兩種肺炎支原體特異性抗體IgM檢測方法的比較

王旭華

肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae，MP)是一種能在無生命培養基上自行生長繁殖，介于病毒和細菌之間最小的不易染色的無細胞壁原核微生物[1]。通過飛沫以氣溶膠微粒的形式傳播，可引起肺炎支原體肺炎(MPP)。MPP約占各類肺炎總數的20%以上，5～20歲年齡段的發病率較高，且一年四季均可發病。近年來，其感染發生率呈上升趨勢。由于肺炎支原體感染的臨床癥狀不明顯，X射線征象缺乏特異性，臨床常采用實驗室血清學方法檢查予以確診。為了確保臨床對肺炎支原體感染檢測的及時準確，選用一種高靈敏、高特異性、快速、經濟的方法顯得尤為重要[2]。本文采用酶聯免疫法(ELISA)與免疫膠體金法(GIA)對我院2011年10月至2012年8月540份疑似MP感染患者血清標本同時進行平行檢測，并依據檢測結果對兩種方法的診斷效果及臨床應用價值進行分析評估，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 實驗儀器 科華ST-360全自動酶標儀，瑞美RW-1600自動洗板機。

1.2 標本來源 選自2011年10月至2012年9月烏蘭察布市中心醫院檢驗科采集的門診及住院疑似MP感染患者血清標本540份。血清采集后，即置-20℃保存。

1.3 試劑 酶聯免疫法(ELISA)采用上海滬尚生物科技有限公司生產的酶聯免疫法測定抗肺炎支原體(IgM)試劑盒;免疫膠體金法(GIA)采用福建三明博峰生物科技有限公司生產的肺炎支原體IgM抗體檢測試劑盒。

1.4 實驗方法 ①先將采集的540份血清標本用被動顆粒凝集法(PPA)(采用利弗奧(香港)醫藥有限公司生產的賽樂迪亞MYCOII肺炎支原體抗體診斷試劑盒)結合CRP測定、血象分析及肺部X線檢查進行定性檢測。②將采集的疑似MP感染患者血清標本540份，分別進行酶聯免疫法(ELISA);及免疫膠體金法(GIA)肺炎支原體特異性抗體IgM平行檢測，具體檢測方法、結果判斷，均嚴格按照相應試劑盒說明書執行。

1.5 統計學方法 采用SPSS13.0軟件，計數資料用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清屬性測定結果 經上述綜合檢測分析，測定疑似MP感染患者血清標本540份，其中，MP陽性174份，陰性366份，將此次綜合檢測結果作為比對的參照標準。

2.2 兩種血清學檢測方法結果的比較 酶聯免疫法(ELISA)在真陽性(TP)、假陽性(FP)、真陰性(TN)、假陰性(FN)等方面與免疫膠體金法(GIA)比較差異有統計學意義(P＜0.05)，檢測結果見表1。

2.3 兩種血清學檢測方法評價指標的比較 評價指標包括:假陽性率(FPR)、假陰性率(FNR)、敏感度(Sen)、特異度(Spe)、陽性似然比(+LR)、陰性似然比(-LR)、陽性預測值(PPV)、陰性預測值(NPV)、約登指數(Youden index)及總符合率(Coincidence rate)等10項，經對比檢測結果表明，酶聯免疫法(ELISA)在各項指標對比中優于免疫膠體金法(GIA)。見表2。

表1 兩種血清學檢測方法結果的比較(n)

表2 三種血清學檢測方法評價指標的比較(n，%)

3 討論

肺炎支原體(MP)是引起支原體肺炎的病原體，是介于細菌和病毒之間的具有厭氧性并能獨立生存最小微生物。無細胞壁，含有DNA及RNA，通過飛沫以氣溶膠微粒的形式傳播。肺炎支原體侵入呼吸道后其表面膜上的P1蛋白質粘附于呼吸道上皮細胞表面，并伸出微管插入細胞內吸取營養、損傷細胞黏膜，繼而釋放出核酸酶、過氧化氫等代謝產物引起上皮細胞的溶解、腫脹直至壞死，而引起肺炎支原體肺炎(MPP)[3]。由于MP感染的臨床表現及X線征象均缺乏特異性，只能通過實驗室對病原體分離與培養、血清學檢驗及PCR技術等診斷方法進行確診。實驗室MP的分離培養的方法雖然可以作為臨床確診的依據，但標本分離操作復雜，并需要較長時間培養且陽性檢出率低，不易作為臨床快速診斷的方法[4]。PCR診斷技術檢測的敏感度(Sen)、特異度(Spe)均高于其他方法，但費用相對較高，不適于基層醫院開展。目前，MP的診斷主要依靠血清學檢測IgM方法，而MP-IgM是機體被肺炎支原體感染后最早出現的抗體，選擇一種能快速、高效檢測MP-IgM的方法，有利于早期診斷[5]。本文采用酶聯免疫法(ELISA)與免疫膠體金法(GIA)2種目前實驗室檢測MP-IgM常用的方法，對540份疑似MP感染患者血清標本同時進行平行檢測，結果顯示，2種方法都具有高敏感度、高特異度且操作簡便，均可用于臨床早期快速診斷MP，通過對2種檢測方法10項評價指標的比較，ELISA法優于GIA法，2種方法聯合應用可為臨床提供更客觀、更準確的檢測結果，提高MP診斷符合率，以減少假陰性(漏診率)和假陽性(誤診率)的危害。

[1]楊雪梅，陳永權，顧德林.252例支原體肺炎血清抗體檢測報道.臨床肺科雜志，2009，14(12):1580-1581.

[2]俞善春，張宏俠，尹敢，等.三種血清學實驗方法對肺炎支原體抗體檢測的比較.國際檢驗醫學雜志，2012，33(1):85-86.

[3]孔東輝，王輝，李榮利，等.兩種肺炎支原體測定方法在臨床診斷中的應用.檢驗醫學與臨床，2011，8(22):2813-2814.

[4]吳曉，鄭穎，趙志鋼，等.被動凝集法檢測肺炎支原體抗體的實驗室研究.中國衛生檢驗雜志，2009，19(12):2886-2888.

[5]熊偉，鄒麗芬，趙心宇.兒科呼吸道疾病中肺炎支原體感染的結果分析.中國微生態學雜志，2009，21(12):1123-1124.