核酸探針和PCR技術(shù)在食品檢驗(yàn)中的運(yùn)用

孔秋月

摘 要：隨著科學(xué)技術(shù)的高速發(fā)展，人們對(duì)于食品安全問(wèn)題越來(lái)越關(guān)注。加強(qiáng)對(duì)食品安全質(zhì)量檢測(cè)工作的重視，可以及時(shí)精準(zhǔn)地檢測(cè)在食品中存在的病毒與有害物質(zhì)。基于此，本文主要對(duì)核酸探針和PCR技術(shù)在食品檢驗(yàn)中的運(yùn)用進(jìn)行了簡(jiǎn)單的分析論述。

關(guān)鍵詞：核酸探針;PCR技術(shù);食品檢驗(yàn)

食品安全是保障人們生活品質(zhì)的關(guān)鍵與基礎(chǔ)。通過(guò)科學(xué)的方式重視食品安全質(zhì)量檢查，可以在根本上提升食品檢測(cè)質(zhì)量，保障各項(xiàng)信息數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)性[1]。

1 核酸探針在食品檢驗(yàn)中的運(yùn)用

1.1 核酸探針的概念

核酸探針技術(shù)是一種基于核算分子鏈的特異性進(jìn)行病毒基因識(shí)別的技術(shù)手段。通過(guò)在不同的核酸鏈中，對(duì)兩個(gè)存在互補(bǔ)關(guān)系的堿基序列的有效配對(duì)分析，產(chǎn)生分子雜交鏈。在實(shí)踐中主要通過(guò)同位素標(biāo)記以及生物素標(biāo)記方式探針標(biāo)記堿基序列。

1.2 核酸探針的制備

基因探針通過(guò)直接檢驗(yàn)分析的方式了解位置樣品分析序列，可以確定探針基因以及相關(guān)被檢驗(yàn)的基因信息是否同源。進(jìn)行核酸探針制備過(guò)程中要重視以下兩點(diǎn)。

第一，通過(guò)選擇應(yīng)用的物交叉反應(yīng)中較為顯著的核算片段。第二，確定標(biāo)記物。現(xiàn)階段較為常見(jiàn)的主要就是通過(guò)32p、125I、35S幾種同位素。

1.3 核酸探針在食品檢驗(yàn)中的運(yùn)用

核酸探針根據(jù)不同劃分方式確定其具體的類(lèi)型。在實(shí)踐中要合理地利用核算探針基礎(chǔ)理念。通過(guò)將核算探針進(jìn)行基因檢驗(yàn)有著廣泛的應(yīng)用范圍。在基因工程中利用多數(shù)基因鏈的特異性進(jìn)行分析，可以有效地檢驗(yàn)具體狀況。進(jìn)行基因分析通過(guò)核酸分子鑒定分析其具體的雜交過(guò)程，則可以剔除有害物質(zhì)。

1.3.1 飲用水安全質(zhì)量監(jiān)測(cè)

核酸探針技術(shù)可以應(yīng)用于飲用水的日常監(jiān)測(cè)中，如果不進(jìn)行飲用水的凈化處理直接飲用就會(huì)導(dǎo)致病毒、細(xì)菌以及蠕蟲(chóng)等物質(zhì)進(jìn)入人體內(nèi)，導(dǎo)致人體受到各種安全威脅。重視飲用水安全質(zhì)量監(jiān)測(cè)分析，通過(guò)核酸探針技術(shù)根據(jù)數(shù)據(jù)分析水中微生物的特點(diǎn)，及時(shí)有效地鑒別其存在的有害成分，可以提升檢驗(yàn)質(zhì)量。

1.3.2 水產(chǎn)品安全質(zhì)量監(jiān)測(cè)

隨著人們生活水平的提升，海產(chǎn)品逐漸進(jìn)入人們的日常生活中，海產(chǎn)品具有更高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，食品安全也更有保障。通過(guò)核酸探針技術(shù)進(jìn)行水產(chǎn)品檢驗(yàn)，可以及時(shí)發(fā)發(fā)現(xiàn)對(duì)人體有害的物質(zhì)，在源頭上合理控制。

2 PCR技術(shù)在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

2.1 PCR技術(shù)的概念

PCR技術(shù)屬于基因體外擴(kuò)增技術(shù)。在檢驗(yàn)中利用體外擴(kuò)增特定的雙鏈DNA片段進(jìn)行處理，其有著較為顯著的擴(kuò)增速度。DNA雙鏈在實(shí)踐中進(jìn)行受熱處理就會(huì)變換為兩個(gè)單鏈，通過(guò)加入人工合成，與靶DNA目的序列進(jìn)行兩端的互補(bǔ)，將核苷酸平片段作為引物，根據(jù)規(guī)范要求進(jìn)行變性處理、退火處理、延伸循環(huán)處理的方式則可以達(dá)到大量擴(kuò)增DNA的目的。DNA分子鏈在擴(kuò)增處理中，靶DNA則會(huì)隨著擴(kuò)層處理出現(xiàn)幾何級(jí)數(shù)增加的狀態(tài)。以擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)為基礎(chǔ)增加DNA，酶分子則就會(huì)隨著運(yùn)動(dòng)而被消耗，一次擴(kuò)增處理，其靶DNA就會(huì)擴(kuò)增到近百萬(wàn)倍。

2.2 PCR技術(shù)在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

PCR技術(shù)具有反應(yīng)迅速的優(yōu)勢(shì)，有著較強(qiáng)的特異性，生物靈敏性極高，通過(guò)此種特征進(jìn)行食品檢驗(yàn)可以分析以下幾種病原體。

2.2.1 單核細(xì)胞增多李氏桿菌

此種類(lèi)型的病原體在傳統(tǒng)檢測(cè)中主要通過(guò)分離鑒定技術(shù)檢驗(yàn)。通過(guò)2～4 w進(jìn)行克隆，效率較低。利用PCR技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)則可以提升速率。在檢驗(yàn)中，對(duì)食品李氏桿菌溶液進(jìn)行處理，可以在12 h內(nèi)獲得結(jié)果。此種技術(shù)手段不僅有效地提升了食品檢驗(yàn)的工作效率與質(zhì)量，也可以有效地檢測(cè)出樣本上5～50個(gè)細(xì)菌。

2.2.2 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌腸毒素如果進(jìn)入人體中就會(huì)導(dǎo)致食物中毒等問(wèn)題。金黃色葡萄球菌進(jìn)入人體中會(huì)誘發(fā)中毒體休克綜合癥，通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)，可以在短時(shí)間內(nèi)檢驗(yàn)毒素，具有良好的特異性以及靈敏性性特征，有效地提升了食物內(nèi)部病毒檢驗(yàn)的效率。

在檢驗(yàn)中通過(guò)EMA進(jìn)行金葡萄菌培養(yǎng)物提取模板的設(shè)置，然后將nuc基因作為靶向基因進(jìn)行PCR反應(yīng)，進(jìn)行EMA濃度以及曝光時(shí)間優(yōu)化，在金黃色葡萄球菌為2×106 CFU/mL的時(shí)候發(fā)現(xiàn)其可以抑制殺菌DNA擴(kuò)增。然后可以在含有1%的金黃色葡萄球菌混合懸液中制備的DNA中可擴(kuò)增出目的片段。

2.2.3 沙門(mén)氏菌

沙門(mén)氏菌進(jìn)入人體會(huì)導(dǎo)致腹瀉等癥狀。利用PCR技術(shù)檢驗(yàn)，基于克隆基因特異性序列方式，通過(guò)改良熱解裂的方式提取沙門(mén)氏菌基因組DNA。對(duì)比實(shí)驗(yàn)分析，進(jìn)行敏感性以及所用引物特異性分析，可以快速地檢驗(yàn)標(biāo)記食品中存在的沙門(mén)氏菌，應(yīng)用此種技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)精準(zhǔn)率高達(dá)100%。在實(shí)踐中為了提升檢驗(yàn)結(jié)果，就要根據(jù)規(guī)范要求在實(shí)驗(yàn)條件之下進(jìn)行有效處理，避免因?yàn)槲廴镜纫蛩赜绊憴z驗(yàn)靈敏度。

3 結(jié)語(yǔ)

重視食品安全檢測(cè)分析，可以在根本上保障食品安全性。根據(jù)國(guó)家要求，通過(guò)科學(xué)的方式進(jìn)行食品安全檢測(cè)分析，合理利用核酸探針以及PCR技術(shù)進(jìn)行食品監(jiān)測(cè)分析，可以在源頭上合理的控制，避免不合格的產(chǎn)品進(jìn)入市場(chǎng)中，進(jìn)而構(gòu)建一個(gè)良好的市場(chǎng)環(huán)境。

參考文獻(xiàn)

[1]陳思琦，于瑩.核酸探針和PCR技術(shù)在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)科技投資， 2017（24）.