肝康靈顆粒的質量標準研究

劉玉

摘 ?要：本實驗對肝康靈顆粒的質量標準進行研究。含量測定方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）為流動相，檢測波長為236nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃，梔子苷在0.01～1.6mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。結論：本法簡便、準確，可作為肝康靈顆粒的質量標準。

關鍵詞：肝康靈顆粒;質量標準;研究

梔子為肝康靈顆粒主要成分之一。梔子是茜草科植物梔子的果實，具有護肝、利膽、降壓、鎮靜、止血、消腫等作用。《藥性論》記載：“殺蟅蟲毒，去熱毒風，利五淋，主中惡，通小便，解五種黃病，明目，治時疾除熱及消渴口干，目赤腫痛。”梔子具有抗哮喘、抗炎鎮痛、保肝利膽、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、促進韌帶細胞增殖、促進黑色素生成等作用[1-2]。

梔子含有梔子甙（gardenoside）、都桷子素龍膽雙糖甙（genipin-1-gentiobioside）、梔子酮甙（gardo-side）、去乙酰車葉草甙酸甲酯（methyl deacetyl asperulosidate）、綠原酸（chlorogenic acid）、藏紅花酸（cro-cetin）、熊果酸（ursolic acid）、蕓香甙（rutin）、β-谷甾醇（β-sitosterol）等成分。本實驗擬增加肝康靈顆粒中梔子苷含量進行測定。本實驗對肝康靈顆粒的質量標準進行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：OLABO雙排六孔恒溫水浴鍋（濟南鑫井醫療器械有限公司）;MS204精密天平（濟南思卓醫療器械有限公司）;GI-3000-14四元低壓梯度液相色譜儀（武漢集思儀器設備有限公司）;721型聯創儀器可見分光光度計（南京聯創分析儀器制造有限公司）;RephiLe Direct-Pure Genie 超純水系統（上海樂楓生物科技有限公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：梔子苷對照品（中國藥品生物制品檢定所）。

1.4 試劑：甲醇（山東省陽信隆泰化工科技有限公司）、磷酸（山東省陽信隆泰化工科技有限公司）、乙腈（山東省陽信隆泰化工科技有限公司）、四氫吷喃（山東省陽信隆泰化工科技有限公司）。

1.5 試藥：肝康靈顆粒

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

分別考察乙腈-甲醇-水（5：45：50），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（30∶70∶0.8），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（20∶80∶0.8）乙腈-甲醇-0.4%冰醋酸溶液（10：18：62），乙腈-甲醇-0.4%磷酸溶液（2：18：80），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）不同比例的流動相，流動相為乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）時分離效果最好，所以采用乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）為本次實驗的流動相。依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[5-6]。流動相：乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）為流動相，檢測波長：236nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數按梔子苷峰計算應不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取梔子苷對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取肝康靈顆粒適量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液即得。

2.4 專屬性試驗

取除梔子以外的原料，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述實驗方法檢測，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 精密度試驗

取對照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.69%，表明本方法精密度良好。

2.6 對照品的線性考察

精密稱取適量梔子苷對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含0.01、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6毫克的溶液。分別精密上述溶液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明，梔子苷在0.01～1.6mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.7 重現性試驗

稱取同一批的肝康靈顆粒樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.68%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8 回收率試驗

采用加樣回收試驗，共測定六份樣品。梔子苷回收率99.6%。

2.9 樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定梔子苷凍干粉三批樣品。

4 結論

本實驗分離效果好、方法簡便、快捷、準確、專屬性好，可用于肝康靈顆粒質量標準研究。

參考文獻

[1]方尚玲，劉源才，張慶華，林英，陳道玉，李世杰.梔子苷鎮痛和抗炎作用的研究[J].時珍國醫國藥，2008（06）.

[2]張文娟，李茂星，張泉龍，邱建國，尉麗力，賈正平.梔子苷的快速提取分離及其鎮痛抗炎作用研究[J].中國實驗方劑學雜志，2012（21）.

[3]Antioxi-dant activity of Gardenia jasminoides Ellis fruit extracts. Debnath T，Park P J，Deb Nath N C，et al. Food Chemistry，2011.

[4]Effects of Gar-deniae Fructus extract and geniposide on promoting ligament cell proliferation and collagen synthesis. Chen Q C，Zhang W Y，Kim H J，et al. Phytotherapy Research，2010.

[5]吳亞超，楊文靜，張磊，趙萬順，張文生，葉正良.梔子中梔子苷等7個化學成分測定及質量評價[J].中國藥學雜志，2016（10）.

[6]張留記，劉欽松，屠萬倩，劉怡.RP-HPLC法同時測定不同產地梔子中梔子苷、西紅花苷-Ⅰ和西紅花苷-Ⅱ的含量[J].中國藥房，2011（07）.