505例女性體檢人群人乳頭狀瘤病毒感染情況及基因亞型分布

高超， 趙丹青， 孫磊， 朱科靜， 許永劼， 朱金鳳， 金玉姬， 潘衛,5,6**

(1.貴州醫科大學 檢驗學院， 貴州 貴陽 550004； 2.貴州醫科大學附院 婦產科， 貴州 貴陽 550004； 3.長春千麥醫學檢驗實驗室有限公司， 吉林 長春 130031； 4.吉林醫藥學院 基礎醫學院， 吉林 延吉 132013； 5.貴州醫科大學附院 產前診斷中心， 貴州 貴陽 550004； 6.貴州醫科大學 環境污染與疾病監控教育部重點實驗室， 貴州 貴陽 550004)

人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)感染是宮頸癌發病的一個根本原因[1-3]。目前，已發現的HPV有130多種亞型，其中能夠引起宮頸癌和高度宮頸上皮內瘤變的稱為高危型HPV[4-6]。研究表明，不同地區、不同人群感染的HPV亞型也有所不同。本研究針對長春地區505名女性體檢人群，取其宮頸脫落細胞，采用Luminex 200流式熒光技術進行HPV基因檢測，分析該地區HPV感染情況、基因亞型分布特征及患者年齡分布特點，為該地區女性宮頸癌的早期預防、發現和控制提供參考。

1 資料與方法

1.1 對象、儀器及試劑

1.1.1研究對象 選取2018年3月長春地區505例的門診體檢女性，年齡20～70歲。納入標準：無宮頸癌、無宮頸手術史、無盆腔放射治療史、無激素使用史、有性生活史，排除妊娠、之前確認患有宮頸癌前病變及患有宮頸癌經過治療的女性。

1.1.2儀器與試劑 Luminex 200 多功能流式點陣儀、Eppendorf Mastercylcer Gradient 基因擴增儀、低溫高速離心機以及超凈工作臺，上海透景公司的核酸提取盒、HPV核酸擴增分型檢測試劑盒。

1.2 方法

收集宮頸刮取物中宮頸脫落細胞，-20 ℃保存；將保存液里的標本充分混勻，取1 mL置于離心管中，12 000 r/min離心5 min，去掉上清，生理鹽水清洗后用核酸提取盒提取核酸，使用HPV核酸擴增分型檢測試劑盒進行反應，再經Luminex 200流式熒光儀檢測后進行基因分型。本實驗共鑒定27種HPV的基因型，包括高危型17種(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、26、53和82型) ，低危型10種(6、11、40、42、43、44、55、61、81和83型) 。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 HPV感染情況

共檢出21種HPV基因亞型，其中高危型15種(HPV-16、52、18、58、39、33、66、68、35、56、53、31、45、51、26型)、低危型6種(HPV-6、40、42、43、44、81型)。505例體檢女性中HPV感染69例，感染率為13.7%，其中單一感染及多重感染分別占HPV感染者的79.7%(55/69)及20.3%(14/69)。HPV單一感染者中以高危亞型為主，占81.8%(45/55)，而最常見的2種高危型HPV分別是HPV-16、52型，感染率分別為2.2%(11/505)、1.0%(5/505)。此外，HPV單一感染者中低危亞型占18.2%(10/55)，低危亞型感染者中81型的感染率也較高，為 0.6%(3/505)。在14例 HPV多重感染者中，雙重感染占92.9%(13/14)，四重感染占7.1%(1/14)。在多重感染者中最常見的高危型HPV類型分別為HPV-53和16型，感染率分別為 0.8%(4/505)、0.6%(3/505)，低危型HPV中HPV-44感染率較高，為0.6%(3/505)，各型HPV感染率之間差異有統計學意義(χ2=59.9，P<0.01)。見表1。

表1 69例體檢女性HPV感染類型分布Tab.1 Distribution of HPV infection types in 69 female undergoing physical examination

2.2 不同年齡女性HPV感染情況

505例研究對象中67例沒有年齡信息，其余438例體檢女性年齡20～70歲,平均(42.95±9.27)歲，<20歲、20～<30歲、30～<40歲、40～<50歲及≥50歲年齡組HPV感染率分別為0、20.0%、13.1%、12.6%及16.6%，除<20歲組外，其余各年齡組之間HPV感染率比較差異無統計學意義(χ2=2.11，P>0.05)，見表2。各年齡段均以高危型感染為主，其中20～<30歲年齡組的高危型感染率和多重感染率均最高，分別為12.5%和5.0%；其余各年齡段人群中，高危感染率最高的是40～<50歲年齡組(10.4%)，多重感染率最高的為≥50歲年齡組(4.6%)，見表3。

表2 不同年齡段體檢女性HPV感染率Tab.2 HPV infection rates of women in different age groups

表3 不同年齡段體檢女性HPV感染亞型檢出情況Tab.3 Detection of HPV infection subtypes in women of different ages

2.3 不同年齡組女性HPV-16、18和52亞型檢出情況

分析感染率較高的HPV-16、52亞型及與癌癥關聯最密切的HPV-18亞型的年齡分布特征，3型中各有1例共3例年齡信息缺失，20～<30歲、40～<50歲年齡組以HPV-16基因型感染為主，感染率分別為5.0%和3.3%，20～<30歲和≥50年齡組HPV-16及52基因型感染率無明顯差異。見表4。

表4 不同年齡組女性HPV-16、18和52基因型的檢出情況Tab.4 The detection of HPV genotypes 16, 18 and 52 in women of different age groups

3 討論

HPV屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬，是球形DNA病毒，能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖[7-8]。隨著女性宮頸癌發病率的增高，其病因HPV感染也漸漸引起人們的注意。由于每個地區生活環境及人們生活習慣的不同，導致HPV 基因亞型在不同人群中分布也有較大差異[9-10]。有研究表明，宮頸病變程度與HPV亞型息息相關[11-12]。據調查統計，全球女性中最常見的HPV感染亞型前3名分別是16、18及31型，而在中國女性中最常見的HPV感染亞型前3名分別為 HPV-16、52及18型[13]。本研究對長春地區某一批次505例體檢女性的宮頸脫落細胞進行HPV基因分型檢測，感染率最高的前2名HPV亞型為HPV-16及52型，與岑堯等[14]前期統計得出的數據基本一致。

有研究顯示，HPV感染率在各年齡階段差異沒有統計學意義[15]，也有調查顯示，年齡≥61歲組HPV感染率最高(33.7%)，其次為≤20歲組(33%)，最低的是31～40歲組(16.4%)[16]。而在本研究中，HPV感染率最高的是20～<30歲組(20.0%)，最低的是<20歲組(0.0%)，但HPV感染率在20～<30歲、30～<40歲、40～<50歲、≥50歲年齡組中差異沒有統計學意義(P>0.05)，各年齡組均以高危型HPV感染為主。提示，在不同年齡階段，都存在一定的HPV感染概率，因此每個年齡階段的女性進行HPV基因型的檢測和HPV感染的預防都是很有必要的。

當前已有3種HPV疫苗面世，分別是二價疫苗、四價疫苗和九價疫苗。二價疫苗針對HPV-16和18型，四價針對HPV-6、11、16和18型，九價針對HPV-6、11、16、18、31、33、45、52和58型。本研究結果顯示，此次HPV單一感染者中最常見為HPV-16和52型，多重感染者中HPV-53型也較常見，并不能被二價和四價疫苗所涵蓋，建議將HPV-52、53納入到HPV疫苗篩選評估中。在本研究中，多重HPV感染者占總感染者的20.3%，與新疆(15.5%)、云南(18.0%)相比較高，與山西(24.3%)、北京(27.7%)等相比較低，存在地區差異[17-18]。

綜上所述，隨著宮頸癌發病率的逐年升高，有必要持續推進并全面加強HPV感染的預防與檢測，深入調查HPV在長春地區普通體檢人群中的感染及流行變化趨勢，是很有意義的。本研究提示，長春地區不同年齡段女性均存在一定的HPV感染概率，因此需要相關部門加強該地區HPV篩查工作，制定有效的預防控制措施，降低HPV感染風險，進而降低宮頸癌的發病率。