高效液相色譜技術在藥品檢驗中的應用

閆錦鳳

摘要：目前高效液相色譜技術在藥品檢驗中廣泛的應用，該技術對藥品質量的檢測起了重要作用。該技術主要在藥物有效成分鑒別、藥物中相關物質的檢測、藥物中有效成分的含量測定等方面應用。作為一名藥品檢驗人員，應該利用好高效液相色譜技術，保證檢測準確度，提高檢測效率，嚴把藥品質量。

關鍵詞：高效液相色譜;藥品檢測;相關物質;靈敏度

隨著我國國民經濟的快速發展，物質生活水平的不斷提高，民眾對醫療水平要求也在不斷提高，這促使民眾對藥品的質量更加嚴格。高質量的藥品離不開先進的檢測手段，目前藥品質量檢測技術種類較多，其中應用最為廣泛和成熟的檢測技術就是高效液相色譜技術（High Performance Liquid Chromatography / HPLC）。該技術具有高壓、高速、高效、高靈敏度、應用范圍廣的特點，被廣泛應用藥品質量檢測中。具體體現在以下幾方面：

一、藥物有效成分鑒別的應用

目前高效液相色譜技術是較為有效的藥物鑒別技術。該技術中，其中一個很重要的技術參數——保留時間，即在流動相和色譜柱確定的條件下，每種物質或藥品具有其獨特的保留時間，不同的物質其保留時間是不一樣的。根據保留時間這一屬性，我們首先可以在藥典中查到某一藥品的保留時間，或者可以通過標準品來確定該物質的保留時間，然后我們對要鑒別的藥物進行液相檢測，根據檢測得到保留時間來判斷該物質是不是目的物質，從而達到鑒別的目的。[1]

二、藥物中相關物質的檢測

不管在化藥、中藥還是生物藥中均存在相關物質，如何確定相關物質，如何定量，一直是藥品檢測中的一個難點。但液相色譜可以這一難題，可以根據相關物質與藥物有效成分的差異性，選擇合適的色譜柱。目前色譜柱有排阻類型的（根據物質大小進行分離的），反相性的（根據物質的疏水性強弱進行分離的），離子型的（根據物質所帶的陰陽離子電荷和電荷強弱）。色譜柱的上述特點確立了高效液相色譜在相關物質檢測方面的靈活性和優勢性。[2]

三、藥物中有效成分含量的測定

高效液相色譜經歷了100多年的發展后，目前在高效液相色譜系統具有可以自動上樣，批量處理，處理量大，減少人為的操作，重復性好，精確度高等特點。眾所周知，中藥在所有藥品中，成分最為復雜，有效成分較多，各組分之前的比例往往影響著藥效。與一些其他的傳統檢測手段相比，有的技術不能進行多組分檢測，有的技術不能進行定量測定，而高效液相色譜技術實現了藥物中多組分的分離和定量。所以在高效液相色譜的協助下，藥品檢驗人員可以對中藥中的有效組分進行分離鑒別，并對各組分的含量進行確認。該技術在中藥質量檢測中的應用，不僅保證了中藥的質量和藥效，同時對我國中藥事業的發展起到了推動作用，使中藥走向世界。[3]

四、生物藥成分的檢測

隨著近幾十年生物技術的發展，市場上生物藥種類越來越多，生物藥日益受到患者和醫生的追捧，究其原因是：生物藥其靶向性強，效果好，尤其是近幾年上市的抗體類藥物。但是生物藥與傳統的化藥相比，其分子量大，高級結構復雜，易變性失活等特點，這對生物藥的質量要求尤為重要。高效液相色譜不僅在傳統的化藥純度檢測中發揮著重要作用，在生物藥新領域中仍發揮著不可替代的作用，目前生物藥被放行前，均要經過高效液相色譜的檢測，通過查詢相關藥典，該技術有在純度方面的檢測要求，也有在相關雜質方面的檢測要求。

五、手性藥物的檢測

高效液相色譜技術除了在藥品檢測中發揮著上述作用。還在難度較大的手性藥物檢測中發揮著作用。眾所周知，手性藥物與其相對應的映體在物理和化學性質方面存在著高度的一致性，給分離和鑒別造成很大的挑戰。而目前高效液相色譜技術由于其高靈敏性，可以無需衍生化就能對手性藥物進行分析和檢測。而對于較難分離的手性藥物，可以先進行衍生化反應，形成一個非對映異構分子，然后再進行分離檢測。

六、高效液相色譜新技術的發展

隨著近幾十年科學技術突飛猛進的發展，藥品檢測領域也出現了一些新技術，這些技術與高效液相色譜技術相結合，誕生了許多新的綜合技術。這些新的技術，不僅使分離檢測更加準確，靈敏度更高，而且大大的縮短了檢測時間。目前有：高效液相色譜-質譜聯用技術、高效液相色譜法-蒸發光檢測技術、快速高效液相色譜技術等。

高效液相色譜-質譜聯用技術，（liquid Chromatograph Mass Spectrometer），簡稱LC-MS，它結合了液相色譜儀具有有效分離熱不穩性和高沸點化合物的分離能力和質譜儀很強的組分鑒定能力，將這兩種能力的完美結合，實現了對復雜有機混合物的高效分離分析。高效液相色譜法-蒸發光檢測技術（High-performance liquid chromatography with evaporative light-scatter），簡稱：HPLC-ELSD，它實現了液相色譜儀的分離物質能力與ELSD在檢測不含發色團的化合物的能力的完美結合，不再限于檢測含發色團的化合物范圍，拓寬了HPLC-ELSD的應用范圍。快速高效液相色譜技術是在傳統高效液相色譜技術基礎上進行了升級和改造，主要優化了色譜參數，增加了柱效，采用耐高壓的柱子等等，從而提高高效液相色譜分析的效率，降低使用時間，減少可能潛在污染的風險。

七、結語

目前高效液相色譜技術已被廣泛應用到藥品檢驗工作中，該技術不僅給醫藥研發人員提供了有效的檢測手段，同時在藥品質量放行方面也發揮著重要作用。作為一名藥品檢測人員，我們應該充分利用好高效液相色譜技術，發揮它在藥品檢測中的優勢，同時我們要及時學習新的技術，為藥品的研發和生產提供保證，為我國的醫藥事業發展做出我們的貢獻。

參考文獻：

[1]張良曉.高效液相色譜在藥物分析中的應用研究進展[J].內蒙古石油化工，2005（7）：3-5.

[2]鄭勤琴，項勛，段綱，等.高效液相色譜和超高效液相色譜在藥物分析中的應用研究[J].上海畜牧獸醫通訊，2017（2）：57-59.

[3]劉瑩，周建良，李萍.快速高效相色譜分離技術在中藥分析中的應用[J].色譜，2009，27（5）：682-689.