水果蔬菜中7種新型生物農藥殘留檢測方法研究

徐晶

摘 ?要：為了保證生物農藥在使用方面有良好的安全性，應認識到生物農藥實際殘留量檢驗工作的重要性，并能結合生物農藥特點以及殘留量檢查需要，制定科學的生物農藥殘留量檢查方案。本文就水果蔬菜當中7種新出現的生物農藥相應的殘留量檢測方法進行了分析。

關鍵詞：蔬菜;水果;生物農藥;殘留量;檢測

現代農業領域往往會使用各種農來對影響水果、蔬菜正常生長的病害以及蟲害進行防治，并且在農業領域不斷發展中，也出現了大量新型農藥，進一步推動了農業領域水果蔬菜產量的提升。但在這些生物農藥使用中是，也會在水果蔬菜上存在一定的殘留量，需要技術人員做好相應的殘留檢測工作。

1 生物農藥概述

農藥在農業領域發展中起到了關鍵性的作用，有效的促進了水果、蔬菜等農業產品在產量方面的提升，并且在農業領域的持續發展中也出現了一些新型的生物農藥，讓農業領域的發展更加的高速化、多元化。比如目前農業領域中出現的生物農藥，從生物農藥的制造方面來看，其主要是利用了果實等生物活體在代謝階段產生的產物，在結合現代生物科學技術完成相應的仿生合成，形成批量化、高質量化的生物農藥生產，在將生物農藥運用到農業領域當中的時候能有效完成生物殺菌或者是生物抑制，切實的推動農業生產領域當中產量的提升。而由于生物農藥是以生物代謝產物為基礎進行的生產，因此這種生物農藥在使用中也就表現出了無公害性、低毒性以及不易出現抗藥性的特點，代表了現代農業領域當中的農藥生產、制備在朝向綠色化發展。而從生物農藥制備源方面來看，這種生物農藥的可以劃分為微生物源類型、動物源類型以及植物源類型三種類型，目前生物農藥在農業領域水果、蔬菜植物病蟲害防治方面發揮了良好作用，并且也在大范圍內得到了推廣。

由于生物農藥發展較快，在當前的農業領域當中出現了多種類型的生物農藥，這些生物農藥雖然能有效的對水果、蔬菜病蟲害進行防治，但由于這些生物農藥當中部分成分較為特殊，因此可能會對人體造成影響，需要相應部門做殘留量檢查工作，保證生物農藥有良好的使用。但苦參堿、印楝素、魚藤酮、煙堿等類型的生物農藥在使用中未能制定出相應的檢測標準，影響了相應生物農藥的檢驗工作質量，不利于生物農藥的發展。而在部分研究中發現印楝素這種物質帶有一定的遺傳毒性，有可能會導致人體當中精子出現畸形，最終影響到人類的生育功能。而苦參堿則帶有一定的神經毒性，這種物質可能會對人體的肝臟系統、造血系統以及腎臟系統造成影響。因此在使用生物農藥的階段中，需要相應的部門做好生物農藥檢查工作，使用多種方式對生物農藥的殘留量進行檢驗，并能做好實際殘留量的檢查工作，讓生物農藥的使用以及管理更加的科學化。當前在對生物農藥實際殘留量進行檢驗的時候會使用多種技術，比如分光光度技術、生物電極技術、液相色譜技術等眾多技術。

本文使用全自動類型固相萃取結合液相色譜技術，對蔬菜水果當中的苦參堿物質、煙堿物質、藜蘆堿物質、氧化類型苦參堿物質以及印楝素、井崗酶這7種生物農藥的實際殘留量檢驗方法進行了分析，以期讓生物農藥實際殘留量的檢測以及監控工作有更好的質量。

2 材料以及方法分析

2.1 儀器以及試劑

儀器：WatersQuattroPremierXEUPLC-MS/MS，北京優興全自動固相萃取儀;BUCHI平行蒸發儀;IKA渦旋振蕩器;科導超聲儀;Sigma3-18K高速離心機。試劑：甲醇（Fisher，色譜純），乙腈（Fisher，色譜純），甲酸（FA）（Fisher，色譜純），氨水（GR），乙酸（HA）（GR）。生物農藥標準品（北京壇墨質檢）：苦參堿、煙堿、魚藤酮、氧化苦參堿、印楝素、黎蘆堿、井崗霉素。WatersMCX固相萃取小柱（60mg，3mL）。

2.2 檢測條件

色譜柱：WatersHILIC1.7μm，2.1×100mm，柱溫：40℃，進樣體積：10μL。流動相：A5mmol/L乙酸銨（含0.1%甲酸（FA）），B乙腈。毛細管電壓：1.0kV，源溫：120℃，脫溶劑溫度：350℃，脫溶劑氣流速：800（L/h）。

2.3 測定方法分析

首先要完成樣品的制備，需要檢驗人員準確稱量出5g樣品，將這些樣品加入到總量為20毫升的質量分為2%的乙酸溶液當中，并使用渦旋技術進行混合，在完成了混合處理之后還要使用超聲技術進行時長為10分鐘的提取，之后在進行離心操作，將離心處理之后出現的上清液完全轉移到容量的為25毫升的比色管當中，并使用質量分為2%的乙酸溶液將其定容到25毫升，量取出5毫升的樣品溶液。

而在后續的程序凈化的時候，需要遵守全自動類型固相萃取操作的要。

活化1：甲醇→3mL→4mL/min;

活化2：純水→3mL→6mL/min;

上樣：不收集過柱液→5mL→3mL/min;

淋洗1：純水→3mL→6mL/min;

淋洗2：甲醇→3mL→4mL/min;

柱干燥：3mL→6mL/min;

洗脫：5%氨化甲醇→6mL→3mL/min;

柱干燥：3mL→6mL/min。

收集洗脫液，蒸干，用流動相初始梯度定容至1mL，過0.20μm微孔濾膜后上機測試。

3 結果以及數據分析

3.1 色譜柱組件選擇

在本次試驗分析中目標生物農藥中存在有叔胺基、仲胺以及醇羥基等極性類型的基團。

項目組比較了非極性柱（WatersBEHC18）、中等極性柱（WatersBEHT3）和強極性柱（WatersBEHHILIC）3種色譜柱對7種新型生物農藥的分離效果。發現在C18柱上除魚藤酮和印楝素有保留外，其他5種物質均沒有保留;在T3柱上除井崗霉素沒有保留外，其他6種物質均有保留，但個別組分峰形較胖;在HILIC柱上7種物質均有保留，且有比較好的峰形。所以最終選擇HILIC柱作為分析柱組件。

3.2 固相萃取機理及小柱的選擇

在反相萃取模式下，我們選擇了Waters的HLB，Agilent的Plexa、PPL、Focus、ENV和DIKMA的C86種非極性固相萃取小柱作為吸附柱，用濃度為50ng/mL的標準品考察了7種生物農藥在酸性、中性和堿性條件下6種小柱對7種生物農藥的保留情況（洗脫液為甲醇）。結果發現在3種條件下6種小柱對井崗霉素都沒有保留，不能滿足方法的要求，但除井崗霉素外，在中性或堿性條件下HLB、Plexa、Focus和ENV這4種小柱對其他物質均有不錯的保留。

3.3 正相萃取模式分析

在正相模式下，我們選擇了NH4、PSA、FLORISI、PrimeHLB、NH4/Carb、Carb等6種極性吸附小柱，用濃度為50ng/mL的標準品考察了80%乙腈-水和乙腈兩種溶液體系中7種生物農藥在6種小柱中的保留情況。結果發現除PrimeHLB在80%乙腈-水體系中對7種生物農藥有比較好的保留外，其他柱子和體系對井崗霉素都沒有保留。這可能與井崗霉素的結構含有大量的醇羥基，極性極大無法洗脫有關。

3.4 樣品檢測結果分析

自該方法建立以來，成功應用于實驗室內部300多批各種水果、蔬菜樣品的檢測，并多次檢出生物農藥煙堿殘留，檢測結果介于0.062～1.41mg/kg間。

4 結束語

本項目研究建立的水果蔬菜中7種新型生物農藥殘留全自動固相萃取-液質聯用檢測方法為果蔬中生物農藥殘留的檢測提供了重要支持，為保證食品安全提供了重要保障，值得推廣和應用。本檢測方法可以配合國家相關部門開展生物農藥殘留監測的研究并制定相關生物農藥殘留的限量標準。

參考文獻

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