福清市福清山羊綿羊肺炎支原體血清學(xué)調(diào)查

郭慧瑜 林裕勝 毛坤明 胡奇林

（1.龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 福建龍巖 360012；2.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013；3.福清市畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心 福建福清 350300）

綿羊肺炎支原體 （Mycoplasma ovipneumoniae，Mo）是引起羊支原體性肺炎（Mycoplasma pneumonia of sheep and goats，MPGS）的病原體，該病在全世界養(yǎng)羊國家廣泛流行。1963年，Mackay最早在綿羊中分離得到Mo，Carmicheal等證明了Mo的致病性，山羊亦可感染，其中羔羊最易感[1]。1982年，胡景韶等[2]首次在國內(nèi)綿羊體內(nèi)分離到了Mo，隨后寧夏和新疆等地也分離到了該病原。該病發(fā)病率達10%～80%，病死率在 15%～30%[3]。MPGS的臨床癥狀主要表現(xiàn)為體溫升高、咳嗽、流鼻液，精神沉郁、食欲減退、逐漸消瘦等，胸和胸膜發(fā)生漿液性和纖維素性炎癥。該病一年四季均可發(fā)生，主要集中在冬春季節(jié)，在寒冷潮濕、通風(fēng)不良、飼養(yǎng)密度過大以及個體營養(yǎng)缺乏導(dǎo)致機體抵抗力下降等因素易引起病原的快速傳播，且容易引起繼發(fā)感染[4]。Mo在福建省各縣市均有發(fā)生[5]，已成為制約福建省養(yǎng)羊業(yè)健康發(fā)展的主要疫病之一，給我省造成的經(jīng)濟損失較大。

福清市主要飼養(yǎng)福清山羊，養(yǎng)殖模式主要以散養(yǎng)為主，規(guī)模化養(yǎng)殖場較少，為了解Mo在福清市福清山羊中的流行情況，對2019年6月從福清市4個規(guī)模化羊場和10家散養(yǎng)戶隨機采集的350份血清樣品進行Mo抗體檢測。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 2019年6月采集福清市羊場的山羊血樣350份，加入抗凝劑混合10～12 min，離心20 min 左右（2 000～3 000 r/min），仔細收集血清，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 診斷試劑 Mo抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒購自上海赫果生物科技有限公司。

1.2 檢測方法 按照使用說明書操作，對待檢血清進行酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測。該試劑盒采用間接法測定標(biāo)本中Mo抗體水平，用純化的Mo抗體捕獲抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔板中依次加入Mo抗體，再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下最終轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中Mo抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中Mo抗體含量。

表1 福清市不同羊場山羊感染Mo血清學(xué)檢測結(jié)果

2 結(jié) 果

由表1可知，Mo陽性總份數(shù)為350，總抗體陽性率為88.3%。不同羊場Mo陽性率為76.7%～97.1%，平均陽性率為88.4%。

3 討 論

在樣品采集過程與養(yǎng)殖戶的溝通交流中發(fā)現(xiàn)，福清市無論是規(guī)模化養(yǎng)殖場還是散養(yǎng)戶飼養(yǎng)的福清山羊，在免疫程序上均有注射山羊傳染性胸膜肺炎（Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae，Mccp）滅活疫苗。然而本次血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，350份山羊血清樣品中Mo有309份陽性樣品，陽性率高達88.3%，其主要原因可能是現(xiàn)有的Mccp滅活苗與Mo缺乏交叉免疫保護性[6]；其次，是由于飼養(yǎng)管理水平不當(dāng)以及對該病的認識不足，沒有引起足夠的重視。

Mo在國內(nèi)其它省份發(fā)病率也較高，如倪文浩等[7]對新疆伊犁、巴州地區(qū)不同品種的綿羊感染Mo情況的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，總抗體陽性率達到15.54%（253/1 628）；黃秀君等[8]對攀枝花不同地區(qū)山羊的Mo感染血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示陽性率為46.0% （55/337）；張琳[9]對青海地區(qū)貴南縣貴德黑裘皮羊進行的Mo血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，陽性率為26.5%；韓林梅等[10]在廣西牛羊主要呼吸道疫病的血清學(xué)調(diào)查中，2016年和2017年廣西6市羊血清的 Mo個體陽性率分別為 32.2%（386/1 200）和49.2%（590/1 200）；吳錦艷等[11]對國內(nèi)部分地區(qū)羊支原體肺炎的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，Mo抗體陽性率為31.92%（1 086/3 402），其中陽性率最高的省 （自治區(qū)）為內(nèi)蒙古76.8%（636/828），其次是河北50%（60/120）、吉林 21.99%（93/423）。

通過與其它省份對比發(fā)現(xiàn)，福清市福清山羊Mo的抗體陽性率相對偏高，說明Mo在福清山羊中廣泛流行。當(dāng)?shù)匾呖刂行男枰訌妼υ摬〉谋O(jiān)測，同時做好疫苗免疫，現(xiàn)在市面上已有Mo滅活疫苗，只有做好疫苗免疫才能使羊場健康有序發(fā)展。此外，要注意消除各種誘導(dǎo)因素，加強檢疫、淘汰患羊、凈化羊場，并在引種時加強防范，做好生物安全防護 措施。