振腹環揉法對失眠大鼠血清腦腸肽影響的研究

吳彥嬌 于水柔 唐嬋 鄭丹 賈宏梅 張紅石

摘要：本項目是對失眠大鼠進行腹部推拿，通過檢測失眠大鼠血清腦腸肽中的p物質和β內啡肽來研究振腹推拿的方法對失眠大鼠的影響，從而進一步對失眠進行研究，本項目旨在運用推拿手法幫助解決現在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題，減少藥物對身體的損害，提高護理的保健意識和社會保健意識[1]。

關鍵詞：振腹環揉法;失眠大鼠;研究

中圖分類號：G642.0? ? ?文獻標志碼：A? ? ?文章編號：1674-9324（2019）44-0067-02

失眠是一種十分普遍的疾病，在睡眠障礙中受到主要的關注，失眠患者的主要表現有入睡困難、睡眠質量下降和睡眠時間減少等表現[2]。不僅如此，長期失眠還可以造成記憶功能下降、注意功能下降、計劃功能下降，從而導致白天困倦，工作能力降低，在停止工作時容易出現日間嗜睡現象[3]。

一、實驗材料

1.實驗動物。本實驗動物由長春市億斯實驗動物技術有限責任公司（動物許可證號：SCXK（吉）-2016-0003，序號201900026508）提供，wistar大鼠30只，體重200—220g。實驗場所：長春中醫藥大學針灸經絡研究所。

2.飼養環境。室內溫度控制在20℃—22℃，相對濕度45%—65%，自然光，避免噪聲和其他干擾。將30只大鼠先適應性喂養7天，大鼠自由進食飼料和水，墊料保持干燥，7天后稱量體重。普通飼料按國家實驗動物飼養成分統一標準配置[4]。

二、實驗分組

大鼠正常喂養1周后，按體重隨機分組，分為模型組、藥物組、推拿組，每組大鼠按自然序號進行標記，采用熒光涂抹技術，在大鼠身上用黃色熒光筆進行標記[5]。

三、實驗藥物與設備

（一）實驗藥物

對苯丙氨酸（PCPA），美國Sigma公司，CAS NO.742400-2。人參歸脾丸，貴州同濟堂制藥有限公司，批號：國藥準字Z20010033[6]。配水為湯。戊巴比妥鈉，國藥集團化學試劑有限公司，批號：WS20130601。p物質試劑盒：南京建成生物工程研究所，p物質凍干粉，批號：KIT2019012。β內啡肽試劑盒：南京建成生物工程研究所，β內啡肽凍干粉，批號：KIT2019016。

（二）實驗儀器

上海精密科學儀器有限公司JY10001電子秤;賽多利斯科學儀器北京有限公司BSA124S-CW精密電子秤;酶標儀：伯騰酶標儀BIOTek-SMAT;恒溫水浴箱：精宏XWTD-8222。

四、實驗方法

（一）實驗動物的失眠造模

30只大鼠同時進行失眠造模，造模采用腹腔注射PCPA混懸液，連續注射2天，RCPA臨用前按大鼠100mg/kg用量，用弱堿性生理鹽水配置成混懸液備用，第一次腹腔注射36小時后，大鼠出現晝夜節律缺失[7]，白天與夜晚皆活動不斷，造模大鼠腹腔注射戊巴比妥30mg/Kg（預實驗測得引起100%大鼠睡眠的最小劑量）。提起大鼠尾巴[4]，將大鼠腹部朝上放在墊塊上記錄大鼠的睡眠潛伏期及睡眠持續時間，以翻正反射消失為發生睡眠。以翻正反射，提示造模成功。

（二）實驗方法

1.模型組：每天按照正常標準喂食、喂水。

2.藥物組：每天按照人∶大鼠=1∶30的比例，對藥物組大鼠灌胃按體重轉毫升數[8]。

3.推拿組：取穴及部位：中脘、神闕、中極，腹部。手法：摩法、振法。以爽身粉為推拿介質，以臍為中心順時針掌摩全腹5分鐘[9，10]，以調暢氣機;雙手指腹加團揉全腹10分鐘，以調臟通腑、平衡陰陽;單掌按振中脘穴2分鐘，單掌掌振神闕穴3分鐘，單掌閃振中極穴5分鐘，以健脾和胃，補益氣血;隨呼吸掌按腹部，以神闕穴為中心，吸氣時深按，吐氣時輕抬，時間5分鐘，以引氣歸元，寧心安神。

五、觀測指標

1.p物質。ELISA檢測法：腹腔靜脈取血5ml，分離血清，用鼠p物質ELISA檢測試劑盒檢測血清p物質的濃度，嚴格按照試劑盒要求進行操作。于波長450nm的酶儀上讀取各孔的OD值。

2.β內腓肽。ELISA檢測法：腹腔靜脈取血5ml，分離血清，采用β內啡肽ELISA試劑盒，嚴格按照試劑盒要求進行操作。于波長450nm的酶儀上讀取各孔的OD值。

六、數據統計

本實驗數據分析擬采用SPSS19.0統計軟件完成。ELISA數值計算，采用ELISAAcalc進行計算。數據采用成組T檢驗，進行兩兩對比分析。

七、結果（見下表）

八、討論

失眠是一種十分普遍的生理心理疾病，有報道稱全球約一半的成年人受到慢性失眠的影響。長期失眠不僅可以造成免疫力下降、內分泌紊亂、心功能下降等軀體機能的損傷，還會引起焦慮、注意力下降等心理功能的紊亂，本項目是通過振腹推拿的方法研究對失眠大鼠的影響，旨在運用推拿手法幫助解決現在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題，對于提高護理的保健意識和社會保健意識有積極的意義。提高失眠患者對于自身失眠狀態的認識和重視程度，加強自我保健意識，幫助解決現在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題。推拿手法屬于中醫特色，對身體沒有傷害，屬于保健類的治療方法，和藥物治療相比，安全性較高，無副作用。通過本研究探討推拿和失眠的關系及對失眠大鼠睡眠的改善情況，為臨床治療失眠提供了相關依據。腹部推拿可以提高失眠大鼠的p物質和β內啡肽水平，對腦組織及晝夜節律變化有較好的輔助作用。

參考文獻：

[1]張凱.延邊地區孕婦健康狀況、保健知識、保健行為的相關性研究[D].延邊大學，2014.

[2]王玥.慢性原發性失眠的臨床特點與血清免疫球蛋白的關系[D].上海：復旦大學，2010.

[3]黃再軍.火針配合寧心安神丸治療失眠的臨床觀察[J].大家健康（上旬版），2017，（9）.

[4]吳九如.歸脾安神顆粒對失眠模型大鼠PCD2表達的影響[J].吉林中醫藥，2016，（9）：929-933.

[5]鮑娟.替普瑞酮誘導阿爾茨海默病大鼠海馬熱休克蛋白70表達及抗凋亡機制[J].中國神經精神疾病雜志，2010，（11）：662-666.

[6]薛金.介入療法配合骨復活湯治療成人激素性早期股骨頭缺血壞死的臨床研究[D].石家莊：河北醫科大學，2010.

[7]李峰杰.酸棗仁、石菖蒲、夜交藤、百合、郁金5味中藥對對氯苯丙氨酸致失眠模型大鼠睡眠作用的影響[J].中國藥業，2017，（6）：1-4.

[8]梁廷營.阿魏酸鈉的鎮靜催眠作用機制研究[D].鄭州大學，2017.

[9]顧曉旭.推拿針刺治療小兒腹瀉文獻臨床效應的DME法分析[D].蘭州：甘肅中醫學院，2014.

[10]韓國偉.急性腦梗塞患者血漿中β-內啡肽水平檢測分析[J].河南科技大學學報（醫學版），2003，（4）：286.