探討飲用純凈水微生物檢驗中菌落總數的不確定度檢驗研究

肖煒

伊犁州檢驗檢測認證研究院 新疆伊犁 835000

進行微生物測試時，不確定度是與測量結果有很大相關性的重要參數。測量值的方差由不確定性的特征給出。合理準確的測量和不確定性評估可提高測量結果的分析效率。近年來，在微生物檢測中已經認識到不確定性測試的重要性，因此越來越多地采用不確定性測試方法，并且在測試純凈飲用水中所含細菌菌落總數時，已經應用了不確定性測試以提高實驗結果的準確性。

1 純凈飲用水中微生物群落總數的實驗

1.1 實驗原理

在有氧條件下，可通過營養瓊脂將水樣品在37℃下溫育48小時，最后可得到1ml水樣品中包含的菌落總數。實驗是在實驗室中按照規定的方法進行的，每天都有其他人對樣品進行測試，在測試過程中，必須并行測試每個樣品，并且此測試必須由同一對象執行。在檢測到指定數量的組后，可以應用不確定性測試來評估菌落總數[1]。

1.2 實驗材料

實驗正常進行的基本保證是實驗材料，在該實驗中，菌落總數被評估為不確定性測試。所選的測試對象是水樣品，因此實驗中使用的材料是純凈飲用水。根據實驗設置，對不同類型的純凈飲用水進行采樣以確保測試結果的公平性。

1.3 實驗設備

在進行實驗的過程中，必須使用適當的設備來完成實驗。用于凈化飲用水中細菌總數檢測的總細菌菌落計數實驗的主要實驗設備是高壓釜，電干燥箱，恒溫水浴。鍋和恒溫培養箱。通過實驗室設備和實驗室試劑的輔助功能，可以有效地對純凈飲用水樣品進行微生物檢測并確定菌落總數。

1.4 實驗方法

執行檢查時，可靠的標準是《生活飲用水標準檢驗方法微生物指標》。第一步是徹底混合均勻水樣品，在抽吸時，進行無菌工作，然后將水樣品注入無菌鹽水試管中，混合并稀釋以形成以下濃度的稀釋液：1:10之后，將稀釋劑滴回到無菌鹽水試管中以形成1:100稀釋液，重復最后一步一次以獲得1:1000稀釋液，然后將這些稀釋液置于適當的條件下。保留以備將來使用。稀釋完成后，取兩個無菌板，注入原液樣品和稀釋劑的稀釋液，以吸入兩種液體。將營養瓊脂倒入每個培養皿中，并在約45℃的溫度下注入營養瓊脂，并立即搖晃以確保充分混合[2]。同時，還需要控制營養瓊脂空白。瓊脂變硬后，將板翻轉過來并將其放入培養箱中。保溫箱的溫度約為36℃，溫度范圍為上下1℃。潛伏時間為48。培養完成后，進行菌落計數，將稀釋倍數在30至300范圍內的菌落數乘以稀釋倍數和平均菌落數的結果作為檢測結果，最后根據相應的數學模型完成計算。

2 菌落總數的不確定度檢驗

2.1 分析來源

檢查純凈飲用水中的菌落總數時，有許多不確定性來源。測試環境，培養時間，樣品均勻性，人數等可重復性都是高度可重復的，導致存在不確定性。培養條件，培養時間和培養溫度具有一定的公差，差異的存在會帶來不確定性。進行采樣時，對水進行采樣可以確定體積。當在該影響下稀釋水樣品時，稀釋量也不確定。實驗室工具和實驗室試劑（例如吸管，培養基等）會帶來不確定性。樣品存儲條件，時間和溫度均已存儲。如果條件的類別同時改變到兩個條件，則菌落總數將在一定程度上受到影響，并且存在不確定性。不確定性包括兩種類型：A和B。在實際的微生物測試中，組分B對合成不確定度的貢獻相對較小，主要原因是重復測量。執行不確定性測試時要考慮的不確定性的主要來源是可重復性。也就是說，在評估不確定性時，我們使用統計方法（A型）來執行。

2.2 不確定性評估

根據上述實驗方法，每天對15個水樣進行集落總數測試，每個水樣形成兩個測試結果，取每個對數以計算兩個對數的平均值。殘差平方和的形成。檢測完成后，需要進行計算。計算中使用的公式為貝塞爾公式。首先計算合并樣品的標準偏差，然后計算檢測結果的不確定度并擴大不確定度。計算擴展不確定性時，需要根據該值查詢T分布，最后可以確定擴展不確定性值[4]。表達測試結果時，如果選擇兩次測量的對數平均值，則不確定度范圍應在數值減去平均值與相加的平均值之間。一般來說，這種方法在任何時候都適用于不確定性的測量范圍。例如，在15個選定的水樣本中，測量后3次的對數平均值為1.874，根據貝塞爾公式計算的對數平均值為0.078，因此不確定性范圍為：1.796至1.952。

在平板測試中，如果測試結果大于10CFU/mL，則分布狀態變為偏斜分布，必須將數據轉換為log才能使測量結果呈正態分布。此后，分發狀態接近正常。在不確定性測試的情況下，評估不確定性最合適的方法是可重復和可再現的數據，因為微生物測試的嚴格性不強，并且不屬于統計和計量類別。準確評估不確定度可提高微生物檢測結果的科學性和公正性。實際上，對于不確定性測試的使用，相關標準和要求中有明確的規定，在以下三種情況下，微生物測試報告應包括不確定性測試。當應用程序的有效性或類型與不確定性相關時，第二個原因是客戶明確建議進行不確定性測試，第三個原因是不確定性在結果混合時會產生一定的影響。在水微生物測試中，不確定度測試是重要的部分，可以看出，為了提高測試結果的準確性，有必要增加其在常規實驗中的應用[3]。

3 結語

當檢測純凈飲用水中細菌菌落的總數時，我們采用不確定度測試方法來提高測試結果的準確性。隨著微生物檢測的發展，檢測結果將繼續增加。這樣，必須更新不確定度范圍，以提高不確定度評估的準確性并確保微生物檢測結果。這非常科學，可以提高結果的可用性。目前，不確定度測試在測試中的應用仍較少，不確定性測試在不斷深入研究過程中的應用將得到加深，同時水質細菌群落總數的確定將進一步加深可靠、公平。