用山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質量比較研究

吳若溪

摘 ?要：本實驗對用山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質量比較研究。含量測定方法：采用迪馬C18鉆石色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），流動相：（A）0.3%的甲酸水溶液、（B）乙腈;線性梯度洗脫，檢測波長：280nm（綠原酸），324nm（黃芩苷），277nm（連翹苷），流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。黃芩苷在0.08～0.4mg·mL-1，連翹苷在0.04～0.2mg·mL-1，綠原酸在0.008～0.04mg·mL-1范圍內線性關系良好。結論：用山銀花與金銀花制備雙黃連口服液綠原酸、黃芩苷、連翹苷含量均符合藥典標準。

關鍵詞：雙黃連口服液;質量標準;研究

雙黃連口服具有疏風解表，清熱解毒的功效。雙黃連口服液具有抗炎、抗氧化、抑制病毒的作用[1-2]。雙黃連口服液常用于呼吸道合胞病毒所致急性下呼吸道感染、小兒支原體肺炎、上呼吸道感染等治療[3-5]?！吨袊幍洹酚?005年版之前的28年間，忍冬與灰氈毛忍冬在中醫藥臨床應用與中醫藥劑中一直同作金銀花應用。2010年版《中國藥典》對忍冬與灰氈毛忍冬進行分列，其中忍冬被列為金銀花唯一的藥源植物，而灰氈毛忍冬收藏在山銀花中。山銀花是忍冬科植物灰氈毛忍冬、紅腺忍冬、華南忍冬或黃褐毛忍冬的干燥花蕾或帶初開的花。金銀花為忍冬科植物忍冬的花蕾或帶初開的花。山銀花與金銀花功效均為清熱解毒，疏散風熱。山銀花與金銀花功效均用于癰腫療瘡，熱毒血痢，風熱感冒，喉痹，丹毒，溫熱發病。本實驗對山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質量進行比較研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：梅特勒ME204E分析天平（上海楚柏實驗室設備有限公司）;LC-100（梯度）數字化電腦智能控制高效液相色譜儀（上海伍豐科學儀器有限公司）;EasySepTM-1010高效液相色譜儀（徐州華納精密儀器有限公司）;英國艾德姆衡器AVT減震天平臺（艾德姆衡器（武漢）有限公司）。

1.2 色譜柱：迪馬C18鉆石色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：綠原酸

1.4 試劑：甲醇（四川華源盛泰生物科技有限公司）、乙腈（四川華源盛泰生物科技有限公司）、甲酸（四川華源盛泰生物科技有限公司）。

1.5 試藥：雙黃連口服液（自制）

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下。流動相：（A）0.3%的甲酸水溶液、（B）乙腈;線性梯度洗脫依次為14%～20%/0～12min，20%～30%/12～13min，30%～65%/13～25min和65%/25～35min;柱溫：30℃;流速：1.0mL/min[6]。檢測波長：280nm（綠原酸），324nm（黃芩苷），277nm（連翹苷），流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數按綠原酸峰計算應不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取綠原酸、黃芩苷、連翹苷對照品適量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含0.2mg（黃芩苷）、0.02mg（綠原酸）、0.1mg（連翹苷）的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取雙黃連口服液，用5甲醇溶解超聲溶解，并轉入25mL量瓶中，定容，搖勻，過0.45μm微孔濾膜，濾液作為供試品溶液。

2.4 精密度試驗

取對照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.72%，RSD=0.69%，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。

2.5 對照品的線性考察

精密稱取綠原酸、黃芩苷、連翹苷對照品適量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含2mg（黃芩苷）、0.2mg（綠原酸）、1mg（連翹苷）的溶液，分別取1、2、3、4、5毫升，置于25毫升容量瓶中，加甲醇定容。分別精密上述溶液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明，黃芩苷在0.08～0.4mg·mL-1，連翹苷在0.04～0.2mg·mL-1，綠原酸在0.008～0.04mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.6 重現性試驗

稱取同一批的雙黃連口服液樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.78%、0.65%、0.81%，結果表明此方法的重現性良好。

2.7 樣品含量測定

依照上述含量測定方法，分別測定山銀花和金銀花制備雙黃連口服液三批樣品。

3 結論

本實驗對山銀花與金銀花制備雙黃連口服液質量進行比較研究。本實驗采用山銀花和金銀花分別自制了6批雙黃連口服液.用山銀花和金銀花制備雙黃連口服液綠原酸、黃芩苷、連翹苷含量均符合藥典標準。

參考文獻

[1]Yuan Gao，Lei Fang，Runlan Cai，Chuanjie Zong，Xi Chen，Juan Lu，Yun Qi.Shuang-Huang-Lian exerts anti-inflammatory and anti-oxidative activities in lipopolysaccharide-stimulated murine alveolar macrophages[J]. Phytomedicine.2013.

[2]莫紅纓，賴克方，江永南，謝建屏，譚亞夏，鐘南山.雙黃連對呼吸道合胞病毒感染的氣道上皮細胞炎癥因子釋放的影響[J].廣州醫學院學報， 2005（02）.

[3]孔曉棠，江載芳，照日格圖，顧岑，江沁波，王樹欣，申昆玲，王雪蓮，買穎，閻靜.雙黃連霧化吸入治療呼吸道合胞病毒所致急性下呼吸道感染[J].中華兒科雜志，1996（01）.

[4]樊樹華，賀一新.雙黃連口服液（兒童型）聯合阿奇霉素治療小兒支原體肺炎的臨床研究[J].中國實用醫藥，2017（15）.

[5]史曉娟，賀一新.雙黃連口服液（兒童型）聯合西藥治療兒童上呼吸道感染的臨床效果觀察[J].海峽藥學，2017（02）.

[6]杜英峰，張蘭桐，靳怡然，許慧君，劉靜榮，張立段.多波長RP-HPLC法測定雙黃連口服液中黃芩苷、綠原酸和連翹苷[J].中成藥，2009（09）.