飼料中添加發酵桑葉對草魚生長性能、血清生化指標的影響

丁國玉，宋維彥，姚志剛

（日照職業技術學院，山東日照 276826）

目前我國水產養殖規模已位居世界前列，但仍存在養殖飼料原料供應不足和養殖產量不足以滿足社會需要等問題，如遠洋優質魚粉資源的短缺導致國內水產飼料業主要原料仍得不到滿足（Ayyappan和Ahamad Ali，2007），從而不得不依靠非傳統的動植物資源蛋白質。另外，我國是世界上最大的桑樹種植國，有極大的桑葉資源優勢和開發前景（王芳等，2015）。桑葉中富含多種天然活性物質（黃酮、單寧、多糖、植物甾醇和脫氧野尻霉素），能維持動物的正常生長發育，提高機體免疫機能，具有抗氧化、抗衰老功能，還能維持脂肪和糖類代謝，有利于動物抗病和保健（吳浩和孟慶翔，2010）。經過微生物的一定工藝處理后所得的發酵桑葉具有促進營養物質消化吸收的作用，同時具有促進畜禽生長、調節營養物質代謝等作用（許鐠文，2012）。國內外以往研究表明，飼料中添加發酵桑葉能顯著提高魚類生長性能，并且能有效改善血脂、血糖水平，提高機體抗氧化能力（沈黃冕等，2016）。

作為我國淡水養殖最多的魚類，2017年全國草魚養殖產量超590萬t（2018漁業年鑒）。目前有關草魚飼料中添加發酵桑葉的報道還比較少見，本試驗通過對比不同發酵桑葉添加量對草魚幼魚生長性能，營養組成和血清生化方面的影響，旨在探討發酵桑葉在草魚飼料中的添加效果，希望能為發酵桑葉在草魚飼料中的相關應用提供數據參考。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料 試驗用發酵桑品均采摘于同年6～8月份，晾干后粉碎制成桑葉粉（40目）。于試驗室接種植物酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌和固氮菌發酵48 h，60℃烘干粉碎后制得。試驗用桑葉及發酵桑葉的基礎營養成分含量如表1。

表1 試驗桑葉營養物質組成 %

按飼料配方設計添加0（對照組）、2.5%、5.0%、7.5%和10.0%的發酵桑葉，配制成5組等氮等能試驗飼料（粗蛋白質32.14%，粗脂肪4.95%）（表2）。所有飼料原料粉碎后過80目篩，制成1.5 mm粒徑顆粒飼料，風干后-20℃保存備用。

表2 試驗飼料組成及相關營養水平（干物質） %

1.2 試驗設計和飼養管理 試驗魚選用同一批培育的體重為（15.01±0.12）g的草魚450尾，隨機分為5組，每組3個重復，每個重復30尾魚。在水缸（320 L）中飼養50 d，日投飼量為體重的2%～5%，每天 07：00、11：30、17：30各投喂1次。養殖所用曝氣自來水，試驗期間水溫為（25.1±2.5）℃，pH為7.4±0.4，溶氧含量為5～6 mg/L，氨氮含量＜0.40 mg/L。

1.3 樣品制備與分析 飼養50 d后，禁食24 h稱重，按每個重復取3尾試驗魚用于營養組成測定；取5尾用于靜脈取血，血樣于8000 r/min、4℃條件下離心5 min，收集血清，-20℃保存，24 h內測定完成相關生化指標。飼料抽樣及全魚樣品相關營養指標參照胡靜等（2016）測定方法。血清葡萄糖、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯、總膽固醇均采用試劑盒測定（南京建成生物工程研究所）。

1.4 數據處理 采用SPSS 20.0進行單因素方差分析（one-wayANOVA），采用Duncan’s進行多重比較。所有試驗數據以“平均值±標準差”表示，差異顯著水平為P＜0.05。

2 結果分析

2.1 飼料中添加發酵桑葉對草魚生長性能的影響 發酵桑葉添加量對草魚幼魚存活率無顯著影響（P＞0.05），試驗各組存活率均保持在95%以上。飼料中添加發酵桑葉使草魚生長性能（增重率、特定生長率和飼料效率）產生顯著變化（P＜0.05），隨著添加量增加，草魚生長性能逐漸增大，當添加量為7.5%時生長性能最大，且顯著高于對照組（P＜0.05），其他各添加組與對照組無顯著差異（P＞0.05）。當發酵桑葉添加量達到10%時草魚生長性能出現下降趨勢（表3）。

2.2 飼料中添加發酵桑葉對草魚營養組成的影響 飼料中添加發酵桑葉對全魚水分和粗蛋白質含量未產生顯著影響（P＞0.05）；當添加量達到10%時，試驗草魚的全魚灰分含量最大（P＜0.05）；隨著添加量增大，全魚和肝臟的粗脂肪含量出現下降趨勢，當添加量達到10%時，兩者粗脂肪含量都最小（P＜0.05）；各添加發酵桑葉的試驗組草魚肌肉的粗脂肪含量未出現顯著變化（P＞0.05）（表4）。

表3 不同發酵桑葉添加量對草魚生長性能的影響

2.3 飼料中添加發酵桑葉對草魚血清生化指標的影響 由表5可知，發酵桑葉對血清葡萄糖含量無顯著差異（P＞0.05），添加發酵桑葉可以降低總膽固醇、甘油三酯、谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶、低密度脂蛋白含量，最小值均出現在發酵桑葉添加10%組，且隨著發酵桑葉添加量的增加，各血清生化指標均出現下降趨勢。

表4 不同發酵桑葉添加量對草魚營養組成的影響

表5 不同發酵桑葉添加量對草魚血清生化指標影響 mmol/L

3 討論

本研究中添加發酵桑葉對草魚生長效果和飼料利用率等方面有一定促進作用，這與以往對印度囊鰓鯰（Mondal等，2011）、巴塔野鯪（Mondal等，2012）和南亞野鯪（Kaviraj等，2013）的研究結果相似，區別于對羅非魚、大口黑鱸對生長抑制的研究結果。這可能與飼料中發酵桑葉添加種類和含量、試驗對象、飼料配方等因素有關。由于桑葉發酵后能有效改善適口性，提高飼料利用率（任元元等，2016），這在一定程度上提高了草魚體生長性能，而添加過多發酵桑葉也會有抑制草魚生長的趨勢。這與以往在羅非魚和一些畜禽飼料中添加過多發酵桑葉得出的結論一致（陳文燕等，2015；章學東等，2012）。

桑葉發酵后的抗營養因子減少，活性成分顯著增加（Feng等，2007）。這可能是本試驗中添加發酵桑葉后顯著降低魚體和肝臟脂肪含量，以及肝臟指數的原因。本研究結果中添加發酵桑葉后還在一定程度上降低了草魚血清中總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白幾個反應脂類代謝的指標，這與以往在羅非魚（陳文燕等，2015）和大口黑鱸（趙鵬飛等，2016）等水產動物的研究一致，從而進一步佐證了發酵桑葉能對草魚及大多數水產動物的脂類代謝起調節作用。

本試驗結果發現，添加發酵桑葉后顯著減少了草魚肝臟脂肪含量，監測肝功能的兩種酶（谷丙和谷草轉氨酶）活性也出現顯著降低，這進一步證實了發酵桑葉能改善試驗對象肝臟健康。

桑葉中含有生物堿、DNJ（1-脫氧野尻霉素）以及多種多糖等活性成分，這些活性成分一方面能抑制葡萄糖在動物腸道的吸收（李有貴等，2010），另一方面黃酮類和生物堿能有效調控肝細胞中糖代謝（Hong等，2004），從而實現調節血糖功效。本試驗結果顯示，發酵桑葉可降低草魚的血糖含量，這也再次證明發酵桑葉在魚類血糖方面的調節作用。

因此，本試驗中飼料添加不超過7.5%發酵桑葉不會影響草魚的生長和飼料利用效率，同時添加發酵桑葉有助于草魚脂類代謝和肝臟健康。