓶菌種接入一級發酵罐中，一般1～3瓶接種1罐（100 L液體），且將接種后的三角瓶殘液在超凈臺內接入肉湯培養基和PDA斜面試管等，置于（37±1） ℃培養，16～48 h后觀察是否有雜菌生長，有條件可進行顯微鏡染色檢測。

設置培養罐參數：控制罐壓0.02～0.05 MPa，轉動頻率25～30 Hz，溫度25 ℃，根據罐體中菌絲量適當調整通氣量，液體與通氣比一般為1∶（0.2～0.5）。

一級發酵罐一般培養（5±1） d可達到菌絲體積占比8%以上的接種濃度，即可用于二級深層發酵罐（一般選擇1 000 L或者1 500 L的罐）接種，接種量10%左右;二級罐參數按照一級罐相同設置，一般培養4 d即可達到接種濃度，用于料袋接種。

3 工廠化制袋及接種

黑皮雞樅生產均采用袋料栽培，采用工廠化專業機械進行拌料、裝袋、滅菌、接種等。部分主要生產配方如下：

1）雜木屑75～78份，麥麩（或米糠）12～15份，玉米粉6～8份，過磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2份;

2）棉籽殼78～82份，麥麩（或米糠）10～12份，玉米粉5～8份，蔗糖1份，過磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2份;

3）雜木屑60～65份，玉米芯15～20份，麩皮（或米糠）15～18份，蔗糖1份，石膏粉1份，石灰3份;

4）棉籽殼50～60份，木屑25～35份，米糠10～13份，石膏1份，過磷酸鈣1份，石灰3份;

5）棉籽殼78～82份，豆粕5～8份，玉米芯10～15份，玉米粉2.5～3份，過磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2.5份。

按照配方稱取各種原料，先將主料干拌均勻，再加入其他輔料混合，并調節基質水份至55%～65%（重量比）。一般采用規格15 cm×33 cm×0.004 cm的聚丙烯料袋裝料，重量約1.15～1.25 kg/袋，料袋可選用套環或窩口方式進行生產。裝袋完畢后，進行高壓滅菌，維持溫度125 ℃、2 h，自然冷卻4～8 h，趁熱出鍋，放置在經消毒處理的冷卻室，采用降溫設備對料袋進行降溫，使得袋料中部溫度在28 ℃以下即可開展接種工作。料袋接種采用專業接種機械（見圖1）進行，控制接種量為液體菌種25～30 g/袋。

4 發菌及菌絲后熟管理

培養房須提前3～7 d預先清洗消毒，接種的料菌袋移入后，控制環境溫度（22±3） ℃，空氣相對濕度75%左右，黑暗無光，適當通風換氣。菌袋培養過程中，盡量減少人為走動，避免人為因素影響發菌效果，還要定期清理雜菌污染袋。控溫培養條件下，30 d左右菌絲即可滿袋，但是滿袋后不能急忙用于出菇，應繼續低溫培養菌袋，將環境溫度調控至（13±2） ℃，約維持20～30 d，當基料表面出現黑褐色條紋或出現凸起原基時，即可結束培養，轉入出菇環節。

5 工廠化出菇關鍵技術

5.1 覆土材料選擇及預處理

5.1.1 覆土材料選擇

黑皮雞樅覆土出菇是最理想的出菇方式，可大大提高出菇單產。所選覆土材料可為土壤、泥炭土、珍珠巖、腐殖質等，為了方便一般選用土壤進行覆土，所選土壤要求質地疏松，透氣性好，有機質含量豐富，以砂壤土為最佳。

5.1.2 覆土材料預處理

覆土前5 d左右，將沙壤土撒布石灰粉和噴施高效綠霉凈進行拌勻消毒，控制含水量在30%左右，pH值為8～10，然后悶堆并用薄膜覆蓋2～3 d，使用前一天測定土壤酸堿度，調整pH值為7.0～7.5，即可用于后續覆土或墊土。

5.2 設施廠房層架排袋

黑皮雞樅工廠化出菇均采用層架式（見圖2）出菇，其目的是提高單產，一般分為3～6層，單層層架長30～40 m，每層放置2 000～2 500個菌包，一個出菇房放置1.2萬～1.8萬個菌包。在準備用于出菇前3～5 d，用防霉、防蟲藥劑對菇房出菇層架、地面、墻體等進行消毒處理，然后再擺袋出菇。根據栽培出菇是否脫袋，分為脫袋出菇和袋內出菇兩種。

5.2.1 脫袋出菇

是一種將菌袋的塑料料袋人工去除，再進行覆土出菇的一種方式，因該種方法可增加出菇面積，間接提高出菇產量，是四川地區的主要栽培方式。

首先在出菇房中的潔凈層流罩下方采用無菌刀片將菌絲生理成熟了的菌袋表面聚丙烯料袋脫下，將菌包放置在消毒處理了的無菌塑料托盤中，裝滿后用平板拖車轉移至出菇種植架，采用機械臂或者人工將菌包排列在底部鋪有約5 cm厚經處理過的土壤上，垂直放立一般一排排列9個（菌包間距3 cm左右，菌袋規格17 cm×33 cm×0.004 cm），使得整個脫袋菌包鋪滿種植床架，然后將覆土土壤填滿菌包間隙，并覆蓋約5 cm厚的土壤（見圖3）。待后續出菇管理。

5.2.2 袋內出菇

是一種不用脫去菌袋的塑料料袋而直接在菌袋一端開口進行覆土出菇的方式，該方式過程簡單，處理廢棄菌渣容易，但由于出菇面積相對較小，單產相對于脫袋覆土略低。將菌絲生理成熟了的菌袋一端開口，用處理過的土壤覆蓋約5 cm厚，將開口菌袋垂直均勻地擺放在出菇房的床架上。待后續出菇管理。

5.3 出菇管理及病蟲害防控

無論是脫袋出菇還是袋內出菇，在工廠化出菇房中完成菌袋覆土后，都須對覆土進行澆水，所用水均為澄清石灰水（pH值7.0～7.5）;維持土壤含水量約25%左右，土壤溫度23～27 ℃，空氣相對濕度80%以上，1 500～2 000 lx光照，注意通風，15～25 d即可出現大量原基，原基長出后，要增加噴水次數，以細噴多次為原則，且宜在早晚噴。菇蕾繼續生長5～10 d，八分熟以前采收，采收完一茬停水養菌約5 d進入下一潮菇的管理。

在出菇期病蟲害防控上，以預防為主，在出菇房中放適量黃板、殺蟲燈、誘殺劑等，發現病蟲害立即隔離處理，如出現黏菌（見圖4左）等為害，可在其發生區撒入適量生石灰，營造強堿性環境加以控制;跳蟲（見圖4右）體表為油質，藥液很難滲入體內，應以預防為主，多在出菇房放置黃板，或在出菇前對菇房進行熏蒸消毒。

5.4 采收和貯運

當菌蓋開傘5～8成時（見圖5）即判定子實體可采收。采收時單手握住菌柄，輕輕向上旋轉拉出整個子實體，然后均勻放置在潔凈的托盤中，采收后立即放置在4 ℃冷卻室中預冷，再立即用小刀削去菌柄基部泥土及其“根”，然后可進行進一步分級。

分級完成的菇按照一定重量規格打包進行冷鏈鮮銷，保藏庫溫度0～4.0 ℃，無光，空氣相對濕度80%左右，一般保鮮期可達8～10 d。目前，四川省已在敘永縣麻城鎮建成食用菌工廠化生產基地，產品在本省銷售，同時遠銷北京、廣東、上海、重慶等市場，供不應求，市場前景廣闊。

參考文獻：

[1] 譚偉，鄭林用，彭衛紅，等.食用菌人工馴化新品種——露水雞樅選育研究[J].西南農業學報，2002，15（2）：24-27.

[2] 譚偉，鄭林用.六種碳源和氮源對長根奧德蘑菌絲生長的影響[J].西南農業學報，2001，14（3）：109-111.

[3] 譚偉.長根金錢菌生物學特性研究[J].食用菌學報，2001，8（3）：16-22.

[4] 陳建飛，程萱，周愛珠，等.長根菇化學成分及藥理作用研究進展[J].食藥用菌，2018，26（4）：222-224.

[5] 顧新偉，何伯偉，鄭巧平，等.浙南山區大型真菌[M].杭州：浙江科學技術出版社，2012.

[6] 鄒祥，胡昌華.長根菇液體深層發酵條件的研究[J].食品科學，2005，26（2）：130-134.

[7] 葉雷，付雨，鄒捷，等.四川3種商業塊菌內生真菌的分離及鑒定[J].中國農學通報，2018，34（24）：57-63.

[8] 譚偉，張偉.長根奧德蘑菌種培養基篩選試驗[J].西南農業學報，2001，14（S1）：127-129.

（責任編輯：丁志祥）