T淋巴細胞亞群、VEGF、MMP-14檢測對肝癌射頻消融術(shù)后殘癌臨床評估的價值

霍傳紅 陳靜 高玉蓮

摘要：目的探討T淋巴細胞亞群、VEGF、MMP-14檢測對肝癌射頻消融術(shù)后殘癌臨床評估的價值。方法選取2017年11月-2018年11月我院收治的100例肝癌患者，隨機分為兩組，對照組為肝硬變患者，研究組為原發(fā)性肝癌患者。比較兩組患者的VEGF指標、MMP-14指標和T淋巴細胞亞群因子指標。結(jié)果治療后，研究組VEGF指標好于對照組（P<0.05），治療后，研究組MMP-14指標好于對照組（P<0.05），治療后，研究組T淋巴細胞亞群因子指標好于對照組（P<0.05）。結(jié)論對肝癌患者進行射頻消融術(shù)治療，效果顯著，能夠有效改善患者T淋巴細胞亞群、VEGF、MMP-14等相關(guān)指標，安全性高，改善患者臨床癥狀，提高患者生活質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：T淋巴細胞亞群;VEGF;MMP-14;肝癌射頻消融術(shù)后殘癌;評估價值

肝癌是臨床上常見的一種病癥，對患者的生活造成了極大的影響。隨著醫(yī)學(xué)水平的不斷提升，對該病的治療方法越來越多，當前，臨床上主要采用射頻消融術(shù)進行治療^[1]。射頻消融術(shù)能夠有效的改善患者的臨床癥狀，降低患者病痛，但是，該治療方法也存在一定的弊端，主要表現(xiàn)在病灶的殘留方面。臨床數(shù)據(jù)表明，殘癌的發(fā)生率較高，患者局部殘癌的發(fā)生率高達30-40%^[2]。肝癌具有危害性大和復(fù)發(fā)率高等特點，其中殘癌是肝癌復(fù)發(fā)率高的主要原因。所以，應(yīng)對治療過程中殘癌發(fā)生引起足夠的重視，本著早發(fā)現(xiàn)早治療的原則，為患者提供有效的治療，改善患者病情，保證患者預(yù)后^[3]。本研究通過對患者治療前后T淋巴細胞亞群、VEGF、MMP-14等指標的變化，對患者治療過程中殘留癌進行有效的臨床分析，效果顯著，報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取選取2017年11月-2018年11月我院收治的100例肝癌患者。納入標準^[4]：①患者治療前沒有進行肝癌相關(guān)治療;②通過相關(guān)的檢查，確診為肝癌;③2cm<單個癌灶<5cm，或多個癌灶<3個，癌灶<5cm;④患者及家屬了解這次研究的相關(guān)內(nèi)容，并簽署知情同意書。排除標準^[5]：①不愿參與研究這次研究或臨床數(shù)據(jù)不完善的患者;②伴有心絞痛或急性心肌梗死的患者;③對研究的藥物有過敏史的患者。將患者隨機分為兩組，研究組（n=60），男37例，女23例，年齡38-75歲，平均年齡（55.8士4.6）歲，住院時間16-29d，平均住院時間（17.2±5.1）d;對照組（n=40），男28例，女12例，年齡36-74歲，平均年齡（53.2士3.4）歲，住院時間15-28d，平均住院時間（16.3±4.4）d。本研究已經(jīng)得到患者同意，資料具有可比性（P>0.05），經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1T細胞亞群的檢測，方法如下：首先，使用不同熒光物質(zhì)對抗CD3、CD4、CD8抗體進行有效標記，標記完成后，使其與待測成分進行充分作用，然后使用流式細胞儀對細胞進行相關(guān)檢測^[6]。等待檢測的細胞會隨著流動鞘液而呈現(xiàn)單列排列，并快速的通過激光聚焦區(qū)域。聚焦完成后，激光會對每個細胞進行照射，照射過程中，能夠得到側(cè)向角散射和前向角散射兩種不同的散射光，同時能夠得到應(yīng)用熒光標記物質(zhì)產(chǎn)生的信號。通過該信號，能夠有效的計算出CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺的數(shù)值，進而算得T細胞亞群的比值^[7]。

1.4.2 VEGF的檢測，方法如下：使用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法對VEGF進行測定，首先將待測樣本和標準品放入事先盛有VEGF的抗體酶標包被板中，然后對其進行充分的溫育，之后將沒有進行結(jié)合的成分進行洗滌，洗滌完成后將其放入酶標工作液，再次進行溫育，在對沒有進行結(jié)合的成分進行洗滌^[8]。完成后，將底物A、B依次加入其中，氧化物酶（HRP）會對底物（TMB）進行有效的催化，進而生成藍色產(chǎn)物，該產(chǎn)物會在酸的作用下呈現(xiàn)黃色，樣品中VEGF的濃度會與顏色的深淺呈現(xiàn)正比關(guān)系。上述操作完成后，在波長為450nm下，對OD值進行測定，并依據(jù)樣品和標準品OD值，對樣本中VEGF含量進行計算。

1.4.3MMP-14的檢測，方法如下：檢查，應(yīng)用ELISA法對受檢標本進行測定，并將其與固相載體表面抗體或抗原進行有效反應(yīng)。然后，使用洗滌的方法將液體中的其他物質(zhì)與抗原抗體復(fù)合物進行有效分開^[9]。然后，將其加入適量的入酶標記抗體或抗原，應(yīng)用其反應(yīng)將其在固相載體上進行有效結(jié)合。這時，標本中受檢物質(zhì)會與固相上的酶含量呈現(xiàn)正比關(guān)系^[10]。然后將酶反應(yīng)底物加入，這樣底物就會被酶進行催化，進而形成有色產(chǎn)物，標本中受檢物質(zhì)量和產(chǎn)物量與具有直接的關(guān)系，所以，能夠通過顏色的深淺對其進行有效的分析。

1.3觀察指標

比較兩組VEGF指標，MMP-14指標和T淋巴細胞亞群因子指標，并且數(shù)值越接近正常值，說明患者的治療效果越顯著。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS18.0對數(shù)據(jù)進行分析，計量時，進行t檢測（`x±s）檢驗，計數(shù)時，進行X²（%）檢驗，當P<0.05時，說明存在明顯區(qū)別。

2結(jié)果

2.1患者VEGF指標比較

治療前，兩組VEGF指標無差異（P>0.05），治療后，研究組VEGF指標好于對照組（P<0.05），見表1。

2.2患者MMP-14指標比較

治療前，兩組MMP-14指標無差異（P>0.05），治療后，研究組MMP-14指標好于對照組（P<0.05），見表2。

2.3T淋巴細胞亞群因子指標比較

治療前，兩組T淋巴細胞亞群因子指標無差異（P>0.05），治療后，研究組T淋巴細胞亞群因子指標好于對照組（P<0.05），見表3。

3討論

肝癌是危害性極大的一種惡性腫瘤，隨著年齡的不斷增長，該病的發(fā)病率出現(xiàn)了不斷上升的趨勢，當前發(fā)病人數(shù)已經(jīng)達到全球的50%左右^[11]。過去，主要采取外科手術(shù)的方法進行治療，效果欠佳。隨著醫(yī)學(xué)水平的不斷進步，當前臨床上應(yīng)用射頻消融（RFA）術(shù)進行治療，效果顯著。該治療方法不僅操作簡單，而且不對患者進行開腹手術(shù)，大大縮短了患者的住院時間，進而降低了家屬的經(jīng)濟負擔。因此，該治療方法在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用。相關(guān)報道表明，射頻消融術(shù)不僅對腫瘤細胞殺滅和毀損方面起到重要作用，同時能夠?qū)υ鰪姍C體的對腫瘤的免疫作用，這就進一步對患者的治療和預(yù)后發(fā)揮了重要的作用。T淋巴細胞在腫瘤免疫過程中發(fā)揮了重要的作用，依據(jù)該細胞因子分泌的不同，分為Th2和Th1兩個不同亞群，但是Th2和Th1亞群又存在相互聯(lián)系，如果Th2和Th1亞群出現(xiàn)平衡問題，就會對機體的免疫功能造成影響^[12]。如果Th2和Th1亞群維持平衡，則機體會保持正常的免疫功能。MMPs（基質(zhì)金屬蛋白酶）在對腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和侵襲方面發(fā)揮了重要的作用，MMP-14又是是MMPs家族中一種重要的蛋白酶，不僅能夠?qū)δ[瘤細胞進行直接降解和破壞，同時能夠?qū)颊呒毎饣啄ず徒橘|(zhì)進行破壞，進而阻擋腫瘤細胞浸潤作用^[13]。另外，對新血管的形成具有有效的促進作用。MMP-14對血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）調(diào)節(jié)起到了一定的轉(zhuǎn)錄作用，進而對腫瘤血管的形成起到了一定的促進作用。治療后，研究組MMP-14指標好于對照組（P<0.05），該結(jié)果充分表明了，對患者進行射頻消融術(shù)治療，能夠有效改善患者MMP-14指標，增強了對腫瘤細胞的破壞作用，促進了新細胞的形成。

VEGF對促血管生長因子的形成具有較強的促進作用，在腫瘤浸入、腫瘤細胞、炎癥細胞、病變腫瘤組織中，能夠分泌較高水平的VEGF^[14]。VEGF對腫瘤血管內(nèi)皮細胞起到一定的刺激作用，對心血管的增值、遷移和新生血管誘導(dǎo)形成過程起到了一定的促進作用，進而對血管通透性進行有效提升，使得血管周圍組織纖維蛋白進行進一步的沉著，對血管基質(zhì)的形成起到了明顯的促進作用，使得腫瘤有效進入新生血管，對細胞的轉(zhuǎn)移起到了有效的促進作用^[15]。研究結(jié)果顯示，治療后，研究組VEGF指標好于對照組（P<0.05），該結(jié)果充分表明了，對患者進行射頻消融術(shù)治療，能夠有效改善患者VEGF指標，改善患者病情，對腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移起到了有效的促進作用。另外，研究結(jié)果顯示，研究組T淋巴細胞亞群因子指標好于對照組（P<0.05）。該結(jié)果充分表明了，對患者進行射頻消融術(shù)治療，能夠有效改善患者T淋巴細胞亞群因子指標，降低患者炎性并發(fā)癥發(fā)生率，有利于病情的恢復(fù)。

綜上所述，對肝癌患者進行射頻消融術(shù)治療，效果顯著，能夠有效改善患者T淋巴細胞亞群、VEGF、MMP-14等相關(guān)指標，安全性高，改善患者臨床癥狀，提高患者生活質(zhì)量。

參考文獻：

[1]李丹青，賀凡. 中西醫(yī)結(jié)合治療原發(fā)性肝癌射頻消融術(shù)后合并急性消化道出血的效果及對VEGF蛋白表達的影響[J]. 廣東醫(yī)學(xué)，2017，37（15）：2397-2399.

[2]魏曉平，胡明道，于恒海，等. 精準肝切除與常規(guī)肝切除對肝癌患者T細胞亞群變化影響的比較[J]. 中國普通外科雜志，2017，26（7）：855-860.

[3]付承林，趙秀敏，陳靈斌，等. HBV感染型原發(fā)性肝癌患者腫瘤微環(huán)境中T細胞亞群及VEGF表達水平及臨床意義[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2017，27（7）：1490-1493.

[4]原強，靳勇，白旭明，等. 經(jīng)肝動脈化療栓塞聯(lián)合射頻消融治療原發(fā)性肝癌及術(shù)后復(fù)發(fā)性肝癌的療效比較及預(yù)后因素分析[J]. 中國介入影像與治療學(xué)，2016，13（3）：146-150.

[5]祝朝前，殷軍. 肝動脈化療栓塞術(shù)聯(lián)合重組人p53腺病毒動脈灌注治療肝細胞癌臨床觀察[J]. 山東醫(yī)藥，2017，57（15）：57-59.

[6]Correlation of bone marrow abnormalities，peripheral lymphocyte subsets and clinical features in uncomplicated common variable immunodeficiency（CVID）patients[J]. Clinical Immunology，2016，163（4）：10-13.

[7]苗同國，王立靜，馬立偉，等. 射頻消融治療對原發(fā)性肝癌患者T細胞免疫功能的影響[J]. 中國微創(chuàng)外科雜志，2016，16（6）：538-540.

[8]曹宏霞，黃景香，李藏妥，等. 肝癌患者應(yīng)用微創(chuàng)介入治療對T細胞免疫功能的影響研究[J]. 中國地方病防治雜志，2016，5（1）：66-68.

[9]潘國政，徐教邦，郝龍，等. 射頻消融及肝動脈化療栓塞術(shù)后殺傷細胞回輸對肝癌患者預(yù)后的影響[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志，2016，96（9）：689-692.

[10]Tumor-infiltrating lymphocyte subsets and tertiary lymphoid structures in pulmonary metastases from colorectal cancer：[J]. Clinical & Experimental Metastasis，2016，33（7）：727-739.

[11]王凇，郝艷紅，楊薇，等. 肝癌射頻消融后肝膿腫的發(fā)生率及危險因素分析[J]. 中國介入影像與治療學(xué)，2018，15（1）：37-41.

[12]高楠，牟培源，白媛媛，等. 腹腔鏡超聲與經(jīng)皮超聲引導(dǎo)肝癌射頻消融治療的圍手術(shù)期效果[J]. 中國臨床醫(yī)學(xué)影像雜志，2017，28（4）：291-293.

[13]王冰，賈佳，張紹庚，等. 手術(shù)切除與射頻消融治療符合米蘭標準的原發(fā)性肝癌的療效對比分析[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2016，41（3）：221-226.

[14]張登科，紀建松，涂建飛，等. 射頻消融治療肝癌嚴重并發(fā)癥原因分析及其防治方法探討[J]. 中華放射學(xué)雜志，2016，50（3）：213-216.

[15]陸戰(zhàn)，龔文鋒，張志遠，et al. 殘肝體積/體重比率預(yù)測肝癌合并肝硬化患者術(shù)后肝功能衰竭的研究[J]. 腫瘤防治研究，2018，45（2）：77-81.