“藍天使”玉簪組培快繁適宜培養基配方篩選試驗初報

陳慧蘭 陳 權 （上海孫橋現代溫室種子種苗有限公司，上海市浦東新區 201210）

李文劍 （上海孫橋溢佳農業技術股份有限公司，上海市浦東新區 201210）

李洪霞 （上海孫橋現代農業聯合發展有限公司，上海市浦東新區 201210）

玉簪（Hosta plantaginea）屬宿根草本，耐旱、耐寒、喜陰，是一種重要的園林地被植物。玉簪除可供觀賞外，其鮮花含有芳香油，可用于提取制作芳香浸膏；同時，玉簪的嫩芽可供食用，全草可入藥。因此，近年來，玉簪已成為極具開發前景的野生花卉和藥用植物，我國也陸續從美國和歐洲引進了不少優良品種進行栽培試驗。目前，已有部分品種在國內園林綠化上獲得應用，其中，“藍天使”玉簪備受關注。近年來，為促進玉簪的推廣應用，常使用組培方式進行快速、大量繁殖玉簪。在此背景下，筆者擬以“藍天使”玉簪為試驗材料，通過分析不同培養基對其愈傷組織的形成、芽的分化增殖和生根等的影響，篩選出適合“藍天使”玉簪組培快繁的最佳培養基配方。現將相關試驗結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材 料

選擇“藍天使”玉簪當年生無菌分株基部塊莖作試驗材料。

1.2 培養條件

以MS為基本培養基，附加不同種類和濃度的激素進行處理，另加3%蔗糖和0.6%瓊脂粉（生根階段的蔗糖濃度降為2%，基本培養基為1/2 MS），pH為5.8；培養過程中，光照時數為12 h/d，光照強度為2 500～3 000 Lux，溫度控制在（25±1) ℃。

1.3 試驗設計

1.3.1 芽誘導培養基篩選

共設7個處理，分別為：（1）MS+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（2）MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（3）MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（4）MS+1.5 mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA；（5）MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（6）MS+1.5 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA；（7）MS+2.0 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA。

1.3.2 芽增殖培養基篩選

共設8個處理，分別為：（A）MS+0.2 mg/L 6-BA；（B）MS+0.5 mg/L 6-BA；（C）MS+1.0 mg/L 6-BA；（D）MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA；（E）MS+1.5 mg/L 6-BA；（F）MS+2.0 mg/L 6-BA；（G）MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA ；（H）MS+0.5 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA。

1.3.3 生根培養基篩選

共設9個處理，分別為：①1/2 MS+0.2 mg/L IBA；②1/2 MS+0.2 mg/L IAA；③1/2 MS+0.2 mg/L NAA；④1/2 MS+0.5 mg/L IBA；⑤1/2 MS+0.5 mg/L IAA；⑥1/2 MS+0.5 mg/L NAA；⑦1/2 MS+1.0 mg/L IBA；⑧1/2 MS+1.0 mg/L IAA；⑨1/2 MS+1.0 mg/L NAA。

1.3.4 計算公式

芽誘導率（%）＝（有芽生成的塊莖數÷無菌塊莖數）×100；芽分化增殖比例=接種數量÷分切后數量，在轉入增殖培養后進行統計；生根率（%）=（生根苗數量÷接種數量）×100，在生根單株轉入生根培養基30 d后進行統計，以每株苗長根2～3條、根長0.5～1 cm為生根苗。

2 結果與分析

2.1 不同處理對塊莖形成愈傷組織和芽誘導的影響

從玉簪一年生無菌苗上取其基部塊莖，接種到不同培養基上，每個培養基接種20個塊莖，培養培養30 d后觀察統計其愈傷組織和芽誘導情況，結果見表1。

表1 不同處理對玉簪愈傷組織的形成和芽誘導的影響

由表1可知，各處理均可出芽。處理(1)、(2)基本上不形成愈傷組織，每個塊莖均可出苗，苗粗壯但出苗少；處理(5)可形成較好的愈傷組織，愈傷組織生成率達到100%，出芽數量多；處理(6)的愈傷組織塊大，但有玻璃化現象，出苗比處理(5)少。由此分析可知，NAA有利于愈傷組織的形成，6-BA有利于芽的形成，且能促進芽的分化生成，但高劑量的NAA和6-BA組合會形成過多愈傷組織并出現玻璃化現象。在本試驗中，使用2.0 m g/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的組合可得到滿意的愈傷組織和芽的誘導效果。

2.2 不同處理對芽增殖的影響

將分化并帶有芽的愈傷組織塊（每塊愈傷組織帶有1個芽）接種在不同增殖培養基上，每個培養基接種20塊，培養30 d后觀察芽增殖情況，結果見表2。

由表2可知，各處理間芽的增殖比例存在極顯著差異，其中處理（A）、（B）、（C)的芽增殖比例較處理（D）、（E）、（F）、（G）、（H)低；處理（D）、（H）的芽增殖比例達4以上，且分化芽的質量較好；處理（F）、（G）的芽增殖比例高，但因激素使用過量，芽的高度不如處理（D）、（H），且有玻璃化現象；處理（G）使用了玉米素，價格昂貴。由此可知，6-BA用量是芽分化增殖的關鍵，但劑量過高易出現玻璃化現象。在本試驗中，使用1.5 mg/L 6-BA與0.1 mg/L IAA的組合可提高芽的均勻度和高度，從而提高分化芽的質量，達到較好的增殖效果。

表2 不同處理對玉簪芽增殖的影響

2.3 不同處理對生根的影響

在增殖培養形成的大量叢生芽中，選擇生長較好的單株芽（芽高3～5 cm），接種于不同生根培養基上，每個培養基接種100株，培養30 d后觀察統計生根情況，以單株長根2～3條、根長0.5～1.0 cm為合格生根苗，結果見表3。

表3 不同處理對玉簪生根的影響

由表3可知，處理④、⑥、⑦、⑨均有較好的生根效果。其中，處理④、⑦均選用IBA，濃度分別為0.5 mg/L和1.0 mg/L，但使用0.5 mg/L IBA的生根效果優于使用1.0 mg/L IBA；處理⑥與處理⑨均選用NAA，濃度分別為0.5 mg/L和1.0 mg/L，雖然NAA也能得到100%的生根率，但因其基部有愈傷組織生成，生根效果不如IBA。因此，在本試驗中，以1/2 MS+0.5 mg/L IBA為最佳的生根培養基。

3 結 論

試驗結果表明，在玉簪基部塊莖誘導階段，以培養基MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+3%蔗糖的芽誘導效果最好；在芽分化增殖階段，以培養基 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+3%蔗糖的芽增殖效果最佳；在生根階段，以培養基1/2 MS+0.5 mg/L IBA+2%蔗糖的生根效果最好。