Piwil2在三陰性乳腺癌中的表達及臨床意義分析

劉起勝 徐妮為 鄒艷 黃旭 徐筱紅

【摘要】 目的：探討Piwil2在三陰性乳腺癌中的表達及臨床意義。方法：收集本校附屬醫院病理科確診為三陰性乳腺癌的40例患者作為觀察組，另選40例非乳腺癌患者作為對照組，對所有患者的Piwil2表達情況進行比較，并對Piwil2在不同病理分期三陰性乳腺癌中的表達進行觀察。結果：Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽性表達率為82.50%，對照組為7.50%，差異有統計學意義（P<0.05），TNM分期越高，患者Piwil2陽性表達率越高;Pearson相關性分析顯示，Piwil2與三陰性乳腺癌TNM分期呈正相關（r=0.756，P<0.05）。結論：Piwil2與三陰性乳腺癌的腫瘤細胞生長增殖呈正相關，可為有效分子靶向治療乳腺癌提供參考依據。

【關鍵詞】

三陰性乳腺癌;Piwil2;陽性表達

三陰性乳腺癌是乳腺癌中的常見類型，主要指孕激素受體、雌激素受體及人表皮生長因子受體均為陰性的乳腺癌，該病具有侵襲性強、惡性程度高等特點，嚴重威脅患者身心健康，目前是乳腺癌研究領域的熱點課題[1]。三陰性乳腺癌的治療多樣化，靶向治療是目前的主要方向，隨著研究的深入，越來越多的基因、蛋白質被人們認識，Piwil2便是其中之一。本研究分析Piwil2在三陰性乳腺癌中的表達及臨床意義，以為靶向治療提供參考，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

收集本校附屬醫院病理科確診為三陰性乳腺癌的40例患者作為研究對象，分為觀察組，另選40例非乳腺癌患者為對照組。觀察組年齡26～67歲，平均年齡（42.37±6.42）歲;TNM分期為Ⅰ期11例，Ⅱ期21例，Ⅲ期8例。對照組年齡25～69歲，平均年齡（43.05±6.18）歲。本研究經院倫理委員會批準，患者均接受根治性手術，術前未接受放化療，無其他遺傳性疾病、惡性腫瘤，未發生遠處轉移。

1.2方法

儀器用具包括：石蠟切片機、BX51顯微鏡、顯微攝像系統、自動脫水機、自動包埋機、移液器、濕盒等。試劑包括：Piwil2免疫組化試劑盒、酸性蘇木素染色劑、AEC顯色試劑盒等。以免疫組化法進行，采用SP三步法：1）切片脫蠟至水;2）抗原修復;3）0.3%H2O2處理切片10～20min;4）PBS洗3次，1min/次;5）加入血清孵育20min;6）摔干血清，加入一抗60min;7）PBS洗3次，2min/次;8）加入二抗孵育15min;9）PBS洗3次，2min/次;10）加入三抗，孵育15min;11）PBS洗3次，2min/次;12）AEC孵育切片5～10min;13）PBS洗，水洗;14）蘇木素染核5～10min;15）水洗，返藍并封固。

1.3結果判斷

在光鏡下形態學觀察，每張切片隨機選5個視野，每個視野計數100個細胞，根據染色強度計分為0～3分，分別對應無色、淡黃色、棕黃色及棕褐色，根據陽性細胞所占半分比計分0～4分，分別對應<5%、5%～24%、25%～49%、50%～74%、≥75%。陰性（-）為0～1分;弱陽性（+）為2～3分;陽性（++）為4～5分;強陽性為（+++）。

1.4統計學方法

采用SPSS 18.0軟件進行統計學處理，采用χ2檢驗及Pearson相關性分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽性表達情況

Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽性表達率為82.50%（33/40），對照組為7.50%（3/40），差異有統計學意義（χ2=45.454，P<0.05），TNM分期越高，患者Piwil2陽性表達率越高。見表1。

2.2Pearson相關性分析結果

Pearson相關性分析顯示，Piwil2與三陰性乳腺癌病理分期呈正相關（r=0.756，P<0.05）。

3討論

三陰性乳腺癌通常發生于50歲以下的年輕女性，常伴有遠處轉移，致死率高，該乳腺癌類型不表達激素受體和Her2，無法實施內分泌治療或抗Her2治療，化療是主要治療選擇，不過三陰性乳腺癌細胞對化療藥物具有普遍耐藥性，因此傳統化療方案整體療效較差，針對化療耐藥的三陰性乳腺癌患者，分子靶向治療受到廣泛關注[2]。

分子靶向治療是以腫瘤細胞過度表達的某些基因和蛋白分子為基礎，目前在三陰性乳腺癌中已經發現一些基因和蛋白分子存在陽性表達的情況，有研究顯示，P53在三陰性乳腺癌中陽性表達率明顯高于非三陰性乳腺癌，miR93表達水平也明顯比非三陰性乳腺癌高，P53、miR93陽性者通常比陰性者更容易發生轉移等情況，預后效果明顯降低[34]。近年來Piwil2也開始受到臨床關注，其屬于Argonaute家族的PIWI亞家族，位于染色體8p21.3，約有23個外顯子編碼，973個氨基酸。有研究發現，Piwil2表達增加可使stat3和Bcl基因表達上調，對P53蛋白表達進行抑制，而且可和NFKB共同表達在細胞核中，促進腫瘤惡性增殖，而對Piwil2表達進行抑制有助于恢復P53水平，減少腫瘤細胞G2/M期細胞，從而對腫瘤增殖進行有效抑制[5]。也有學者發現Piwil2在DNA修復中有重要促進作用，通過參與DNA修復發揮抑癌基因作用[6]。

目前關于Piwil2在許多惡性腫瘤中陽性表達情況的研究報道已有不少，但其在三陰性乳腺癌中陽性表達情況尚不明確。本研究通過分析發現，Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽性表達率為82.50%，明顯高于非乳腺癌患者，且三陰性乳腺癌病理分期越高，其陽性表達率也越高。Pearson相關性分析顯示，Piwil2與三陰性乳腺癌病理分期呈正相關。由此可見，Piwil2表達水平對評價三陰性乳腺癌惡性程度可能存在參考價值，其可能成為分子水平治療三陰性乳腺癌的靶點。

綜合上述，Piwil2與三陰性乳腺癌的腫瘤細胞生長增殖呈正相關，可為有效分子靶向治療乳腺癌提供參考依據。

參考文獻

[1] 吳玨堃，熊志勇，阮瑩，等.DLL1基因在乳腺癌及三陰性乳腺癌中的表達及其臨床意義[J].實用醫學雜志，2018，34（20）：34063409.

[2] 楊帆，李長天，竇龍濤，等.三陰性乳腺癌分子靶向治療的研究進展[J].醫學信息，2016，29（13）：3334.

[3] 程維剛，劉九洲，靳夢琳，等.三陰性乳腺癌中p53蛋白產物的表達及其臨床意義[J].中華實驗外科雜志，2016，33（04）：939941.

[4] 石文龍，巫姜，孟慶杰，等.miR34c3p與M2型腫瘤相關巨噬細胞在三陰性乳腺癌中的表達及意義[J].現代腫瘤醫學，2019，27（01）：48.

[5] 馮定慶，閆克芹，張筱，等.Piwil2調控宮頸癌細胞惡性生物學行為的機制探討[J].中國癌癥雜志，2017，27（12）：921927.

[6] 楊金平.Piwil2與腫瘤干細胞放射耐受性的研究進展[J].現代醫藥衛生，2017，33（06）：856858.