ＨＳ－ＳＰＭＥ－ＧＣ－ＭＳ聯用分析中成藥保濟丸揮發性成分

2019-12-23 01:22:25駱宇燊楊紅兵陳成劉毅盧金清江漢美李錦周

湖北農業科學 2019年22期

駱宇燊　楊紅兵　陳成　劉毅　盧金清　江漢美　李錦周

摘要：采用頂空固相微萃取（HS-SPME）及氣相色譜-質譜聯用技術（GC-MS）分析保濟丸中的揮發性成分。結果表明，利用HS-SPME-GC-MS法從中成藥保濟丸中分析出29種揮發性成分，驗證了其中15種成分，相對含量占保濟丸總揮發性成分的46.47%，其中含量最高的為十二碳烷（12.63%），其次為茅蒼術醇（6.79%）、百秋李醇（4.80%）、石竹烯（3.66%）等。

關鍵詞：保濟丸;揮發性成分;頂空固相微萃取;氣質聯用

中圖分類號：O657? ? ? ? ?文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2019）22-0182-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.22.042? ? ? ? ? ?開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Analysis of volatile components of the Chinese medicine

Baoji pills by HS-SPME-GC-MS

LUO Yu-shen1，YANG Hong-bing1，CHEN Cheng1，LIU Yi1，2，LU Jin-qing1，2，JIANG Han-mei1，2，LI Jin-zhou1

（1.Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065，China;

2.Research and Development Center of Medicinal Plant in Hubei Province，Wuhan 430065，China）

Abstract： Volatile components in Baoji pills were analyzed by using headspace solid-phase microextraction（HS-SPME） and gas chromatography-mass spectrometry（GC-MS）. Results showed that a total of 29 volatile components were analyzed by HS-SPME-GC-MS method from Chinese patent medicine Baoji pills， 15 of which were identified by experiments. The relative content accounts for 46.47% of the total volatile components of Baoji pills. The highest content was dodecane（12.63%）， followed by atractylodes ethanol （6.79%）， phenolic alcohol （4.80%） and caryophyllene （3.66%）.

Key words： Baoji pill; volatile components; HS-SPME; GC-MS

保濟丸由十六味中藥組成，包括厚樸、蒼術、廣藿香、薄荷等富含揮發油的藥味。其功能為解表、和中、減輕濕熱，可被用來治療胃腸不適和由食傷引起的腹瀉，亦用于暈車暈船[1]。研究發現，保濟丸可以用來抗菌[2]、解熱[3]、止瀉鎮痛及解痙[4]，還可用來治療梅核氣[5]、胃腸型感冒[6]。目前，保濟丸成分的研究方法包括水蒸氣蒸餾法[7]、超聲波提取技術[8]及有機溶劑提取[8]，而應用固相微萃取法（SPME）分析保濟丸成分未見文獻報道。

中國藥典中的保濟丸鑒別方法為顯微鑒別或薄層色譜法，部分采用高效液相色譜法測定其揮發油含量。保濟丸組方中有很多含揮發性成分，所以對保濟丸揮發性成分進行分析，引導人們對其產品質量的認可，對臨床合理用藥及充分利用保濟丸具有一定的指導意義。頂空固相微萃取法（HS-SPME）是一種新型的富集技術與樣品制備技術，具有萃取速度快、操作簡單等優點，特別適用于低揮發性組分的研究[9]。本研究運用頂空固相微萃取技術對保濟丸揮發性成分進行了分析，并用氣相色譜質譜聯用儀分析和鑒定其成分。

1? 材料與方法

1.1? 試驗材料

1.1.1? 藥材? 保濟丸：廣州王老吉藥業股份有限公司（批號為1708031）。

1.1.2? 儀器? 氣質聯用儀，美國Hewlett-Packard公司;手動固相微萃取裝置，德國IKA公司;65 μm聚二甲基硅氧烷-雙乙烯基苯（PDMS/DVB）萃取纖維頭，美國Supelco公司;15 mL頂空瓶;電子分析天平。

1.2? 試驗方法

1.2.1? 試驗準備? 利用研缽搗藥罐將藥品搗碎后，裝入頂空瓶，每瓶藥品重量1 g。

1.2.2? 頂空固相微萃取法? 經過對萃取頭、取樣量、萃取溫度、平衡時間等因素的考察，獲得最佳固相微萃取條件[10]。取保濟丸粗粉1.0 g，置于15 mL頂空瓶中，插入一個手動噴射器與6 μm PDMS/DVB萃取纖維頭。120 ℃下預平衡10 min，將頂部空氣抽提15 min延長后立即插入色譜儀進樣口（溫度在230 ℃）中，解吸時間為3 min。

1.2.3? GC-MS分析條件? 采用氣相色譜-質譜（GC-MS）分析方法對預處理過的樣品進行分析。

1）色譜條件。色譜柱：HP-5MS（50 m×0.2 mm×0.33 μm）。載氣：氦氣（99.999%）。流速：1.0 mL/min。進樣口溫度：230 ℃。采取程序升溫，初始溫度為110 ℃，以15 ℃/min升溫到160 ℃，以20 ℃/min升溫到200 ℃，再以15 ℃/min升溫到230 ℃。

2）質譜條件。離子源：EI源。離子源溫度：230 ℃。四級桿溫度：150 ℃。電子能量：70 eV。倍增管電壓：1.2 kV。接口溫度：280 ℃。質量范圍：35～550 m/z。

2? 結果與分析

經化學工作站數據處理和面積歸一化方法從各總離子流圖中計算各組分中的相對比例，具體結果見圖1和表1所示。

HS-SPME-GC-MS分離得到29個峰，按各峰的質譜圖經計算機質譜數據庫檢索，與每個峰值的質量分析圖和文獻數據進行對照，驗證了其中15種成分，占揮發性成分總量的46.47%。保濟丸15種揮發性成分中，含量最高的為十二碳烷，占揮發性成分的12.63%，其次主要為茅蒼術醇（6.79%）、百秋李醇（4.80%）、1，7，7-三甲基-2環[2.2.1]-2-酰酯（3.66%）、雙戊烯（3.55%）、正癸烷（3.02%）、3，8-二甲基癸烷（2.41%），其他成分有石竹烯（1.59%）、正十四烷（1.46%）等。

3? 討論

采用頂空固相微萃取法提取保濟丸中的揮發性成分[11]。該方法是一種無溶劑的樣品處理技術，實現了樣品的吸附、濃縮、解析、進樣一體，使樣品預處理過程大為簡化，提高了分析速度及靈敏度，同時，二次污染較少。該方法適用于快速分離和鑒定保濟丸的揮發性成分，也可應用于其他中藥材及中成藥的揮發性成分的研究。

另外，保濟丸中揮發性成分主要為烯烴類、烷烴類、脂類、醇類等。主要的烯烴類有雙戊烯，主要的烷烴類有十二碳烷，主要的醇類有茅蒼術醇、百秋李醇，其中茅蒼術醇對腸道平滑肌有作用[12]，百秋李醇具有抗菌作用[13]。

參考文獻：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[M].北京：中國醫藥科技出版社，2015.1261.

[2] 郭衛真，劉? 妮，盧東榮，等.保濟丸抗菌作用的實驗研究[J].內蒙古醫藥，2010，24（67）：48.

[3] 茹? 麗，郭起岳，許常輝.保濟丸粉輻照前后解熱及止吐作用的研究[J].中國實驗方劑學雜志，2012，18（5）：191-193.

[4] 巫燕莉，李燕舞，杜? 群，等.保濟丸的止瀉鎮痛及解痙作用[J].現代醫藥衛生，2010，26（3）：322-324.

[5] 譚慶佳.保濟丸治療梅核氣19例[J].湖北中醫雜志，1991，13（4）：11.

[6] 黃曉丹，薛素琴，黃? 彬，等.保濟濃縮丸治療胃腸型感冒的臨床研究[J].中國民族民間醫藥，2009（16）：44-45.

[7] 曾和平，曾? 志，楊定橋，等.中成藥保濟丸揮發性化學成分（1）[J].藥物生物技術，2002，9（6）：359-363.

[8] 楊定橋，曾和平，曾? 志，等.中成藥保濟丸揮發性化學成分研究[J].中草藥，2001，32（12）：1065-1067.