藏藥熏倒牛的研究現狀與進展

劉越敏，柳娜，寇亮，劉雪楓，羅慧英，景明

(甘肅中醫藥大學藥學院，甘肅 蘭州 730000)

藏藥熏倒牛(BiebersteiniaheterostemonMaxim)別名臭花椒、狼尾巴，藏藥名 “明見賽保”，為牻牛兒苗科熏倒牛屬植物。熏倒牛具有濃烈腥臭氣味，主要分布于甘肅、青海、寧夏六盤山西坡、四川西北部(諾爾蓋)等，生長于海拔1 000～3 200 m的黃土山坡、河灘地和雜草坡地等[1]。據《中國藏藥》記載，熏倒牛味辛、苦，性寒，具有消腫止痛、清熱解毒、涼血、祛風的功效，其全草用于治療癰癤，丹毒，咽喉腫痛，胃痛，全身水腫和中風等病癥，其果實(狼尾巴蒿)用于預防感冒、小兒高熱驚厥、腹脹、腹痛等[2]。藏藥熏倒牛的活性成分主要有黃酮類、甾體類、生物堿類及 2 種倍半萜苷類等[3]，藥理學研究表明，熏倒牛具有抑菌殺蟲、抗氧化、鎮痛、抗炎、降血糖、降血壓等作用。熏倒牛單用的藥物治療效果可能不太明顯，與其他藥物配伍使用可能增強其藥效，達到更好的治療效果。近年來，大多數人進行研究熏倒牛與其他藥物的配伍使用，以增加熏倒牛的臨床應用，治療更多的疾病。本文對近年有關熏倒牛的化學成分、藥理作用、毒理學、質量標準以及配伍等方面的研究結果進行綜述，為促進藏藥熏倒牛的合理配伍、臨床合理應用以及進一步研究開發提供科學依據。

1 化學成分

1.1 黃酮類 張曉峰等[4]從藏藥薰倒牛中首次分離3個黃酮類化合物，通過化學方法光譜解析鑒定其結構分別為5,7,3′-三羥基-8,4′,5′-三甲氧基黃酮、木犀草素-7-葡萄糖苷、槲皮素-7-葡萄糖苷。王維恩等[5]研究發現熏倒牛中含有hypolatin-7-O-β-xylopyranoside、槲皮素等化合物(見圖1)。張育浩等[6]采用硅膠、葡聚糖凝膠 Sephadex LH-20、半制備高效液相色譜等方法對從熏倒牛中提取的化合物進行分離純化，得到木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、3′,4′,5,8-四羥基黃酮-7-O-β-吡喃葡萄糖苷等黃酮類化合物。張普照等[7]在熏倒牛全草95%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分離得到香葉木苷、金圣草黃素-7-O-槐糖苷、芹黃素7-O-槐糖苷、木犀草苷等10個黃酮類化合物。

圖1 分離得到的黃酮類化合物結構圖

1.2 生物堿類 目前，從熏倒牛中分離得到的生物堿類成分較少。吳海峰等[8]運用正相及反相硅膠柱色譜從熏倒牛全草中首次分離純化出3個生物堿類化合物,用現代波譜與X-ray單晶衍射等方法鑒定出3個化合物分別為山羊豆堿(1)，順式-4-羥基山羊豆堿(2)和反式-4-羥基山羊豆堿(3)。王維恩等[5]研究也發現熏倒牛中含有山羊豆堿、反式-4-羥基山羊豆堿兩種生物堿類化合物。化合物1～3的結構見圖2。

圖2 化合物1～3的結構圖

1.3 苯丙素類 有研究發現，從熏倒牛科植物中分離得到的苯丙素類化合物有傘形花內酯、東莨菪內酯和阿魏酸[9]，但是僅從熏倒牛中分離得到了傘形花內酯[4-5]。

1.4 其他成分 從熏倒牛中分離得到的成分除了上述化合物外，研究者從該植物中還分離得到糖類及甾醇類等化合物。王維恩等[5]從熏倒牛中分離得到了甘露糖醇。張育浩等[6]從熏倒牛地上部分分離出原兒茶酸甲酯、格鏈孢酚、(+)-去氫催吐蘿芙木醇等化合物(見圖3)。此外，還有實驗從其中分離得到了β-谷甾醇和胡蘿卜苷[4]。

圖3 分離得到的其他化合物

2 藥理作用

2.1 抑菌作用 王維恩[10]采用紙片法證明熏倒牛中的hypolaetin -7-O-β-xylopyranoside和山羊豆堿對7種細菌的生長均有顯著的抑制作用，并且呈現出對革蘭陽性菌的抑菌作用強于對革蘭陰性菌的抑菌作用。唐榮江等[11]研究發現熏倒牛浸膏對金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌有明顯的抑菌作用，且在一定范圍內，熏倒牛浸膏濃度越高，其對細菌的抑制作用越強，但對大腸桿菌、傷寒桿菌以及福氏痢疾桿菌等無抑制作用。張艷霞等[12]采用抑菌圈法測定熏倒牛乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位及水余液部位的抑菌活性，研究結果表明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯部位對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌以及陰溝腸桿菌有強抑制作用，對變形桿菌、糞腸球菌和白色念珠菌也有較強的抑制作用。她還證明熏倒牛乙醇提取物的石油醚部位和乙酸乙酯部位對陰道滴蟲有明顯抑制作用。

2.2 抗炎、鎮痛作用 有諸多研究表明熏倒牛具有一定的抗炎鎮痛作用。唐榮江等[11]采用小鼠扭體法和熱水甩尾法觀察熏倒牛浸膏及注射液對小鼠的鎮痛作用，發現熏倒牛浸膏及注射液均可減少小鼠扭體反應次數，且能延長反應潛伏期,證明熏倒牛有一定的鎮痛作用。王維恩[10]的研究也證實熏倒牛中的主要活性成分山羊豆堿對熱板所致痛的小鼠有顯著的鎮痛效果。景明等[13]的研究發現，熏倒牛的提取物對二甲苯所致的小鼠耳腫脹有抑制作用，可提高小鼠熱板法致痛的痛閾，表明熏倒牛有抗炎鎮痛作用，且70%乙醇提取物的抗炎、鎮痛作用明顯優于水煎液和水煎醇沉液。

2.3 鎮靜、解痙作用 到目前為止，國內外對熏倒牛鎮靜解痙作用研究較少。有研究表明熏倒牛浸膏及注射液對小鼠有一定的鎮靜作用，且可增強增強戊巴比妥鈉的催眠作用。此外，離體腸管試驗中，熏倒牛浸膏可使豚鼠回腸、家兔回腸及十二指腸自動收縮減小，甚至完全抑制，且能對抗乙酰膽堿、磷酸組織胺、氯化鋇引起的腸肌收縮，說明其具有松弛腸平滑肌的解痙作用[11]。

2.4 抗氧化作用 王淵龍等[14]以BHT為陽性對照，發現熏倒牛的3種溶劑提取物(乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、正己烷提取物)對DPPH自由基的清除能力均強于BHT，證明熏倒牛有一定的抗氧化活性，且乙醇提取物和乙酸乙酯提取物抗氧化活性明顯，呈濃度依賴性。

2.5 降血糖、降血壓作用 王維恩等[15]采用立鏈脲霉素誘導的糖尿病小鼠模型，給予不同劑量(0.5、1、5 mg·kg-1)的熏倒牛生物堿有效部位，檢測模型小鼠的血糖。實驗發現，高、中劑量組熏倒牛生物堿有效部位可顯著降低模型小鼠的血糖，且以高劑量 (5 mg·kg-1)的降糖作用最佳，說明熏倒牛生物堿有效部位對鏈脲霉素誘導的糖尿病小鼠具有明顯降血糖作用。他還研究發現，高血壓模型的SD大鼠腹腔注射5 mg·kg-1的山羊豆堿即有顯著的降血壓效果，降血壓作用快，可以使平均動脈壓下降40%。

2.6 其他作用 熏倒牛除了具有以上藥理作用外，還具有解熱和抗腫瘤等作用。張本印等[16]研究發現熏倒牛屬植物或其提取物在制備預防或治療肝癌中有一定的作用。有研究表明，熏倒牛浸膏及注射液均有解熱作用，可降低三聯疫苗引起的發熱[11]。

3 毒性

研究發現，大鼠連續15 d口服熏倒牛浸膏20 g·kg-1，其外觀、活動正常，血清 GPT 在正常值范圍，顯微觀察其主要臟器組織未見病變[11]。還有研究證實，山羊豆堿的LD50為54.75 mg·kg-1，屬于低毒[10]。景明等[17]進一步研究發現熏倒牛藥材提取物對家兔完整皮膚與破損皮膚均無明顯的毒性。王晶晶[18]通過研究熏倒牛提取物的毒性，也表明口服熏倒牛浸膏，在一定程度上安全可靠。以上對熏倒牛毒性的研究為熏倒牛的開發利用提供了一定的理論依據。

4 質量標準

對熏倒牛中化學成分的含量測定可以為熏倒牛藥材的質量控制提供參考依據。因木犀草素和槲皮素是熏倒牛藥材中的主要化學成分，所以大多數研究藏藥熏倒牛的相關學者通過測定這兩個主要化學成分的含量來評價不同產地熏倒牛的質量以及建立熏倒牛藥材的質量標準。陳暉等[19]采用反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測定不同產地熏倒牛藥材中木犀草素的含量，結果表明不同產地薰倒牛藥材中木犀草素的含量在0.42%～1.06%之間。此試驗也表明熏倒牛藥材中木犀草素的含量與總黃酮的含量呈正相關性，因此木犀草素的含量在一定程度上能夠反映藥材的質量。劉娟娟等[20]也采用相同的方法測定不同產地的藏藥熏倒牛中木犀草素及槲皮素的含量，其所測得的木犀草素的含量與陳暉等人的研究結果一致，槲皮素的含量則為0.12%～0.47%，且其中以青海貴德的含量最高，甘肅永登的含量最低。此研究進一步為熏倒牛藥材的質量標準提供了理論依據。王晶晶等[21]的研究表明，利用高效液相色譜法(HPLC)測定熏倒牛藥材中木犀草素的含量，其專屬性強，操作簡單，結果準確，重復性好，可為建立藏藥熏倒牛藥材的質量標準提供參考依據。王維恩等[22]研究發現不同產地的熏倒牛藥材中山羊豆堿的含量差別較大，同仁縣樣品含量最高，為0.365%，瑪多縣樣品含量最低，為0.113%。

5 配伍

藏藥成方“五昆英雄解毒散”、“十三味訶子湯散”等方劑中含有熏倒牛，用于清熱解毒[11]。除了傳統的熏倒牛配伍應用，研究人員發明了一些新的熏倒牛的藥物配伍。研究證明，熏倒牛與苦豆子配伍使用，具有清熱解毒、燥濕止帶、殺蟲止癢的功能，能夠有效治療細菌性陰道病、霉菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎等婦科疾病，且效果顯著[23]。劉長忠[24]通過研究熏倒牛與路路通、臭梧桐、鐵棒錘、百部、青風藤、寬筋藤、紅花、三七、生姜、冰片、薄荷腦、靈仙、獨活等配伍生產的藏藥鐵棒錘噴劑，結果表明其具有祛風除痹，消腫化瘀，活血止痛的功效，同時有消炎殺菌、止痛、止癢、防蚊蟲叮咬等作用，可用于關節疼痛、痛風、腰痛、扭傷、外傷、紅腫、燙傷和皮膚病的醫治。熏倒牛、蠟梅花、蜘蛛香、管仲、鼻血草、獐牙菜、腐婢根、韶子、漆姑草和漂搖豆的藥物組合物能夠治療慢性胃炎，且其具有療效好，治愈率高無任何毒副作用，療效穩定，不易復發等優點[25]。黃美英[26]根據君臣佐使的配伍原則配制研究發明， 熏倒牛、鱗衣草、紫葛、駱駝蓬子、鳳仙花、合萌根、蒲公英、花椒、老槍谷子、苧花、稻槎菜、楮莖、荊芥、空心莧、春不見配伍合用能夠清熱涼血、解表散風、解毒消腫，抗菌、消炎、抗病毒。液體藥劑可根治濕疹，見效快，治愈率高。此外，她還研究發明，熏倒牛與胡豆草、竻莧菜、胡燕卵、鱗衣草、南瓜須、紫麻、睡菜、茜草、胡荽、苧花、花椒、井口邊草、老槍谷子、萱藻以一定范圍內的重量份數配伍使用，其液體制劑可用于根治風疹[27]。藏藥熏倒牛與其他中藏藥配伍既可用于治療人類的某些疾病，也可以用于防治中藥材病蟲害。近年來，有研究發現熏倒牛、蒼術、丁香、藿香、艾葉、荊芥、芥子配伍合用對當歸麻口病的致病菌具有抑制作用[28]，這一研究為今后研究中藏藥配伍的應用拓寬了思路，使中藏藥不再僅限于用來治療人類疾病，同時，也為植物源農藥研究提供了理論依據。

6 小結

熏倒牛是一種傳統的藏藥，其使用歷史悠久，雖然國內外對熏倒牛的研究報道以及對其生物活性的研究較少，但熏倒牛在民間的藥用價值較大。近年來，對熏倒牛的藥理研究表明，黃酮類、甾體類、生物堿類等具有抑菌殺蟲、抗氧化、鎮痛、抗炎、降血糖、降血壓等作用。隨著對熏倒牛有效成分研究的不斷深入，其新的藥理作用與用途有望被人們發現。由于熏倒牛的活性成分在體內的作用機制以及藥效物質基礎不明確，阻礙了藏藥熏倒牛的大規模推廣和臨床合理應用。我們需要運用現代先進的科學技術與方法，進一步探討熏倒牛的藥理、毒理作用及相關藥動學機制，加強研究熏倒牛，建立熏倒牛研究體系，明確熏倒牛中已知活性成分在體內的作用機制，充分闡明其藥效物質基礎，為藏藥濕生扁蕾的進一步研究開發提供理論依據。目前，藏藥熏倒牛的質量標準的制定存在一定的問題，應該制定全面系統的質量標準，以提高熏倒牛藥材的質量，確保臨床用藥的安全性和有效性。此外，制定科學合理的質量標準，對熏倒牛藥材的質量控制及其生產的標準化、規范化、現代化也具有重要意義。新研究發現的熏倒牛的藥物配伍使用，不僅為熏倒牛的臨床應用擴大了使用范圍，也為熏倒牛的用途拓寬了思路。藏藥也是一類珍貴的藥用資源，我們應該加快對熏倒牛的研究，發現其新的藥理作用，為臨床用藥提供新的可能，使熏倒牛被更廣泛的使用。