原因不明復發性流產與sFlt-1的相關性及其臨床意義分析

劉煒 徐聆峰 譚宗建

(貴州省人民醫院生殖中心，貴州 貴陽 550002)

復發性流產(RSA)主要是指與女性與同一位性伴侶連續發生兩次或者是大于兩次的自然流產現象，且近年該疾病的發生率呈上升趨勢，發生率大概在1%～5%之間[1]。復發性流產的原因比較復雜，主要與環境因素、不良生活習慣、創傷刺激、全身性疾病、感染因素、生殖器官異常、免疫功能異常、內分泌異常、染色體異常等有關，但是臨床上仍然有50%的患者病因不夠明確，臨床上將其稱為原因不明復發性流產(URSA)[2]。原因不明復發性流產的發生與胎兒血液供應不足、胎盤組織中血管發生異常有很大的關系。妊娠早期血管重塑與形成有利于滋養細胞侵入胎盤與子宮內膜使其正常發育，最終有利于保證胚胎的順利發育。血管內皮生長因子(VEGF)與相關的受體相關受體(VEGFR)，在血管形成當中其主要作用的為可溶性VEGF受體-1(sFlt-1)，它還具有維持胎兒營養供應、蛻膜組織中血流量、血管密度的作用[3]。我院在原因不明復發性流產與sFlt-1的相關性及其臨床意義分析中，發現原因不明復發性流產與sFlt-1呈正相關，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年7月至2018年7月我院收治的原因不明復發性流產患者77例作為研究組，同時選取在我院進行體檢的正常早孕婦女77例作為對照組，納入標準：(1)已經發生原因不明復發性流產≥2次的患者；(2)妊娠孕周6～12周；(3)經過臨床尿人絨毛膜促性腺激素(hCG)、B超、體征、臨床病史確診為已經發生難免流產產婦；(4)健康早孕婦女也符合以下要求：①以往未出現過死產、死胎、自然流產歷史；②此次妊娠期間無任何異常，生命體征正常；③無病毒感染、服藥歷史；④通過B超檢查胚胎發育正常；⑤無婦科疾病。排除標準：(1)存在感染性疾病的產婦；(2)精神異常的產婦；(3)存在服藥歷史的產婦。對照組77例，年齡23～35歲，平均年齡(32.3±1.2)歲；孕周6～12周，平均孕周(9.2±1.2)周；研究組77例，年齡23～36歲，平均年齡(32.5±1.1)歲；孕周6～12周，平均孕周(9.1±1.3)周；產婦資料有可比性(P>0.05)，本研究得到了我院倫理委員會處批準。

1.2方法 血標本：所有孕婦均在入院后的第2天清晨采集空腹肘靜脈血2 mL，靜置1 h離心分取血清，將分取的血清放置到-70 ℃環境下保存[4]。血清中VEGF與sFlt-1水平檢測：將待檢的血清應用ELISA法進行定量檢測，ELISA試劑盒由美國安迪生物提供；人工流產后采集產婦絨毛組織，后沖凈并去除血細胞，將其放到甲醛溶液(4%)中進行固定(36 h)，再將其進行石蠟包埋切片后烤片脫蠟，免疫組織化學二步法對組織進行染色，對VEGF與sFlt-1表達情況進行觀察[5]。免疫組化判斷標準：VEGF陽性：組織為棕色或者是黃色；sFlt-1陽性：組織為棕黃色顆粒狀。由病理科人員應用高倍鏡視野進行閱片，并根據半定量積分法對免疫組織學進行評分。評分=a×b(a.陽性細胞百分比，b.陽性細胞染色強度)；a為1b=0，細胞染色不明顯，陰性；b=1，細胞染色呈淡黃色；b=2，細胞染色呈黃色；b=3，細胞染色呈棕黃色；陽性細胞<20%；a為2，陽性細胞為21%～60%；a為3，陽性細胞為61%～90%；a為4，陽性細胞≥90%。陽性判斷結果：陽性：組織學評分5～12分；陰性：組織學評分<5分[6]。

1.3觀察指標 比較兩組人群血清中VEGF與sFlt-1水平。比較兩組人群絨毛組織中VEGF與sFlt-1表達情況。分析原因不明復發性流產與sFlt-1的相關性[7]。

2 結 果

2.1兩組血清中VEGF與sFlt-1水平對比 研究組血清中VEGF與sFlt-1水平高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 血清中VEGF與sFlt-1水平對比

2.2兩組絨毛組織中VEGF與sFlt-1表達情況對比 研究組絨毛組織中VEGF與sFlt-1陽性表達率高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 絨毛組織中VEGF與sFlt-1表達情況對比[n(%)]

2.3原因不明復發性流產與sFlt-1的相關性分析 原因不明復發性流產與sFlt-1呈正相關(P<0.05)。見表3。

表3 原因不明復發性流產與sFlt-1的相關性分析

3 討 論

原因不明復發性流產是近年臨床上發生率較高的疾病，導致該疾病的發生原因有很多，但是還有很多原因仍不明確。近年來臨床上發現VEGF與sFlt-1與原因不明復發性流產存在一定的聯系。VEGF在胚胎發育、創傷愈合過程中發揮著非常重要的作用，它會對血管形成起到一定的調節作用，促進有絲分裂，同時會促進血管內皮細胞增長繁殖、分化分裂等[8]。本次研究發現，VEGF與sFlt-1水平越高越容易導致不明原因復發性流產的發生。VEGF屬于血管內皮細胞生長的重要因子，它在誘導血管形成、維持胎盤血流量的過程中發揮著重要的作用[9]。近年有學者研究[10]發現，胎盤絨毛基質巨噬細胞與合體滋養細胞所產生的VEGF具有促進血管內皮細胞生長、繁殖、靜脈血管通透性的作用。VEGF是促進血管內皮生長的主要因子，它在血管生成方面有著重要的作用，該表達水平出現異常與流產有很大的聯系。VEGF受體sFlt-1除了具有抑制血管形成的作用，且它可以對內皮細胞NO釋放合酶進行抑制，抑制VEGF發揮作用，最終會對血管生成過程造成影響，破壞血管通透性與完整性。VEGF發生異常會對胚胎血管生成過程造成影響，導致流產的發生，VEGF水平偏高就屬于異常[11]。同時，VEGF與sFlt-1水平偏高，會使胚胎處于低氧環境，兩者之間相互影響會導致絨毛血管生成受到影響，血管壁通透性降低導致流產[12]。VEGF與sFlt-1水平越高胚胎缺氧也就會越嚴重，胎兒各方面的發育情況也會受到嚴重的影響，特別對血管生成非常不利，加快了流產的發生[13]。本次研究發現，研究組血清中VEGF與sFlt-1水平高于對照組(P<0.05)，這就說明，VEGF與sFlt-1水平會對不明原因的復發性流產造成影響，盡早對產婦進行檢查有利于預防復發性流產的發生。同時也說明不明原因復發性流產產婦的血清中VEGF與sFlt-1水平比正常產婦的要高。

相關研究[14]顯示，VEGF的受體sFlt-1水平如果顯著升高，則會導致sFlt-1與VEGF的親和力增強，降低產婦血清中VEGF的水平，抑制產婦胎盤中血管的形成，最終會對早期胎盤的發育造成影響，促進流產的發生。本次研究發現，研究組絨毛組織中VEGF與sFlt-1陽性表達率高于對照組(P<0.05)，這就說明，VEGF與sFlt-1陽性表達率越高越容易導致流產的發生。另外也可以說明可溶性sFlt-1水平越高會對VEGF水平進行中和，導致VEGF水平不足，最終使產婦的孕期胎盤血管生成造成了抑制，促進了流產發生。

有學者[15]發現，對正常孕婦的妊娠絨毛進行培養液培養可以發現有管狀內皮細胞形成與遷移現象發生，而在其中加入sFlt-1則會對其作用進行抑制或者是減弱，說明加入的sFlt-1會對VEGF作用進行抑制，會對胎盤中血管的生成造成影響，最終會導致血管內皮受到損傷，使血管生成過程受到抑制。本次研究發現，原因不明復發性流產與sFlt-1呈正相關(P<0.05)，說明sFlt-1水平發生異常是導致不明原因復發性流產發生的重要因素。

綜上所述，原因不明復發性流產與sFlt-1的相關性及其臨床意義分析中，原因不明復發性流產與sFlt-1存在緊密的聯系，對其進行檢測是非常有必要的。