大亞灣地區水產品中四種藥物殘留調查結果分析

林佩玲 方金通 吳錦輝 黃培衛 解欣斐

摘 要 為了解大亞灣地區水產品中違禁漁藥殘留情況，以7種較常見水產品作為研究對象，采用酶聯免疫分析法檢測試劑盒對其進行藥物殘留檢測。結果顯示，7個品類的4種藥物殘留分析中，只有網箱養殖的虎龍斑和黑鯛存在氯霉素殘留（高于檢測限濃度0.025 μg·L-1），呋喃唑酮、孔雀石綠和磺胺類（檢測限濃度分別為0.04 μg·L-1、0.375 μg·L-1、2 μg·L-1）在所有樣品中均未檢出。

關鍵詞 水產品;藥物殘留，酶聯免疫分析法;大亞灣

中圖分類號：X714 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.23.058

近年來，隨著我國水產養殖業的快速發展，水產品種和數量不斷增加，我國已經成為了世界水產品的消費大國和出口大國。但是養殖品種與養殖數量的增加勢必會造成各種養殖病害發生頻率的上升。對養殖水產品使用魚類藥物可以在一定程度上抑制水產動物的病害發生，但近些年來，部分養殖戶為了追求高收入，濫用魚類藥物，對我國經濟造成了很大的損失，并對食品安全和環境造成了潛在威脅。在這種嚴峻的形勢下，采用一種簡便、快速的分析方法對水產品中藥物殘留進行檢測變得尤為重要。免疫分析法是利用抗原-抗體特異性反應來檢測各種目標分析物的分析方法。這類方法具有操作簡便、經濟、靈敏度高、適合現場對大量樣品進行快速篩檢等優點，常見的主要有酶聯免疫分析法、放射免疫分析法、熒光免疫分析、免疫親和色譜等。其中ELISA由于特異性強、操作簡便等特點成最常使用的方法之一[1]。Pimpitak等[2]介紹了免疫法間接測定呋喃它酮代謝物，但這種方法操作復雜、耗時較長，衍生化不完全易造成回收率偏低。2012年，Yan等[3]首次建立了免疫法直接測定呋喃它酮代謝物殘留量。譚慧等[4]建立了水產品中氯霉素殘留量的間接酶聯免疫測定方法，該方法的檢測限可達0.01 μg·kg-1。王瑋[5]將免疫膠體金標記技術運用到氯霉素藥物殘留檢測中，制定了相關的檢測方法，試驗表明在對水產品樣品的實際檢測中有較好的可靠性和推廣性。多種磺胺藥物的ELISA檢測方法已經建立，并已初步應用于動物樣品藥物殘留的檢測工作中，對磺胺類藥物的檢測表現了較高的靈敏度[6]。黃志勇等[7]發明了一種水產品中孔雀石綠分子印跡膜仿生ELISA的快速檢測法，該方法將MG-MIPs作為仿生抗體，建立直接競爭的ELISA快速檢測法。總之，ELISA方法已廣泛應用于食品安全檢測中。

大亞灣地區作為廣東省惠州市的重要海灣，水產資源極其豐富，具有大規模的貝類養殖場和發展成熟的魚類網箱養殖區，并設有大亞灣水產資源保護區。鑒于大亞灣水產養殖的發展現狀和水產資源特征，了解該地區水產品的安全性和藥物殘留現狀具有重要意義。為了調查大亞灣水產品違禁漁藥殘留情況，對該地區7個水產品品類中磺胺類、呋喃唑酮、氯霉素和孔雀石綠4種藥物的殘留情況進行了酶聯免疫分析法（ELISA）快速檢測，了解這4種藥物的殘留現狀，為大亞灣區水產品安全規范檢測提供基礎數據，為水產養殖管理、水產漁藥使用規范提供科學的參考依據，讓居民可以篩選出健康的水產食品。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

從大亞灣地區自漁民手中購買7種常見的海水經濟種類作為檢測對象，分別為刀額新對蝦（海捕）、黑鯛（海捕）、紅斑（工廠化養殖）、青紅斑（工廠化養殖）、云龍斑（網箱養殖）、虎龍斑（網箱養殖）和黑鯛（網箱養殖）。取這些水產品的肌肉組織，用絞肉機將其絞成肉糜，取定量進行樣本提取和復溶，所得溶液備用檢測。呋喃唑酮、氯霉素、孔雀石綠和磺胺類藥殘檢測試劑盒采購自深圳市易瑞生物技術股份有限公司，樣品處理及檢測按照各試劑盒說明書進行。

1.2 數據處理與分析

以lgC為橫坐標、ln為縱坐標，構建線性回歸方程。其中，C為標準品濃度;B為標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值;B0為0 μg·L-1標準溶液的平均吸光度值。

將樣品的平均吸光度值代入上述回歸方程，求得的值乘以樣本稀釋倍數（呋喃唑酮倍數為2，氯霉素倍數為1，孔雀石綠倍數為10，磺胺類倍數為2），即為樣本中藥物殘留含量。

2 結果與分析

2.1 4種藥物的標準曲線

呋喃唑酮標準曲線由5個標準樣品測得數據繪制而成，回歸方程為Y=-2.393 1X-2.023 0，R2=0.971 7（圖1）。氯霉素標準曲線由4個標準品測得數據繪制而成，回歸方程為Y=-2.946 6X+6.2381，R2=0.994 4（圖2）。孔雀石綠標準曲線5個標準品測得數據繪制而成，回歸方程為Y=-2.889 7X+6.421 8，R2=0.976 1（圖3）。磺胺類標準曲線由5個標準品測得數據繪制而成，回歸方程為Y=-2.025 6X+1.043 4，R2=0.997 1（圖4）。

2.2 樣品檢測結果

如表1所示，7個品類的4種藥物殘留項目中，只有網箱養殖的虎龍斑和黑鯛存在氯霉素殘留（高于檢測限濃度0.025 μg·L-1），呋喃唑酮、孔雀石綠、磺胺類均低于檢測限含量（檢測限濃度分別為0.04 μg·L-1、0.375 μg·L-1、2 μg·L-1）。

3 討論

盡管大亞灣養殖業已經發展多年，但對于該地區水產品中藥物殘留的相關調查鮮有報道。目前少數的調查結果表明該地區有部分水產品出現了藥物殘留超標情況。例如何秀婷等[8-9]人在對大亞灣或陽江地區的養殖區進行調查時，發現幾個養殖區域均出現養殖水體中磺胺類藥物和喹諾酮類藥物含量過高的情況。這一情況說明大亞灣地區的魚類養殖中存在使用禁用抗生素類藥物的情況。本次調查結果顯示網箱養殖的虎龍斑和黑鯛中氯霉素殘留量過高，更說明了部分抗生素類藥物的使用已經影響了水產品的安全性。同時海捕品種及工廠化養殖品種中均未檢測到4種藥物殘留，說明工廠化養殖由于管理到位所生產的產品安全性要高于網箱養殖。

參考文獻：

[1] 胡昌勤.酶聯免疫吸附法新進展[J].生物化學與生物物理進展，1993，20（2）：85-88.

[2] Pimpitak U， Putong S， Komolpis K， et al. Development of a monoclonal antibody-based enzyme-linked immunosorbent assay for detection of the furaltadone metabolite， AMOZ， in fortified shrimp samples[J].Food Chemistry，2009，116（3）：785-791.

[3] Yan XD， Hu XZ， Zhang HC， et al. Direct determination of furaltadone metabolite，3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone，in meats by a simple immunoassay[J].Food and Agricultural Immunology，2011，23（3）：1-13.

[4] 譚慧，麥琦.酶聯免疫分析法測定水產品中氯霉素殘留量[J].中國衛生檢驗雜志，2010，20（7）：1649-1650.

[5] 王瑋.氯霉素殘留快速檢測膠體金試紙條的研究[D].天津：天津科技大學，2008.

[6] 鄭志高，江紅星，呂芳，等.磺胺類藥物的多殘留酶聯免疫法檢測[J].檢驗檢疫學刊，2006，16（1）：19-22.

[7] 黃志勇，林鄭忠，李璐，等.一種水產品孔雀石綠分子印跡膜仿生ELISA的快速檢測方法：中國，CN105242

038A[P].2016-01-13.

[8] 何秀婷，王奇，聶湘平，等.廣東典型海水養殖區沉積物及魚體中磺胺類藥物的殘留及其對人體的健康風險評價[J].環境科學，2014，35（7）：2728-2735.

[9] 何秀婷.廣東沿海典型養殖區喹諾酮類藥物的監測分析及其生物標記物研究[D].廣州：暨南大學，2009.

（責任編輯：劉昀）

收稿日期：2019-07-17

基金項目：2018年廣東省促進經濟發展專項資金“現代漁業發展用途”（SDYY-2018-04）;廣東省海洋和漁業發展專項資金（2017A0002）;2017年海洋和漁業發展專項資金。

作者簡介：林佩玲（1972—），女，廣東惠州人，大專，研究方向為海洋生物健康養殖。E-mail： 991493893@qq.com。