血細胞分析儀形態學分析技術與鏡檢篩選分析

袁甜，張海燕

泗陽縣人民醫院檢驗科，江蘇宿遷 223700

血細胞主要包括白細胞、紅細胞和血小板三大類型。血細胞的形態學表現、分類計數情況在血液疾病（如貧血）的臨床診斷中具有重要參考價值[1]。但傳統手工鏡檢的工作量大、耗時長、視野有限，容易出現漏檢情況，可行性受到限制。血細胞形態分析技術是應用血細胞分析儀，在全自動機械操作狀態下完成對血細胞分類、計數、形態學信息采集等工作，具有分層掃描、視野分辨率高、方便快捷等優勢，在臨床血細胞檢驗中具有重要應用價值[2-3]。為了比較分析血細胞分析儀形態分析法、傳統鏡檢篩選法在血液系統病變篩查中的應用效果，該研究回顧性分析了該院檢驗科2017年10月—2018年10月間接收的76例受試者的血液樣本的血細胞檢驗結果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集該院檢驗科接收的76例受試者所提供血液樣本。納入標準為：①所選患者由健康體檢者、外科手術患者、普通病房住院患者提供；②受試者均在空腹狀態下按照肘靜脈采血法收集血樣，分為兩份，分別進行血細胞儀形態學分析和顯微鏡檢驗；③患者及家屬對該研究的目的、方法和相關信息詳細了解，自愿參與，簽訂研究同意協議；④研究經醫院倫理委員會批準。排除標準：①排除合并嚴重軀體疾病如惡性腫瘤、臟器功能衰竭、呼吸衰竭、急性心肌梗死和急性腦梗死的患者；②排除合并精神疾病的患者；③排除合并血液功能障礙如血友病的情況；④排除合并傳染疾病如艾滋病患者的血樣。該組76例中有男性50例、女性 26 例，年齡 20～58 歲，平均（39.2±4.4）歲，健康體檢者40名、外科手術患者21例、普通病房住院患者15例。

1.2 方法

所選受試對象均空腹8 h以上，于次日清晨7:00-9:00上午采用肘靜脈采血法采集靜脈血約2 mL，分裝于兩個試管中，在兩份血樣中加入EDTA-K2抗凝劑1.5 mg充分混勻后靜置，在室溫條件下保存，一份樣本制成血涂片、應用瑞特-姬母薩染色法混合染色后在50倍鏡油鏡下對有核細胞進行計數，同時觀察中性粒細胞、紅細胞、白細胞、淋巴細胞形態結構；另一份制成血涂片樣后應用邁瑞CAL8 000全自動血細胞流水線檢測系統及配套試劑進行檢驗，將外周血涂片安裝在系統，啟動程序后血涂片被自動推放至載物臺，開始對血涂片進行掃描，首先利用10倍物鏡掃描單層細胞，然后進行多層次掃描，記錄不同層次白細胞、紅細胞和血小板的形態學特點、所處空間位置。最后自動滴油在100倍油鏡下對血細胞高清攝像，利用DM全自動數字化細胞形態分析系統采集血細胞的顏色、幾何、紋理、分形、小波、血細胞分類、占比等信息，從而對白細胞、血細胞和血小板細胞3種血細胞進行細胞識別、分類、計數和形態學分析，兩份血液樣本的形態學分析和檢驗均由細胞形態學工作人員完成。

1.3 血細胞異常樣本的陽性篩選標準

（1）顯微鏡檢，出現下述情況之一為陽性：①晚幼粒（晚幼紅）：胞體直徑 10～16 μm，細胞核變粗、胞質增多呈紅色、充滿中性顆粒：②中性粒細胞中性毒變：中性粒細胞大小不均、核固縮、空泡變性、顆粒增粗；③異型淋巴細胞（異淋）；④紅細胞形態異常：紅細胞大小不一、呈現球形、橢圓形、靶形等不規則形狀，中央蒼白區擴大。

（2）血細胞分析儀，對血細胞圖像進行形態學分析，并對紅細胞、白細胞、血小板、免疫細胞進行計數，若符合下述情況之一為陽性：①HGB＜100 g/L，出現貧血或溶血情況；②單核細胞＞10%；③淋巴細胞＞40%；④中性粒細胞中毒顆粒＞50%或空泡性細胞＞10%；⑤出現晚幼粒、中性粒細胞中性毒變或核左移、異淋或紅細胞形態異常征。

1.4 統計方法

利用SPSS 22.0統計學軟件對研究資料進行比較分析，計數資料用率（%）形式表示，兩組配對比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

表1 邁瑞CAL8 000全自動血細胞流水線檢測系統形態學分析技術和顯微鏡檢驗技術對76例體檢者血液樣本中血細胞異常樣本的篩選結果比較[n(%)]

2 結果

應用兩種檢驗方法對76例血樣進行檢驗分析，結果顯示，血細胞分析儀形態血分析技術檢出血細胞異常樣本共計27例，檢出率為35.5%；傳統顯微鏡檢出血細胞異常樣本共計32例，檢出率為42.1%，兩組對于異常血細胞的檢驗結果比較差異無統計學意義（P＞0.05），見表 1。

3 討論

血細胞的形態學特征、分類計數情況對各類血液疾病的臨床診斷具有重要參考價值，顯微鏡形態學檢查可對血細胞的分類、比例、結構變化做出符合事實的準確判斷，可作為血細胞異常的血液疾病臨床篩查的金標準[4]。但人工鏡檢的操作復雜、耗時較長、儀器分辨率有限[5]。

近年來，血細胞形態學分析技術逐步完善，該技術是借助全自動血細胞分析儀和數字基于SVM和ANN的BCM細胞識別技術，對血細胞進行多層次、高分辨率的掃描，并將血細胞的分類、計數、形態學特征以直方圖、曲線等形式反映出來，具有較高的科學性、可靠性，且檢驗迅速[6]。然而，血細胞分析儀是一種復雜性儀器，不同儀器間的檢驗結果會具有較大的差異性，增加了鏡檢篩選結果的不確定性[7]；此外，血細胞分析儀僅能依靠血細胞測定的相關參數進行數據分析，缺少真實的人工形態學分析，不僅容易漏檢，還容易出現假陽性情況，特別難以發現紅細胞形態、中性粒毒性變性、空泡變性等形態學特征。這些都使得血細胞形態學分析技術在異常血細胞的臨床檢驗中的應用受到限制[8]。近年來，大量研究為血細胞形態分析技術提供了較為完備的規定條件，統一并規范了儀器操作步驟、操作參數，使血細胞形態學分析技術的準確率提高10%～20%，使其成為了一種高效、準確、可行性較高的血細胞分析方法[9]。

最后，該研究的結果顯示，76份血液樣本的血細胞分析結果顯示，血細胞分析儀形態血分析技術對于血細胞異常血樣的檢出率為35.5%，傳統鏡檢的檢出率為42.1%，兩組對于異常血細胞的檢驗結果比較，差異無統計學意義（P＞0.05），這也與戴澤寧等[10]關于用規定的條件進行血細胞形態分析既能確保不漏檢陽性結果,又能糾正儀器的假陽性指示,使鏡檢率提高到35.6%的研究較為一致。

綜上所述，利用血細胞分析儀形態學分析技術，能夠較為準確地發現血細胞的異常情況和病因，方便快捷、分辨率高，值得在血液疾病的篩查檢驗中加以推廣應用。