文貴輝,楊 海,劉增再
(1.湖南環境生物職業技術學院,湖南衡陽 421005;2.衡陽師范學院,湖南衡陽 421000; 3.長沙市動物疫病預防控制中心,湖南長沙 410000)
抗生素的使用可能增加動物源性食品中藥物殘留和致病菌產生耐藥性的風險,因此,食源性抗菌藥物被限制使用或禁用,我國養豬業正面臨著來自疾病方面的嚴峻挑戰。尋找新型飼料添加劑,改善豬健康、預防疾病成為當務之急。多年來,許多中藥和天然產品被用作促進豬健康的飼料添加劑,一些天然草藥可以改善豬肉品質和風味(胡丹等,2015)。多糖廣泛存在于中藥中,具有多種生物活性,如免疫調節、抗氧化、抗病毒、降糖、降脂等(劉慧,2007)。靈芝作為一種重要的促進健康的中藥在中國已使用2000 多年,多糖是靈芝的主要活性成分之一。研究發現,靈芝多糖除具有抗腫瘤、抗氧化的作用以外,還可以通過增強抗原遞呈細胞和單核吞噬細胞的功能來調節免疫水平,此外,靈芝多糖還具有一定的抗氧化性能和脂質代謝調節功能(楊美璐等,2018)。靈芝多糖生產成本較高,不利于推廣使用,而靈芝細胞外多糖(EPG)經大規模人工浸沒發酵,大大降低生產成本,使EPG 作為飼料添加劑成為可能。有報道稱EPG 能促進T 淋巴細胞和B 淋巴細胞的增殖,增強免疫器官的重量,提高小鼠巨噬細胞的白細胞數量和吞噬能力(Kong 等,2000)。本文旨在評價EPG 對育肥豬生長性能和血液指標的影響。
1.1 試驗材料 以靈芝浸沒發酵液為原料制備靈芝細胞外多糖,去除菌絲體后,對發酵液濾液進行透析濃縮,加入95%(V/V)乙醇沉淀粗多糖。粗細胞外多糖經干燥、粉碎后用苯酚- 硫酸法測定EPG 含量為8.76%。
1.2 試驗設計 試驗在四川省某規模化養豬場進行,選擇體重為(53.13±0.46)kg 的生長豬100頭,隨機分為4 組,每組5 個重復,每個重復5 頭豬。試驗1、2、3 組分別在對照組基礎飼糧基礎上添加0.1%、0.2%、0.3%EPG。試驗分為兩個階段,對應的基礎飼糧見表1,兩個階段分別持續35 d。

表1 飼糧配方和營養水平
1.3 樣品采集及指標測定
1.3.1 生長性能 分別在兩個階段開始和結束時稱量育肥豬的空腹體重,每天記錄給料量和剩余料量。計算試驗兩個階段和全期的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料肉比(F/C)。
1.3.2 血液指標 在試驗第70 天早晨,每個重復隨機選擇2 頭育肥豬,前腔靜脈采血,10 mL/ 頭,血液樣本用EDTA 抗凝,采血前將豬饑餓12 h。血液在室溫靜置1 h 后離心收集上層血漿。用ELISA 試劑盒(賽默飛世爾科技公司)測定血漿中免疫球蛋白G(IgG)、白細胞介素2(IL-2),自動生化分析儀檢測血漿中總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)濃度。1.4 數據統計 采用SAS 9.2 對數據進行方差分析,采用Duncan’s 法多重比較。結果以“平均值± 標準誤”表示,P <0.05 為差異顯著。
2.1 靈芝細胞外多糖對育肥豬生長性能的影響 由表2 可知,EPG 處理組育肥豬在試驗第35 天和70 天時的體重與對照組無顯著差異。在0 ~35 d 階段,EPG 處理組ADG、ADFI、F/C 無顯著變化(P >0.05);35 ~70 d 階段,與對照組相比,試驗1、2、3 組育肥豬ADG 分別增加7.2%、9.5%、8.3%(P <0.05),F/C 降低4.5%、5.3%、4.6%(P>0.05)。在整個試驗期間,與對照組相比,試驗2 組ADG 顯著增加7.4%(P <0.05),試驗1、3組ADG 分別增加5.3%、5.7%(P >0.05),試驗1、2、3 組F/C 分 別 降 低3.0%、4.1%、2.9%(P >0.05)。

表2 靈芝細胞外多糖對育肥豬生長性能的影響
2.2 靈芝細胞外多糖對育肥豬血液指標的影響 由表3 可知,與對照組相比,試驗1、2、3 組育肥豬血漿中IgG 濃度分別增加20.1%、36.1%、25.5%(P <0.05),IL-2 濃度分別增加16.6%、23.3%、14.4%(P <0.05),球蛋白濃度分別增加10.4%、13.0%、13.8%(P <0.05),甘油三脂濃度分別降低10.9%、28.1%、17.2%(P <0.05)。試 驗2、3組育肥豬血漿中白蛋白和球蛋白的比值分別較對照組降低12.4%、11.5%(P <0.05),LDL-C 濃度分別降低12.8%、11.1%(P <0.05),試驗2 組血漿中總膽固醇較對照組降低9.2%(P <0.05)。

表3 靈芝細胞外多糖對育肥豬血液指標的影響
3.1 靈芝細胞外多糖對育肥豬生長性能的影響 近年來有報道稱,中草藥多糖具有提高豬抗病力,營養物質消化率,改善豬生長性能的作用(劉慧,2007)。靈芝是靈芝屬真菌,具有較高的藥用價值,長期以來用于治療糖尿病、支氣管炎等疾病。隨著技術進步,越來越多的研究開始分離靈芝的有效成分,現已報道的成分有200 多種,包括多糖、核苷類、生物堿等,其中靈芝多糖被廣泛研究,是靈芝主要的生物活性物質(姜沅彤,2015)。研究表明,靈芝多糖具有多種生物學功能,包括(1)促進巨噬細胞分化,調節淋巴細胞的免疫應答,增強機體免疫功能;(2)促進INF-γ 分泌,激活P38等信號途徑,抑制腫瘤細胞生長,并且在臨床試驗中也證實靈芝多糖的抗腫瘤作用;(3)清除自由基,起到抗氧化、抗衰老的作用;(4)調節糖代謝相關酶活性,降低血糖、提高胰島素敏感性;(4)降低炎癥因子表達,抑制炎癥反應(王穎等,2019 ;胡丹等,2015)。而目前靈芝多糖對畜禽生長的相關報道較少,本研究發現,育肥豬飼糧中添加EPG 顯著增加了育肥后期ADG,F/C 得到改善。Mushtaq 等(2017)研究表明,飼糧中分別添加靈芝、穿心蓮、姜黃均顯著提高肉雞ADG,F/C 降低。邢瑞虎等(2013)以1 日齡肉雞為研究對象,飼糧中添加靈芝培養物(主要成分為靈芝多糖和靈芝酸)顯著改善低營養水平下肉雞42 日齡時的飼料轉化率。此外,將靈芝多糖飼喂羅氏沼蝦發現,添加量為2.5 g/kg 時羅氏沼蝦的生長性能和消化酶活性顯著提高(Mohan 等,2016)。以上研究表明,飼糧中添加EPG 有助于提高育肥豬生長性能。
3.2 靈芝細胞外多糖對育肥豬血液指標的影響 血液指標可以直接反映機體代謝水平,并且與機體營養、健康狀況相關。細胞因子是T 細胞和B細胞免疫反應極其重要的調節因子,IL-2 濃度增加可促進T 細胞增殖并啟動細胞免疫,IgG 可以直接反映體液免疫狀態。在本試驗中,EPG 處理組育肥豬血漿中IL-2 和IgG 濃度均高于對照組,表明其體液免疫和細胞免疫功能均有改善。EPG對育肥豬免疫功能有增強作用,可以推測飼料中添加EPG 可以提高育肥豬健康狀況和對傳染病的抵抗能力。血漿中總蛋白、白蛋白、球蛋白在一定程度上能綜合反應動物體對蛋白質的利用情況及免疫水平,白蛋白與球蛋白比值下降表明合成更多的球蛋白以改善機體免疫功能(王婷等,2017)。本研究結果顯示,EPG 處理組育肥豬血漿中球蛋白含量、白蛋白/ 球蛋白顯著升高,從另一個角度表明,EPG 對育肥豬免疫功能具有促進作用。邢瑞虎等(2013)發現,靈芝培養物能顯著提高肉雞新城疫疫苗的抗體效價。易霞等(2017)發現,添加靈芝多糖能顯著降低血清中炎癥因子IL-1β 濃度,促進注射藍耳弱病毒組育肥豬產生特異性抗體。除此之外,在本試驗中添加EPG 降低了血漿中甘油三酯和總膽固醇的濃度,兩者在血漿中含量降低影響其在肉中的含量,進而提高肉質。Chen 等(2005)報道靈芝多糖影響高脂血癥大鼠血脂代謝,降低血清中總膽固醇和甘油三酯含量。本研究結果與前人報道相符,表明飼糧中添加EPG 能增強育肥豬免疫功能,起到調節脂肪代謝的作用。
綜上所述,飼糧中添加EPG 顯著影響育肥豬生長,這可能與EPG 增強育肥豬免疫功能有關,此外,EPG 還能影響育肥豬脂肪代謝,對肉質起到調節作用,最適添加量為0.2%。