樟葉越桔嫩枝扦插技術研究

于曉銳 張德國 唐軍榮 羅旭璐 劉 云 趙 平

( 1. 西南林業大學西南山地森林資源保育與利用教育部重點實驗室，云南 昆明 650233；2. 西南林業大學國家林業局西南地區生物多樣性保育重點實驗室，云南 昆明 650233)

樟葉越桔（Vaccinium dunalianum）為杜鵑花科（Ericaceae）越桔屬（Vaccinium）植物[1]，主要分布于云南西北部經滇中高原至滇南、滇東南一帶[2-4]。其幼嫩葉芽呈錐狀，形似雀嘴，在云南彝族地區又稱之為“雀嘴茶”，據記載自明代開始就作為一種茶代用品長期飲用至今，具有祛風除濕、舒筋活絡等功效[4]。樟葉越桔葉芽[5]和果實[6]中氨基酸、黃酮類等營養成分豐富，存在明顯的高鉀低鈉特征。Zhao等[7]對樟葉越桔干燥葉芽進行了系統的化學成分研究，從中共分離鑒定了10余種咖啡酰熊果苷類衍生物，其中主要化學成分 6′-O-咖啡酰熊果苷（6′-O-caffeoylarbutin）的得率高達22%，可望作為熊果苷天然替代品資源加以應用，具有重要的開發價值。隨后，該研究組又圍繞其資源相繼開展了化學分析[8-10]、生物活性[11]、成分制備[12-14]、組織培養[15]、基因克隆[16-19]、轉錄組[20]、內生菌[21-22]等相關研究。

樟葉越桔目前仍處于野生狀態，且分布有限，隨著人們對雀嘴茶關注度的不斷提高，導致其連年遭受破壞性采摘，野生樟葉越桔的數量急劇減少。因此，開展樟葉越桔的繁育研究顯得尤為重要，迄今為止，僅任國香等[23]初步開展了不同處理方法對樟葉越桔種子萌發影響的研究。扦插育苗方法具有繁殖系數高、操作簡便、成本低、保持品種優良特性、提早開花等優點[24]。截至目前，有關樟葉越桔扦插的相關研究較少。本試驗采用消毒方式、植物生長調節劑種類、植物生長調節劑濃度和施肥種類的四因素三水平正交試驗組合對樟葉越桔嫩枝進行處理，分別對各處理組合的生根率、發根數、根長、新稍高度等指標進行統計分析和比較，以期優化樟葉越桔扦插技術，提高樟葉越桔扦插繁殖成活率，為進一步樟葉越桔苗木的生產及應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

所用材料為2015年3月采自云南武定縣生長良好的樹齡約20 a的樟葉越桔1年生春梢嫩枝。扦插試驗在云南省昆明市西南林業大學林學院格林溫室內進行，內搭小拱棚，設遮陽網，通風良好，無積水[25]。無水乙醇（分析純，廣東光華科技股份有限公司），NAA、ABT1和ABT3（化學純，北京艾比蒂（ABT）研究開發中心）、尿素和奧西母液（葉面肥，購于昆明斗南花市，主要成分：N（NH4-N、NO3-N）、P2O5、K2O、Mg、Cu、Zn）。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設計

根據試驗目的，采用L9（3）4正交試驗設計，包括消毒方式（A）、植物生長調節劑種類（B）、植物生長調節劑濃度（C）和施肥種類（D）4個因素，每因素設置3個水平（表1）。每組試驗重復3次，共27個處理組合，每個處理各扦插50袋，每袋1株扦插苗，扦插苗合計1 350株。

1.2.2 扦插處理及管理

試驗前將生紅土過篩后裝于10 cm×15 cm規格的黑色塑料營養杯中，每個組合放3排，共50杯，苗床寬1.2 m，長度根據需要而設定，用0.05% KMnO4溶液進行消毒，將土壤澆透。每株穗條長度為 5～8 cm，保留2～3個芽和葉片，剪好之后將所有扦插穗條置于水桶內用水浸泡，以防失水。將浸泡后的穗條進行隨機選取，每50株扎成1捆，置于燒杯中，在相應燒杯中注入等量的水、3%乙醇、0.5% KMnO4。將消毒后的枝條按試驗設計要求分別置于事先準備好的燒杯中，分別注入不同濃度（50、100、200 mg/L）的不同植物生長調節劑（NAA、ABT1、ABT3）的溶液，浸泡時間為 2 h。

扦插后，拉上遮蔭網控制光照強度，每天記錄溫濕度。插后棚內溫度控制在20～25 ℃，每天13：00—15：00噴霧進行控溫。每2周揭開棚模，按試驗設計要求在相應組合內用噴壺噴灑0.1%奧西母液、0.1%尿素溶液、清水，噴灑完畢后立即封嚴塑料膜。結合施肥時定期清除小棚內雜草，以保證樟葉越桔插穗生根和生長空間。同時觀察小拱棚內基質水分變化，適當補水。

1.2.3 數據采集與分析

扦插試驗時間為2015年3月至2015年8月，試驗周期結束后對每個處理組合成活扦插苗的生根率、發根數、根長和新稍高度進行測定。利用Excel 2010和SPSS 17.0對所得數據進行統計分析，若指標間差異顯著或極顯著，則進一步采用Duncan's 法進行多重比較[26]。

2 結果與分析

2.1 不同處理對嫩枝扦插性狀的影響

不同處理對樟葉越桔嫩枝生根率、發根數、根長和新稍高度的影響結果見表2。由表2可知，27個處理組合的生根率范圍為22.0%～42.7%，其生根率的差異不顯著（P＞0.05）。No.1（不消毒，50 mg/L NAA植物生長調節劑處理，施肥種類0.1%奧西母液），No.4（3%乙醇消毒，100 mg/L NAA植物生長調節劑處理，不施肥）和No.7（0.5% KMnO4消毒，200 mg/L NAA植物生長調節劑處理，施肥種類0.1%尿素）的生根率均在30%以上，其中No.7的最高（42.7%）。上述3個處理組合所使用的植物生長調節劑均為NAA，其他因素水平均不相同，說明NAA對樟葉越桔的扦插生根起著較為關鍵的作用。其他不同處理組合的生根率均在20%～30%之間，No.5的生根率最低（3%乙醇消毒，200 mg/L ABT1植物生長調節劑處理，施肥種類0.1%奧西母液）。

不同處理組合間的根數和根長均達到極顯著差異（P＜0.01），其中No.1的根數極顯著的多于其他處理組合，達到 6.77～7.63個，No.5和No.1的根長極顯著地多于其他處理組合，分別達到2.89～8.83 cm和3.57～8.12 cm。采用不消毒的No.1、No.2和No.3的根數與其他組合達到顯著差異，表明不消毒對根系的發育起到輔助作用。施肥種類為0.1%奧西母液的No.1和No.5的根長顯著高于其他組合，說明0.1%奧西母液有利于根的伸長。不同處理組合間新梢高度的差異不顯著（P＞0.05），No.1、No.2和 No.3的新梢高度均在平均值以上，表明不消毒有利于新梢的生長。

2.2 影響嫩枝扦插的主導因子及優水平組合

各因素水平的極差分析結果見表3。從表3可知，植物生長調節劑種類（B）是影響樟葉越桔生根率的主導因子，消毒方式（A）是影響樟葉越桔根數和新梢高度的主導因子，根長的主導因子是施肥種類（D）。生根率因子的主次順序依次為：B＞D＞C＞A，生根率的理論優水平組合是A3B1C3D2（0.5% KMnO4消毒，200 mg/L NAA植物生長調節劑處理，施肥種類0.1%尿素），與實際最優結果相一致。根數因子的主次順序依次為 ：A1＞C1＞D1＞B1， 根數 的 理論 優 水 平 組 合 是A1B1C1D1（不消毒，50 mg/L NAA植物生長調節劑處理，施肥種類為0.1%奧西母液），也與實際最優結果相符。植物生長調節劑種類與濃度對根長的影響效果相同，根長和新梢高度理論優水平組合在實際中沒有出現，可能是因素水平間的交互作用所致。

表3 極差分析結果Table 3 Results of range analysis

2.3 扦插性狀隨因素水平的變化情況

由表4可知，消毒方式和植物生長調節劑濃度極顯著的影響根數（PA＜0.01，PC＜0.01），植物生長調節劑濃度和施肥種類對根長產生極顯著影響（PC＜0.01，PD＜0.01），說明植物生長調節劑濃度對扦插根的生長有顯著影響，而且針對根數和根長的植物生長調節劑濃度最優水平不同。說明低濃度（50 mg/L）植物生長調節劑更有利于發根，高濃度（200 mg/L）植物生長調節劑有利于根的生長。而因素水平變化對生根率和新梢高度2個指標的影響均不顯著。

表4 扦插性狀隨因素水平的變化結果Table 4 The variation of cutting characters with factor and level

2.4 扦插性狀的相關性分析

樟葉越桔扦插苗生根性狀相關性分析結果見表5。從表5可知，生根率與根長、根數無相關性，與新梢高度（R=-0.443，P＜0.01）呈現極顯著的負相關，說明新稍高度和生根率相互起到抑制作用，新梢高度增長的同時，消耗養分，生根率下降，與觀察到試驗現象相符合。根數、根長與新梢高度（R=0.218～0.274，P＜0.01）呈現極顯著的正相關關系，說明根長與根數起到相互促進作用，地下部分與地上部分也是相互協同促進，生根的同時，新梢也在生長。

表5 測定指標的相關系數Table 5 Correlation coefficient of tested indexes

3 結論與討論

本試驗采用L9（3）4正交試驗方法，考察了消毒方式、植物生長調節劑種類、植物生長調節劑濃度和施肥種類4個因素對樟葉越桔嫩枝扦插的影響。結果表明，不消毒、50 mg/L NAA處理和0.1%奧西母液施肥為樟葉越桔嫩枝扦插的最適條件。

許多試驗研究表明，插穗本身的特性[27-28]和培養基質、植物生長調節劑種類及濃度、苗期施肥管理等因素[29-32]與扦插的成活率和生根情況等有著密切的關系。近年來，國內學者對越桔屬植物的扦插開展了一些研究，發現用綠枝扦插的生根率優于硬枝[33-35]，ABT1生根粉有利于兔眼藍莓（Vaccinium ashei）[36]和篤斯越桔（V. uliginosum）[37]生根，而IBA對篤斯越桔根系伸長生長有促進作用[38]。本試驗的9個處理組合生根率介于22.0%～42.7%，根數為3.15～7.20個，根長為3.90～5.83 cm，新稍高度為3.24～4.57 cm，不同處理組合間的根數和根長均達到極顯著差異（P＜0.01），同樣也發現植物生長調節劑種類是影響樟葉越桔嫩枝扦插生根率的主導因子，這與廖優江等[34]對同屬植物美國兔眼藍莓扦插生根結果相符，但呂躍東等[37]報道不同植物生長調節劑對篤斯越桔扦插生根率影響不明顯，可能與其所使用的植物生長調節劑濃度有關。此外，消毒方式是影響樟葉越桔嫩枝扦插根數和新稍高度的主導因子，這與羅建讓等[39]、武新琴等[40]關于百合（Lilium browniivar.viridulum）鱗片、月季（Rosa chinensis）扦插試驗結果相一致；施肥種類是影響影響樟葉越桔嫩枝扦插根長的主導因子，噴施0.1%奧西母液對根長有促進作用，這與張翼鴻[41]的雪松（Cedrus deodara）扦插育苗試驗結果一致，在苗木的扦插過程中應適當追施葉面肥。本次試驗所采用的基質為昆明過篩紅土，由于其透氣性較差，可能是導致扦插生根率偏低的原因，值得進一步開展其不同基質扦插的對比試驗加以驗證。