不同實驗室檢測方法對結(jié)核分枝桿菌患者靈敏度和特異度的影響

221700豐縣疾病預(yù)防控制中心，江蘇 徐州

結(jié)核分枝桿菌是導(dǎo)致結(jié)核病發(fā)生的主要因素，而結(jié)核病則是一種傳染性比較強(qiáng)的疾病。在過去一段時間內(nèi)結(jié)核病得到一定程度控制，但是近幾年其發(fā)病率卻不斷提高，成為當(dāng)前對人們生命健康威脅較大的傳染性疾病，得到了不少國家的關(guān)注[1]。結(jié)核病實驗室診斷是防治結(jié)核病的重點(diǎn)內(nèi)容，金標(biāo)法、抗酸染色體涂片法等都是實驗室常見的檢測方法，但是由于陽性檢出率較低，花費(fèi)時間多，所以無法更好地滿足臨床實際需求[2]。基因芯片法是一種新出現(xiàn)的結(jié)核分枝桿菌檢測技術(shù)，簡單快速，準(zhǔn)確度高[3]。本文將選擇實驗室中常見的四種檢測技術(shù)展開分析，具體如下。

資料與方法

2018年2月-2019年2月收治結(jié)核分枝桿菌患者120例，分為4組；經(jīng)過診斷后明確得出結(jié)核病患者52例，其中肺結(jié)核50例，其他種類結(jié)核2例。

方法：A組、B組、C組和D組分別接受基因芯片法、金標(biāo)法、抗菌染色片涂片法和結(jié)核菌素檢測法。分枝桿菌菌種鑒定芯片從北京購買，結(jié)核抗體則是購買于上海，另外使用到的儀器包含PPD 皮試液、核酸快速提取儀、芯片干洗儀、微陣列芯片掃描儀。征得患者同意后，所有患者分別接受四種檢測法檢測，具體步驟如下：①A組方法為基因芯片法，先收集臨床標(biāo)本，然后再開始核算提取工作，PCR 擴(kuò)增，雜交芯片、判讀結(jié)果等，具體操作程序按照購買機(jī)器的說明書開展。②B組方法為金標(biāo)法，標(biāo)本需要離心之后使用。需要在反應(yīng)孔中間加上封閉液，在薄膜吸入之后繼續(xù)開展檢測工作，選取新鮮的血清標(biāo)本，用量控制在40 μL 左右，等到薄膜吸入后加入6滴洗滌液，觀察結(jié)果，若檢測和質(zhì)控區(qū)域都呈現(xiàn)出紅色斑點(diǎn)則表示結(jié)果陽性，若檢測區(qū)無色，質(zhì)控區(qū)紅色，則為陰性。③C組方法為抗菌染色法，需要選取標(biāo)本，在玻片正面靠右位置2/3 左右的位置，將其涂抹成卵圓形，正面朝上，等到自然干燥之后再經(jīng)火焰固定。使用不同的染液開展檢測，A 染液使用5 min后進(jìn)行清洗工作，再使用B染液，等到玻片干燥之后再開始鏡檢工作。④D組方法為結(jié)核菌素PPD 皮試法。在患者的左前臂掌側(cè)皮內(nèi)使用皮試液注射，用量為0.1 mL，72 h 之后觀察結(jié)果。若患者表現(xiàn)出潰破、水皰，則結(jié)果為陽性。

評判指標(biāo)：本次研究主要是評價不同實驗室檢測方法對結(jié)核分枝桿菌患者靈敏度和特異度的影響。分別選擇4種不同的實驗室檢測方法，采用靈敏度和特異度衡量實驗結(jié)果。

統(tǒng)計學(xué)方法：數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0 軟件分析；計數(shù)資料以(%)表示，采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

4種檢測方法靈敏度和特異度比較：幾種實驗室監(jiān)測方法的靈敏度和特異度都比較好，但A組檢測方法的靈敏度和特異度明顯高于其他3種檢測方法，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 四組靈敏度和特異度檢測結(jié)果比較(%)

討 論

結(jié)核病屬于眾多危害人類疾病種類中對人類健康安全威脅最大的疾病之一。結(jié)核分枝桿菌是導(dǎo)致結(jié)核病發(fā)生的主要因素，因此快速準(zhǔn)確地檢測結(jié)核分枝桿菌是防治結(jié)核病的有效途徑。本次研究中選擇了實驗室常見的集中檢測結(jié)核分枝桿菌的方法，并對它們在臨床中的應(yīng)用價值進(jìn)行比較分析。本次研究中發(fā)現(xiàn)基因芯片法的特異度明顯高于金標(biāo)法和結(jié)核菌素法。金標(biāo)法整體效果處于中上等水平。抗菌染色法的特異度比較高，但是其靈敏度比較低，結(jié)核菌素法和抗菌染色法恰好相反，特異度較低，靈敏度較高。雖然結(jié)核菌素法的靈敏度比基因芯片法還要高，但是PPD 呈現(xiàn)陽性并不代表患者當(dāng)前已經(jīng)患病，只能說明患者曾經(jīng)感染過結(jié)核分枝桿菌。根據(jù)已有調(diào)查結(jié)果顯示，我國結(jié)核感染率占比44.2%，所以結(jié)核菌素法所檢測的結(jié)果中假陽性率比較高，而且觀察結(jié)果需要花費(fèi)很長的時間，受到外部因素干擾的影響比較大，最終檢測結(jié)果準(zhǔn)確性較低[4]。

本次實驗研究過程中，特意選擇基因芯片法，此種實驗室檢測方法屬于一種新型檢測方法，和PCR 技術(shù)融合起來，使特異度和靈敏度得到進(jìn)一步提升。而且芯片的背景十分清晰干凈，能夠?qū)?7種結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行特異性鑒別，所需時間在6 h左右。這些優(yōu)勢使臨床推廣難度有效降低，屬于一種十分可靠的新型實驗室結(jié)核分枝桿菌檢測技術(shù)。基于基因芯片法所具備的優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)當(dāng)在臨床上大力推廣使用，提高檢測率。

綜上所述，對于結(jié)核分枝桿菌患者而言，結(jié)核菌素法、抗酸染色涂片法、金標(biāo)法和基因芯片法均是十分有效的檢測方法，具備特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)，其中GCT 法的特異性和靈敏度更高，值得在臨床上推廣使用。