響應面法優化米炒黨參炮制工藝研究

胡金梅 張姚飛 易珍奎 馮曉琴 楊正兵（通訊作者）

（重慶市永川區中醫院 重慶 402160）

黨參收載于《中國藥典》2015年版[1]。其主要含苷類、甾體類、糖類、生物堿等[2]。有健脾益肺，養血生津之功效，生品以益氣生津為主，米炒后益氣健脾作用增強[3]。基于米炒黨參的炮制工藝尚沒有可量化的工藝參數，本研究旨在對其炮制工藝進行優化。

1.材料

1.1 儀器

Waters e2695-2489高效液相色譜儀；紫外分光光度計（UV-2600，島津）；電子天平（萬分子一，十萬分之一，賽多利斯）；超聲波清洗器（固特超聲）。

1.2 藥材與試劑

黨參炔苷（111732-201607）、D-無水葡萄糖（110833-201707）、5-羥甲基糠醛（5-HMF，111626-201610），均購自中國食品藥品檢定研究院。乙腈、甲醇為為色譜純，TEDIA；其他試劑均為分析純。

2.方法和結果

2.1 黨參炔苷與5-HMF的測定方法

Ultimate? AQ-C18（250×4.6mm，5μm），流動相：乙腈-水（27:73）；流速1.0ml/min；柱溫30℃；進樣體積10μl；檢測波長267nm。結果供試品色譜中黨參炔苷和5-HMF分離效果較好。

2.2 多糖的含量測定方法

2.2.1 顯色及測定方法 移取溶液適量于具塞試管中，加水至2ml，加入蒽酮試液6ml，塞緊試管，搖勻，沸水浴10分鐘，取出，冷卻至室溫，搖勻，625nm處測定吸光度。

2.2.2 對照品溶液 取無水葡萄糖適量，精密稱定，加水溶解。

2.2.3 供試品制備方法 取黨參粉末0.2g，加水40ml，回流提取2小時，取出放冷，濾過，取續濾液20ml，加乙醇使含醇量達75%，靜置12小時，抽濾，沉淀加水溶解至5ml。

2.3 米炒黨參炮制工藝研究

2.3.1 工藝的優化 以炮制溫度、炮制時間、輔料用量為自變量，以黨參炔苷的量（Y1）、5-HMF的量（Y2）、多糖的量（Y3）為評價指標，以綜合評分（Y）為響應值進行設計。Y=（Y1+Y2）*50+Y3*0.5。實驗設計及結果見表1和表2。

表1 實驗因素水平

表2 實驗設計及結果

2.3.2 模型擬合及方差分析

回歸模型方程為：Y=49.11840+1.00154A-2.77109B-4.08988C-0.001952AB-0.003050AC+0.011238BC-0.003382A2+0.047317B2+0.19 4387C2，r=0.9026，該模型擬合度好，可用于炮制工藝的分析和預測。方差分析顯示對炮制工藝的影響次序為：炮制時間＞炮制溫度＞輔料用量，其中炮制時間影響最顯著。

表3 方差分析

2.3.3 響應面優化與預測 利用Design-Expert 11軟件繪制炮制溫度、炮制時間、輔料用量對米炒黨參的響應面圖和二維等高線圖。

由圖可知，AB間交互作用顯著。以Y最大為目標優化最佳炮制工藝，得A=138，B=3，C=20，即取黨參藥材，加20%的米，置138℃炒制3分鐘。

2.3.4 驗證試驗：結果見表4。

表4 驗證試驗結果

由上表可知，優化出的最佳工藝綜合評分較高，平行性較好。

3.討論

黨參米炒益氣健脾作用增強，黨參炔苷和多糖的量有所下降，而5-HMF有所增加，有學者推測5-HMF是健脾止瀉的有效成分，筆者認為黨參炔苷和黨參多糖與健脾止瀉的量效關系有必要進一步研究。