一例SD大鼠自發性心臟海綿狀血管瘤的病理學觀察

邱波, 王艷, 胡建廷

(1. 山東省藥學科學院 山東省化學藥物重點實驗室, 濟南 250101;2. 山東英才學院, 濟南 250104)

大鼠心臟自發性原發性腫瘤罕見，心臟的自發性原發性腫瘤包括心房間皮瘤、心臟副神經節瘤、心內膜神經鞘瘤和心壁內神經鞘瘤等[1-3]。海綿狀血管瘤也是大鼠心臟自發性原發性腫瘤的一種類型，但對于大鼠心臟自發性原發性腫瘤中的海綿狀血管瘤的文獻報道極為罕見。本文以空白對照組大鼠(試驗周期為26周)出現的一例自發性心臟海綿狀血管瘤為研究對象, 通過肉眼形態觀察、HE染色及血管內皮細胞CD31陽性標記物的免疫組織化學染色方法, 對該病例進行病理形態學的初步探討。

1 動物來源與飼養環境

6～8周齡SPF級SD大鼠160只，雌雄各半，購自北京維通利華實驗動物有限公司[SCXK(京)2012-0001]。動物飼養于本中心SPF級動物房大鼠飼養間[SYXK(魯)2014-0008]，分4組進行為期26周的灌胃重復給藥毒性試驗。

2 患病動物概況

該患病動物為給藥26周結束后的空白對照組(雌雄各10)雄性大鼠。肉眼觀察，該動物心臟腫大，檢查體表皮膚無破損，眼、耳、鼻、口、外陰部等無出血或分泌物，肛周無排泄物附著。大鼠經剖檢后對心臟組織進行病理學和免疫組織化學觀察。

3 肉眼形態學觀察

剖檢見病變位于室間隔，與心壁間界限不清晰，呈海綿樣結構，大小約1.5 cm×0.8 cm×0.5 cm，切面呈蜂窩狀(圖1箭頭所示)。

4 組織病理學檢查

顯微鏡下, 觀察到心肌組織間含海綿狀血管瘤成分, 主要由邊界不清、擴張、充血的血管構成, 血管腔大小不等, 血管腔內有許多紅細胞, 管壁常較薄,內襯扁平的內皮細胞, 內皮細胞未見異型性(圖2)。

5 CD31免疫組織化學

圖 1 心臟的肉眼形態學觀察

5.1 試劑

SP-0023 HistostainTM-Plus Kits免疫組織化學試劑盒，規格: 18 mL，批號: AG08164417，Rabbit Anti-CD31單抗、DAB染色試劑盒，均由北京博奧森生物技術有限公司提供。

圖 2 心臟海綿狀血管瘤的病理組織學觀察

5.2 方法

CD31免疫組織化學染色: (1)石蠟切片, 常規脫蠟至水; (2)蒸餾水沖洗, PBS浸泡5 min; (3) 抗原修復: 將切片插到玻璃切片架上, 倒入0.01 mol/L的檸檬酸鈉緩沖液，微波爐中火加熱3 min至沸騰后，靜置5 min, 再加熱3 min至沸騰, 自然冷卻至室溫，PBS漂洗3次，每次2 min; (4) 3%去離子水孵育15～20 min; (5)添加試劑A室溫孵育15～20 min，傾去，勿洗; (6)添加適當比例稀釋的一抗，4 ℃過夜; (7)PBS沖洗，3 min×3次;(8)添加試劑B, 室溫孵育15～20 min; (9)PBS沖洗,3 min×3次; (10)添加劑C, 室溫孵育15～20 min;(11) PBS沖洗，3 min×3次; (12)顯色劑顯色。(13)自來水充分沖洗; (14)復染：蘇木素輕度復染1 min，鹽酸酒精分化，自來水藍化5～10 min;(15)高梯度系列酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，鏡檢。

5.3 結果

血管內皮細胞CD31的免疫組織化學染色結果顯示，低倍鏡下(圖3A)，心肌間含海綿狀血管瘤成分，血管腔大小不等，呈海綿狀改變，血管腔內有許多紅細胞; 高倍鏡下(圖3B)，毛細血管管壁較薄，管腔擴大，管腔內充滿紅細胞，血管內皮細胞扁平，陽性染色，呈棕褐色。

6 討論

在大鼠中，大多數原發性腫瘤通常為低分化的間充質腫瘤，由梭形細胞組成，這些梭形細胞腫瘤通常被認為是神經鞘瘤，這一觀點已被S100蛋白免疫細胞化學染色陽性支持[4,5]。血管瘤也是大鼠心臟自發性原發性腫瘤的一種類型，但人們對于大鼠心臟原發性腫瘤中的血管瘤的報道極為罕見。對大鼠來說，血管瘤最常見于脾臟、肝臟和皮下組織[6]。血管瘤是相對邊界清楚的血管腫瘤，其特征是大小不一的血管輪廓，內襯單層均勻、分化良好的內皮細胞，其特征類似于正常的血管內皮。基質通常很少[7]。本病例鏡下觀察心肌間由大小不一的血管輪廓組成，血管內襯單層均勻、分化良好的內皮細胞，這與大鼠血管瘤的診斷標準相一致。

圖 3 心臟海綿狀血管瘤的免疫組織化學染色

與大鼠相比，人類心臟血管瘤報道的文獻資料相對較多，但是對于人類來說，心臟血管瘤也是十分罕見的原發性良性腫瘤，占心臟腫瘤的0.8%[8]。據谷伯起[9]和Basso等[8]統計，過去國外有文獻報告只占0.8%～2.8%。病理組織學上主要有兩種：毛細血管瘤和海綿狀血管瘤。毛細血管瘤鏡下主要為大量新生的毛細血管，新生的毛細血管內皮細胞增生肥胖，管腔大小不等，管腔內幾乎沒有紅細胞; 而海綿狀血管瘤主要為增生的毛細血管是薄壁，管腔擴大，大小不等，管腔內充滿紅細胞，呈海綿狀改變[10]。海綿狀血管瘤是一種比較少見的血管源性腫瘤，機體任何部位都可發生，常見于皮膚、肌肉，而發生在心臟的海綿狀血管瘤極為罕見。本病例剖檢肉眼觀察血管瘤體積小、呈海綿樣結構，免疫組織化學染色顯示血管內皮細胞上CD31分子為陽性; 鏡下觀察瘤體由不規則形的血竇構成，瘤與心壁間界限不清晰，瘤體中心部的血管竇纖維間隔可見散在的心肌細胞，高倍鏡下未見毛細血管內皮細胞增生肥胖，而本病例血管管腔擴張，管腔內充滿紅細胞，呈海綿狀改變。因此，結合上述肉眼形態學觀察、組織病理學及免疫組織化學血管內皮細胞CD31分子染為陽性的方法，本病例可診斷為心臟血管瘤類型中的海綿狀血管瘤。