蜂蜜中有機活性組分檢測的色譜方法研究

賈紅亮 潘妍

摘 要：蜂蜜最主要的組成成分是糖和水的飽和溶液，蜂蜜當(dāng)中糖分的總含量在75%以上，其中蜂蜜總糖中容易被人體吸收的果糖以及葡萄糖的含量占總糖的80%，蜂蜜當(dāng)中含有多種有機活性物質(zhì)和微量元素，具有提高人體免疫力、加快傷口的愈合等重要作用，蜂蜜當(dāng)中營養(yǎng)物質(zhì)和營養(yǎng)成分的多少會直接影響蜂蜜的顏色、香氣、使用口感和營養(yǎng)價值，蜂蜜當(dāng)中的活性營養(yǎng)物質(zhì)蜂蜜營養(yǎng)物質(zhì)的主要構(gòu)成成分，營養(yǎng)物質(zhì)的多少直接影響蜂蜜的營養(yǎng)價值和蜂蜜的抗氧化功能。為了能更好的評價蜂蜜的實際品質(zhì)，本文以色譜法為基礎(chǔ)，分析探討了蜂蜜當(dāng)中黃銅以及有機酸等化合物。

關(guān)鍵詞：蜂蜜：有機活性物質(zhì);色譜分析法;研究檢測

我國作為世界范圍內(nèi)的養(yǎng)蜂大國，也是蜂蜜的主要生產(chǎn)國家，此外還是蜂蜜最大的出口國之一。蜂蜜具有很高的保健效果，蜂蜜當(dāng)中含有多種營養(yǎng)物質(zhì)，深受我國廣大人民群眾的喜愛。蜂蜜是蜜蜂制造出來的一種以植物為基礎(chǔ)的次生代謝產(chǎn)物，蜂蜜的成分非常復(fù)雜，當(dāng)前研究表明，蜂蜜當(dāng)中營養(yǎng)物質(zhì)的成分超過100多種，具有較高的營養(yǎng)價值和藥物價值，能夠有效的提高人體的免疫力，加快傷口的愈合速度。蜂蜜在古希臘和古埃及被當(dāng)中一種藥物，主要用來治療腸胃潰爛以及傷口。蜂蜜不但是當(dāng)前自然界當(dāng)中最復(fù)雜的食物，而且也是古代人類唯一可以使用的一種純天然甜味劑，在食材的制作上也有很廣泛的應(yīng)用范圍。本文就通過色譜分析的方法探討了蜂蜜當(dāng)中有機活性物質(zhì)的組成成分。

1 實驗部分

1.1 實驗的主要儀器與試劑

高效液相色譜儀器（安捷倫科技（中國）有限公司），PROSTAR 303二極管檢測儀器。SAX SPR小柱（安捷倫科技（中國）有限公司），十二管SPE檢測裝置（安捷倫科技（中國）有限公司），離子水發(fā)射器（安捷倫科技（中國）有限公司）。

葡萄糖酸液，甲酸溶液，蘋果酸，乙酸，檸檬酸，丙酸都來自于美國SIGMA公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 標(biāo)準溶液的配比

本次實驗開始之前稱量好葡萄糖酸、甲酸以及蘋果酸、檸檬酸等有機物質(zhì)放置在10 mL的容量瓶當(dāng)中，使用去離子水溶化之后定容，配置得到濃度為50 g/L的儲備溶液。取恰當(dāng)?shù)臉?biāo)準儲備溶液混合之后，加水稀釋到100 mL，放入容量瓶當(dāng)中，其中葡萄糖算以及甲酸的濃度為5 g/L，其中蘋果酸檸檬酸的濃度為2 g/L，馬來酸的濃度為0.05 g/L，放在4 ℃的溫度下儲存。

1.2.2 樣品處理方法

本次實驗開始之前選取事前準備好的蜂蜜樣品，如果蜂蜜樣品當(dāng)中存在結(jié)晶現(xiàn)象，那么必須將蜂蜜放置在60 ℃的水中進行水浴加熱，使其充分溶解完成之后取出7.5 mL放置在溶劑為100 mL的容量瓶當(dāng)中，加入恰當(dāng)?shù)牡入x子水溶解之后。確保蜂蜜樣品完全溶解之后，加入0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)整其pH值為10，然后攪拌15 min之后，再加入濃度為0.1 mol/L的硫酸溶液當(dāng)中調(diào)整pH濃度，讓pH值達到中性（pH=7），最后加入離子水定容之后混合均勻。最后取處蜂蜜樣品溶液10 mL經(jīng)過水相過濾之后，等到蜂蜜樣品完全吸附成之后使用10 mL的去離子水進行沖洗，使用真空泵保障水流的速度為3 mL/min，最后在使用4 mL，濃度為1 mol/L的鹽酸以0.5 mL/min的速度進行沖洗，最后存放在5 mL容量瓶當(dāng)中，通過水相膜之后使用HPLC反相色譜柱分析，使用液相色譜檢測儀檢測之后，使用標(biāo)準工作曲線外標(biāo)法定量。高效液色譜法具有較高的分離度，而且對于蜂蜜成分檢驗的準確性也較高，可以使用不同類型的檢驗器材，對蜂蜜進行成分的檢驗分析，利用色譜圖進行分析和判定，特別是隨著我國計算機技術(shù)的不斷發(fā)展，三維立體的高效液色譜法可以有效幫助蜜蜂成分的鑒定[1]。

2 結(jié)果

蜂蜜當(dāng)中含有大量的有機活性物質(zhì)，具有較為廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，可以充當(dāng)一種天然的抗氧化劑，蜂蜜當(dāng)中含有的類黃酮可以有效的幫助人類預(yù)防心血管疾病，對于預(yù)防癌癥具有非常良好的效果，此外蜂蜜當(dāng)中的類黃酮是可以捕獲活性氧，還原過氧化自由基團，防止其生產(chǎn)自由基。

本次實驗當(dāng)中通過測量發(fā)現(xiàn)，蜂蜜當(dāng)中主要含有水和高度濃縮的糖，其中水的含量為17%，糖分占到蜂蜜干重比例的95%～99%，其中主要包括果糖，占比達到38.2%，葡萄糖占比達到31.3%，蔗糖占比為1%。其余的部分主要是有機酸，占比為0.57%。蜂蜜當(dāng)中的抗氧化物質(zhì)主要是酚類、肽、有機酸等，其中有機酸的含量雖然只有0.57%，但是通過對蜂蜜的檢測發(fā)現(xiàn)蜂蜜當(dāng)中的有機酸種類較多，有天冬氨酸、丁酸、檸檬酸等多種酸類。

3 討論

蜂蜜作為以花蜜和植物為原料的純天然甜味物質(zhì)，古埃及人民將蜂蜜當(dāng)作藥物使用，直到青霉素被大量普及之后才開始慢慢放棄使用蜂蜜進行藥物治療，但是目前，抗生素的大量使用導(dǎo)致很多細菌已經(jīng)進化出了相關(guān)的抗體，蜂蜜在傷口愈合中的作用又得到了恢復(fù)。蜂蜜是蜜蜂生產(chǎn)的一種次生代謝產(chǎn)物，蜂蜜當(dāng)中擁有超過一百多種營養(yǎng)物質(zhì)和營養(yǎng)成分，其中主要包括糖類、酶、氨基酸、有機酸等等多種物質(zhì)，對于人體具有良好的保健貢獻。在綠色生態(tài)重視程度越來越高的今天，蜂蜜已經(jīng)成為人民群眾最喜愛的食物之一，本文就通過色譜法分析了蜂蜜當(dāng)中的主要成分，探究了蜂蜜營養(yǎng)成分的組成，以及各種營養(yǎng)物質(zhì)的功效。

參考文獻

[1]朱曉玲，葉飛，楊杰，等.固相萃取-高效液相色譜法測定蜂蜜中的有機酸[J].色譜，2010，28（10）：945-949.

基金項目：北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院院級課題（編號：XY-YF-13-11）。