炎性肌病相關肺間質病變及血清學生物標志物的特征分析

李澤建

炎性肌?。↖M）是臨床發(fā)病率較高的免疫性疾病，其分為皮肌炎和多發(fā)性肌炎等，ILD是IM患者的常見并發(fā)癥，其診斷方式為肺功能檢測或CT檢查[1～2]。臨床認為血清標志物能夠反映IM并發(fā)ILD發(fā)生或進展過程，進而指導臨床治療工作[3]。研究中以入本院治療的86例IM并發(fā)或未并發(fā)ILD患者為研究主體，旨在探究其血清學生物標志物的特征。

1 資料與方法

1.1 一 般 資 料 以2015 年10 月-2018 年10 月間進入本院治療的43 例IM并發(fā)ILD患者為A組研究 主 體。其 中，男24 例，女19 例；年 齡32～69 歲，平均年齡（47.51±2.11）歲；病程2～10 個月，平均（7.12±0.54）個月。以同期進入本院治療的43例IM未并發(fā)ILD患者為B組研究主體。其中，男23例，女20 例；年齡33～68 歲，平均年齡（47.11±2.08）歲；病 程3～12 個 月，平 均（7.01±0.58）個月。兩組患者一般資料差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 納入及排除標準 ①納入標準：被確診為IM患者；年齡＜70 歲；出于自愿原則簽署知情同意書。②排除標準：伴有精神或意識障礙；伴有心腎肺等重大臟器疾??；參與其他研究。

1.3 方法

1.3.1 KL-6 的檢測方法 ①加樣：設置空白孔、待測樣品孔與標準孔，將100 μL的樣品和標準品稀釋液置入空白孔中，其余兩孔內放置100 μL的待測樣品或是標準品，禁止出現(xiàn)氣泡。確保樣品加在酶標本的底部，禁止接觸孔壁。搖晃均勻后于酶標板表面覆一層膜，設置溫度為37 ℃，孵育時間為90 min，確保每次實驗的標準品溶液均為最新配制。②將孔內的液體去除并甩干，無需洗滌，將100 μL的生物素化抗體液置入各個孔中，酶標板表面覆一層膜，置于37℃環(huán)境中孵育60 min。③將孔內液體再次去除并甩干，進行3 次洗板操作，每次約浸泡2 min，將孔內液體完全拍干。④于各孔中加入100 μL的酶結合物工作液，覆蓋一層面后，于37 ℃環(huán)境中孵育30 min。⑤重復第3 個步驟。⑥將各孔中加入100 μL的發(fā)光底物工作液，覆膜后于37 ℃環(huán)境中避光孵育5 min。⑦利用發(fā)光免疫分析儀記錄各孔的發(fā)光值，并計算濃度。

1.3.2 SP-A（肺表面活性蛋白A）、SP-D（肺表面活性蛋白D）與YKL-40（甲殼質酶蛋白40）的檢測方法 提前20 min將試劑盒取出并常溫保存，于包含SP-A或SP-D等抗體孔中加入50 μL的標準抗原，并留置空白對照組。將100 μL的過氧化氫酶加入至抗體孔中，于37 ℃環(huán)境中孵育60 min。利用自動洗板機進行5 個循環(huán)的洗板操作，各循環(huán)均將350 μL的洗滌液加入其中，1 min后結束洗板并拍干。加入50 μL的A液與B液，于37 ℃環(huán)境中孵育15 min。加入50 μL的終止液，15 min后用酶標儀進行吸光度測定，波長的參考值為620 nm。

1.3.3 FSTL-1（卵泡抑素樣蛋白-1）和MMP-7（基質金屬蛋白酶-7）的檢測方法 于包含F(xiàn)STL-1 或MMP-7 等抗體孔中加入50 μL的標準抗原，并留置空白對照組，孵育120 min。利用自動洗板機進行5 個循環(huán)的洗板操作，各循環(huán)均將200 μL的洗滌液加入其中，1 min后結束洗板并拍干。加入100 μL的一抗工作液，重復以上洗板操作后加入100 μL的二抗工作液，再重復以上洗板操作。而后依據(jù)SP-A等檢測方法完成測定。

1.4 觀察指標 記錄患者的TLC（肺總量）、DLCO（肺彌散功能）和FVC（用力肺活量）等肺功能指標；觀察患者的KL-6、SP-A、SP-D、YKL-40、FSTL-1 和MMP-7 等生物標志物值。

1.5 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)通過SPSS 16.0 統(tǒng)計學軟件加以處理，計量資料使用（）表示，行t檢驗，P＜0.05 表明差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者肺功能指標比較 A組患者的肺功能指標均低于B組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組患者血清生物標志物值的比較 A組患者的KL-6 水平高于B組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；其他血清學生物標志物數(shù)值與B組患者對比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表1 兩組患者肺功能指標比較（，%）

表1 兩組患者肺功能指標比較（，%）

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表2 兩組患者血清生物標志物值的比較

表2 兩組患者血清生物標志物值的比較

組別 n KL-6(U/mL) SP-A(pg/mL) SP-D(ng/mL) YKL-40(ng/mL) FSTL-1(ng/mL) MMP-7(ng/mL)A 組 43 2.94±0.25 138.05±40.22 58.16±15.25 68.42±20.14 9.06±4.21 29.34±10.25 B 組 43 2.50±0.21 139.15±40.62 58.66±14.12 76.18±20.15 10.25±4.37 30.84±10.47 t 8.837 0.126 0.158 1.786 1.286 0.671 P 0.000 0.900 0.875 0.078 0.202 0.504

3 討 論

血清標志物能夠有效診斷IM合并ILD，且KL-6 的診斷價值最高，其可作為臨床診斷的常見評估指標[4]。本研究A組患者的肺功能指標均低于B組，KL-6 水平高于B組（P＜0.05）；其他血清學生物標志物數(shù)值與B組對比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。雖然兩組患者的SP-A與SP-D等指標不存在差異，但并發(fā)肺間質病變組的數(shù)值低于未病變組，表明生物標志物能夠反映該合并癥的發(fā)病機制，可作為其預后評估指標之一。

總之，血清學生物標志物能夠有效評估IM合并ILD患者的病情程度，可推廣使用。