淡紫色擬青霉對紅棕象甲成蟲室內毒力初步研究

鐘寶珠，呂朝軍，覃偉權，李朝緒，閻偉

（中國熱帶農業科學院椰子研究所，海南文昌 571339）

紅棕象甲（Rhynchophorus ferrugineus Oliver）是棕櫚植物上的危險性檢疫害蟲[1～2]，該蟲以幼蟲鉆蛀危害植物莖干，早期不易表現危害癥狀，因此當發現其危害時樹干已嚴重受害[3～4]。目前中國對于該蟲防治主要以聚集信息素誘集成蟲為主，在化學防治方面主要針對幼蟲采用莖干注射殺蟲劑，在生物防治方面的研究還相對較少。

淡紫色擬青霉 (Paecilomyces lilacinus(Thorn.)Samson)屬于內寄生性真菌，是一些植物寄生線蟲的重要天敵，能夠寄生于卵、幼蟲和雌蟲，可顯著減輕作物線蟲危害[5～6]。目前有研究表明，淡紫色擬青霉對害蟲也具有一定的毒力效果[7～10]，該文以紅棕象甲成蟲為供試對象，研究了淡紫色擬青霉對該蟲成蟲的毒力效果，以期為紅棕象甲生物防治技術的制定和淡紫色擬青霉的利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

供試紅棕象甲為野外誘集，并在中國熱帶農業科學院椰子研究所植物保護研究室飼養不少于10代，取體型大小一致的新羽化健康成蟲供試。飼以甘蔗，并以20%蜂蜜水作為補充營養。

1.2 研究方法

1.2.1 淡紫色擬青霉侵染紅棕象甲成蟲的形態學觀察

將淡紫色擬青霉孢子液用無菌水稀釋至1.0×108個孢子/mL，用微量噴霧器噴施于蟲體，后將試蟲放置養蟲盒（18cm×10cm×8cm）內繼續飼喂，5d后觀察處理后的試蟲并拍照。

1.2.2 淡紫色擬青霉對紅棕象甲成蟲的毒力

致死效果的濃度效應：將淡紫色擬青霉孢子液用無菌水稀釋至系列濃度（1.0×108、1.0×107、1.0×106、1.0×105、1.0×104個孢子 /mL），以噴霧法將孢子液噴霧至蟲體，之后將試蟲轉移至飼養盒中。96h后統計各處理死亡蟲數，并計算校正死亡率。每個濃度處理紅棕象甲成蟲20頭，重復3次，以無菌水處理為對照。以試蟲無法爬行，且用昆蟲針觸動蟲體無自主反應為試蟲死亡標準。

致死效果的時間效應：采用噴霧法以1.0×108個孢子/mL濃度的淡紫色擬青霉孢子液處理紅棕象甲成蟲，處理后48h、72h、96h、120h和144h分別統計死亡蟲數。各處理蟲數及死亡標準同上。

1.2.3 數據處理方法

采用黃劍的方法[11]，使用Excel統計軟件分析毒力回歸方程及LC50/LT50、LC50/LT50的95%置信區間等。

2 結果與分析

2.1 感染淡紫色擬青霉后紅棕象甲成蟲的形態學特征

紅棕象甲受淡紫色擬青霉侵染后，蟲體形態學表現如圖1所示。結果表明，淡紫色擬青霉侵染蟲體后，會從蟲體表面萌發出孢子，且以蟲體各體節結合處的孢子量相對較多，主要表現在紅棕象甲喙和頭部連接處、前胸背板和中胸背板連接處、腹部各節連接縫隙、足基部等位置大量萌發出淡紫色擬青霉孢子，而在鞘翅、腹節及背板表面無侵染癥狀。此結果說明淡紫色擬青霉在侵染紅棕象甲成蟲時，主要通過體節連接處的縫隙和薄弱部位侵入蟲體，造成蟲體死亡，但無法對蟲體鞘翅和堅硬的體殼造成傷害。

圖1 淡紫色擬青霉侵染紅棕象甲成蟲的形態學特征Fig.1 Morphological characters of R.ferrugineus adults after treated with P.lilacinus

2.2 淡紫色擬青霉對紅棕象甲成蟲的毒力

不同濃度淡紫色擬青霉處理紅棕象甲96h后校正死亡率如圖2。結果表明隨著處理濃度的增加，紅棕象甲死亡率呈現升高的趨勢，即表現出正相關；同時以1.0×108個孢子/mL的淡紫色擬青霉處理紅棕象甲后，試蟲的死亡率也隨處理時間的延長而增加，從處理后的48h至144h，紅棕象甲的死亡率從13%升高至約50%。

圖2 淡紫色擬青霉對紅棕象甲成蟲毒力的濃度相關性Fig.2 Concentration relationship of P.lilacinus toxicity to R.ferrugineus adults

圖3 淡紫色擬青霉對紅棕象甲成蟲毒力的時間相關性Fig.3 Time relationship of P.lilacinus toxicity to R.ferrugineus adults

2.3 淡紫色擬青霉對紅棕象甲的毒力

淡紫色擬青霉對紅棕象甲的毒力分析結果如表1。結果表明，經不同濃度處理后，淡紫色擬青霉對紅棕象甲的致死中濃度（LC50）為6.15×108孢子/mL，理論上在此濃度下可造成紅棕象甲成蟲50%種群的死亡；而經1.0×108個孢子/mL濃度的淡紫色擬青霉孢子液處理后，紅棕象甲的致死中時間（LT50）為140h。

表1 淡紫色擬青霉對紅棕象甲成蟲的毒力水平Tab.1 Toxicity level of P.lilacinus to R.ferrugineus adults

3 討論

昆蟲病原菌微生物對紅棕象甲的作用研究國內外已有一些報道，且多集中在室內研究方面，致病微生物包括昆蟲病原線蟲、白僵菌、綠僵菌、昆蟲病原細菌、昆蟲病毒等不同種類。如Abbas等研究[12]表明，昆蟲病原線蟲Heterorhabditissp.和Steinernemasp.最高可導致紅棕象甲成蟲87%的個體死亡。Dembilio等[13]將斯式線蟲制成S.carpocapsae殼聚糖制劑防治紅棕象甲，其防效相當于內吸殺蟲劑吡蟲啉的效果。Ghazavi[14]從紅棕象甲死亡的蟲體上分離出綠僵菌和白僵菌，發現此兩種病原菌均可成功侵染紅棕象甲的蛹和成蟲。Dangar[15]從感染的紅棕象甲蟲體內分離出病原體假單胞桿菌Pseudomonas aeruginosa，致病力測定結果表明，在接種量達到每蟲8×106個酵母時能導致試蟲大量死亡。Alfazairy[16]從死亡的紅棕象甲蟲體上分離出蘇云金桿菌亞種kurstaki（Btk）和多角體病毒，經制作成懸浮液劑型后，在室內測定試驗發現其對紅棕象甲幼蟲的致死率分別達70%和61%。

該研究結果表明，昆蟲病原真菌中的淡紫色擬青霉在紅棕象甲成蟲的防控方面具有一定的潛力，其對紅棕象甲的致死效果與處理時間和濃度均呈現正相關趨勢，LC50和1.0×108個孢子/mL濃度下的LT50分別為6.15×108孢子/mL和140h，該結果為紅棕象甲的生物防治資源的收集和利用提供了參考。該研究僅限于室內研究，而淡紫色擬青霉對紅棕象甲的作用機理、田間應用效果、相關劑型的制作和應用技術等均有待進一步研究。