免疫分析法在毒品檢驗(yàn)鑒定中的應(yīng)用及發(fā)展

蔣正艷

宿遷子淵司法鑒定所，江蘇 宿遷 223800

一、引言

毒品是現(xiàn)今社會(huì)治安當(dāng)中的重點(diǎn)問題，在防治毒品工作中，毒品檢測(cè)技術(shù)具有重要的作用。其中，免疫分析法是一種具有廣泛測(cè)定對(duì)象的方式，在生物、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域也具有積極的應(yīng)用，對(duì)此，應(yīng)當(dāng)提高對(duì)該項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用重視程度，在不斷研究的過程中促進(jìn)該技術(shù)發(fā)揮更大的作用。

二、技術(shù)應(yīng)用

(一)酶放大免疫檢測(cè)

該技術(shù)即EMIT。在該技術(shù)中，應(yīng)用溶菌酶為標(biāo)記物，能夠?qū)Υ舐椤岱取⒑Ｂ逡虻榷喾N毒品類型進(jìn)行測(cè)定。在EMIT試劑盒當(dāng)中，所具有的三類試劑分別為酶底物、抗體以及酶標(biāo)半抗原。當(dāng)這幾者混合后，樣本中的酶標(biāo)半抗原以及半抗原則將同試劑抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，在反應(yīng)后，酶活力情況同樣本半抗原濃度具有相關(guān)特點(diǎn)，能夠以此對(duì)兩者標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行繪制，通過對(duì)酶活力大小的測(cè)定，即能夠?qū)颖景肟乖窟M(jìn)行推算。該試劑盒在檢測(cè)靈敏度方面具有較好的表現(xiàn)，也具有較好的單一性以及較快的分析速度，因此成為了毒品現(xiàn)場(chǎng)快速檢驗(yàn)的重要研究方向。同時(shí)，該技術(shù)也存在一定的不足，因該技術(shù)在測(cè)試中通常測(cè)試一簇毒品，雖然能夠?qū)Τ煞诸悇e進(jìn)行測(cè)定，但無法對(duì)干擾物質(zhì)間的交叉反應(yīng)進(jìn)行排除，需要結(jié)合區(qū)域方式進(jìn)行進(jìn)一步的確證。

(二)酶聯(lián)免疫吸附分析方法

該技術(shù)即ELISA，為應(yīng)用酶為標(biāo)記物的分析技術(shù)，在技術(shù)應(yīng)用中，將免疫酶技術(shù)同固相吸附技術(shù)進(jìn)行結(jié)合，以此使該技術(shù)從中獲得了快速的發(fā)展。其原理即在對(duì)免疫活性保持的基礎(chǔ)上，將抗體以及抗原實(shí)現(xiàn)對(duì)固相載體表面的結(jié)合，應(yīng)用酶對(duì)抗體、抗原標(biāo)記，保持抗體、抗原的酶催化活性。在具體測(cè)定工作中，也將根據(jù)對(duì)象需求將酶標(biāo)抗原以及樣本根據(jù)不同步驟同固相載體表面抗體發(fā)生反應(yīng)，在洗滌后實(shí)現(xiàn)與其他物質(zhì)的分離，保留固相載體上抗體復(fù)合物，之后結(jié)合載體樣本檢測(cè)對(duì)象與酶量形成比例關(guān)系。在將酶底物加入后，酶催化作用的存在，則會(huì)將其實(shí)現(xiàn)對(duì)有色物質(zhì)的轉(zhuǎn)變，以此同檢測(cè)對(duì)象量的關(guān)聯(lián)，通過對(duì)顏色變化情況的觀察，即能夠?yàn)楹罄m(xù)定量、定性檢測(cè)的進(jìn)行提供重要的依據(jù)。在應(yīng)用中，該技術(shù)具有較高的靈敏度，這同酶自身所具有的較高催化頻率具有直接的關(guān)系，能夠充分放大反應(yīng)結(jié)果。在具體應(yīng)用中，即需要能夠?qū)Σ煌牟襟E進(jìn)行應(yīng)用，如對(duì)于抗原檢測(cè)，可以應(yīng)用雙抗體夾心法，對(duì)于半抗原檢測(cè)，可以應(yīng)用抗原競(jìng)爭(zhēng)法進(jìn)行處理。

(三)熒光偏振免疫分析

該技術(shù)即FPIA，標(biāo)記物為熒光基團(tuán)，在實(shí)際應(yīng)用中具有較高的特異性以及較快的檢測(cè)速度，容易自動(dòng)化，能夠?qū)崿F(xiàn)高通量篩選目標(biāo)。該技術(shù)也具有較高的靈敏度，同色譜法相比具有接近的最小檢出量。從整體角度來說，這也是一種高效的分析方式，其原理，即應(yīng)用鎢鹵燈為光源，在檢測(cè)中發(fā)出方向不同、波長(zhǎng)不同的光，應(yīng)用過濾方式限定波長(zhǎng)在一定范圍內(nèi)，同時(shí)對(duì)光進(jìn)行光柵轉(zhuǎn)變處理，使其形成具有單一方向的藍(lán)色偏振光。之后，對(duì)熒光標(biāo)記抗原進(jìn)行照射，實(shí)現(xiàn)對(duì)綠色偏振熒光反射，具體偏振程度同熒光物質(zhì)分子大小具有直接的聯(lián)系，當(dāng)具有較大熒光物質(zhì)時(shí)，其在液體當(dāng)中具有較慢的轉(zhuǎn)速，以及較高的偏振程度。在測(cè)定中，熒光標(biāo)記抗原與目標(biāo)檢測(cè)物質(zhì)結(jié)合，標(biāo)記抗原濃度將對(duì)抗體數(shù)量產(chǎn)生影響，當(dāng)具有較高濃度、具有較多結(jié)合抗體數(shù)時(shí)，將形成更大的復(fù)合物分子，即待測(cè)物濃度同熒光偏沉具有反比的關(guān)系，可以按照該關(guān)系檢測(cè)樣本當(dāng)中的毒品。在技術(shù)應(yīng)用中，不必對(duì)熒光標(biāo)記物進(jìn)行分離，在具體操作中具有較為簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，在檢測(cè)靈敏度、檢測(cè)精密度以及試劑穩(wěn)定性方面都具有較好的表現(xiàn)。

三、技術(shù)發(fā)展

總的來說，免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)是具有高靈敏度、高特異性的技術(shù)，不僅在監(jiān)測(cè)藥物濫用以及檢測(cè)中發(fā)揮重要的作用，在人體免疫功能損傷方面也具有較高的應(yīng)用價(jià)值。從目前來說，單抗生化試劑的穩(wěn)定性，以及在常溫下的生物活性保持是重要問題，對(duì)此，作為科研人員需要加強(qiáng)單抗性質(zhì)研究，以此為基礎(chǔ)對(duì)生化試劑可逆性固化技術(shù)進(jìn)行陶坦，將酶標(biāo)抗體等物質(zhì)實(shí)現(xiàn)對(duì)“玻璃化”的發(fā)展。在未來相關(guān)技術(shù)不斷革新發(fā)展的過程中，電化學(xué)傳感器、生物發(fā)光免疫分析以及免疫場(chǎng)效應(yīng)傳感器等技術(shù)也將具有更多的應(yīng)用，在這部分技術(shù)不斷發(fā)展成熟的情況下，毒品分析檢測(cè)技術(shù)也將獲得新的發(fā)展，在毒品工作當(dāng)中發(fā)揮出更大的價(jià)值。

四、結(jié)束語

目前，我國(guó)的免疫分析技術(shù)正處于快速的發(fā)展當(dāng)中，并具有了一定的成熟技術(shù)，能夠較好的應(yīng)用在毒品檢驗(yàn)當(dāng)中。在未來發(fā)展中，也將在現(xiàn)有基礎(chǔ)上進(jìn)一步加強(qiáng)研究，通過技術(shù)水平的提升優(yōu)化，切實(shí)提升我國(guó)毒品檢驗(yàn)水平。