生殖器皰疹高危人群兩種血清學檢測方法陽性率的比較

展幫樂 阮建波 朱和玲

摘要：目的? 了解生殖器皰疹（GH）高危人群兩種血清學檢測方法的陽性率。方法? 收集暨南大學附屬東莞醫院2018年1月～5月427例GH高危人群采用酶聯免疫法，2018年7月～11月528例GH高危人群采用化學發光免疫法，比較兩種檢測方法檢測單純皰疹病毒（HSV）IgM陽性結果。結果? 化學發光免疫法檢測的528例GH高危人群中HSV IgM陽性94例，陽性率17.80%，其中1型IgM陽性42例，陽性率7.95%，2型IgM陽性52例，陽性率9.85%;酶聯免疫方法檢測的427例GH高危人群中HSV IgM陽性24例，陽性率5.62%，其中1型IgM陽性12例，陽性率2.81%，2型IgM陽性12例，陽性率2.81%。化學發光免疫法陽性率檢測高于酶聯免疫法，差異有統計學意義（P<0.05）。結論? 化學發光免疫法檢測高危GH人群HSV IgM的陽性率高于酶聯免疫法，且操作簡單，檢測時間周期短。

關鍵詞：生殖器皰疹;單純皰疹病毒;化學發光免疫法;酶聯免疫法

Abstract：Objective? To understand the positive rates of two serological tests for high-risk population of genital herpes（GH）.Methods? Collecting Dongguan Hospital Affiliated to Jinan University from January to May 2018， 427 high-risk population of GH were enrolled in enzyme-linked immunosorbent assay. 528 high-risk population of GH from July to November 2018 were chemiluminescence immunoassay. Two methods were used to detect IgM positive result of herpes simplex virus （HSV）. Results? 528? high-risk population of GH cases were detected by chemiluminescence immunoassay， with 94 cases of HSV IgM， the positive rate was 17.80%， including 42 cases of type I IgM positive， the positive rate was 7.95%; 52 cases of type 2 IgM positive， the positive rate was 9.85%; 427 high-risk population of GH cases were detected by enzyme-linked immunosorbent assay methods， with 24 cases of herpes simplex IgM， the positive rate was 5.62%， including 12 cases of type I IgM positive， the positive rate was 2.81%; 12 cases of type 2 IgM positive， the positive rate was 2.81%. The positive rate of chemiluminescence immunoassay was higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion? The positive rate of herpes simplex virus IgM in high-risk genital herpes is higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the operation is simple and the results are rapid.

Key words：Genital herpes;Herpes simplex virus;Chemiluminescence immunoassay;Enzyme-linked immunosorbent assay

單純皰疹病毒（herpes simplex virus，HSV）在皮膚黏膜的角質形成細胞內復制，并蔓延到周圍的細胞中，感染細胞周圍出現多形核細胞和淋巴細胞浸潤，從而引起表皮局灶性炎癥和壞死，出現原發感染的癥狀。生殖器皰疹（genital herpes，GH）是臨床上常見的一種慢性病程較長而又無法根治的性傳播疾病，超過80%的原發性GH會反復發作，其與免疫功能密切相關，當機體受到創傷、情緒緊張、病毒感染及抵抗力下降時，潛伏病毒易被激活。近40%～60%的早期感染HSV患者無臨床癥狀或癥狀不顯著，隱性患者及無癥狀者是該病的主要傳染源，及時發現并且采取措施是預防該病傳播和及時治療的關鍵環節[1]。臨床上常采用血清學檢測進行診斷或篩查。目前國內有多種HSV抗體檢測試劑盒，暨南大學附屬東莞醫院2018年1～5月采用酶聯免疫法檢測，7～11月改用化學發光免疫法檢測，現將兩種檢測方法結果進行統計分析，結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2018年1月～5月、7月～11月暨南大學附屬東莞醫院門診GH高危人群（近1個月有不潔性交史;父母有外GH感染史，患兒外生殖器有皮損）955例為研究對象，其中1月～5月427例，7月～11月528例，年齡9個月～71歲，平均年齡（33.85±9.93）歲。2018年5月之前，該院檢驗科一直采用酶聯免疫法檢測HSV，2018年7月之后改用化學發光免疫法檢測。

1.2儀器與試劑? 采用的檢測儀器為深圳愛康URANUSAE120全自動酶免儀，HSV IgM檢測采用愛爾蘭Trinity公司HSV-1 IgM、HSV-2 IgM檢測試劑盒;化學發光免疫法檢測儀器為深圳亞輝龍生物科技iFlash 3000化學發光測定儀及配套HSV IgM檢測試劑盒。

1.3方法

1.3.1標本采集? 采集研究對象空腹靜脈血3～5 ml，3000 r/min，離心10 min，分離后血清樣本放于2～8℃環境下貯存，在48 h內檢測。

1.3.2 HSV抗體測定? 實驗操作完全按試劑說明書和儀器操作規程進行。酶聯免疫法檢測時間2 h，化學發光免疫法40 min。

1.4觀察指標? 比較兩種方法檢測HSV-1 IgM、HSV-2 IgM、HSV IgM的陽性率。化學發光免疫法HSV-1 IgM或HSV-2 IgM值>0.9 COI為陽性。

1.5統計學處理? 采用SPSS 19.0統計軟件進行數據分析，計數資料采用（n，%）表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

化學發光免疫法檢測HSV-1 IgM、HSV-2 IgM、HSV IgM的陽性率均高于酶聯免疫方法，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

3討論

GH是一種慢性、反復發作、病程較長而又無法根治的生殖器部位病毒感染疾病，其復發與患者的免疫功能有關[1，2]。引起GH的HSV包括HSV-1和HSV-2兩種血清型。HSV-1主要感染眼、口、唇等腰以上的皮膚和黏膜以及中樞神經系統，偶見于外生殖器;HSV-2主要引起生殖器和腰以下的皮膚、黏膜以及新生兒感染，并與女性外陰癌和宮頸癌的發生相關。HSV感染若發生在懷孕和分娩過程中，可能會造成胎兒多器官系統性感染和皰疹腦炎，繼而導致流產、早產、死胎、畸形等[3]。

臨床大多數GH患者癥狀不典型，需要通過實驗室檢測確診，并根據病毒學或血清學檢測結果為性傳播疾病患者或高危患者制定治療方案。病毒學檢測包括細胞學、抗原檢測和細胞培養。細胞涂片敏感性和特異性均低，PCR抗原檢測敏感性高但收費高，細胞培養特異性強但敏感性低，由于感染患者排毒為間歇性[4]，培養或PCR檢測陰性并不一定代表不再存在感染，故臨床上不做首選。2017年版中華人民共和國衛生行業標準正式將血清抗體檢測納入GH診斷標準。IgM是初次體液免疫應答中最早出現的抗體，感染HSV后3～5 d可在血清中檢測到特異性IgM抗體，它是HSV初次感染的確診標志。血清樣本中，IgM陽性提示近期感染，對于防止性伴侶間和母嬰間HSV傳播有著重要意義[3]。

酶聯免疫法和化學發光免疫法是臨床常用的抗體免疫學檢測技術。酶聯免疫法是一種結合抗原抗體反應的特異性和酶高效催化反應的專一性的免疫技術;化學發光免疫法包括化學反應系統和免疫反應系統，即在抗原-抗體特異性反應過程中，伴隨化學反應過程而產生光的反射現象。化學發光系統是利用在化學反應中釋放大量自由能產生激發態中間體，當其回到穩定的基態時，同時也發射出光子，利用發光信號測量儀對所發出的光量子進行定量測定。酶聯免疫法價格較化學發光免疫法低，但多為定性結果，時間需2 h，且廠家不同，其試劑靈敏度也不同。化學發光免疫法試劑與儀器配套，避免因不同廠家試劑操作不同和靈敏度差異產生誤差，精確度高，不僅能定性分析，還可定量分析，檢測時間周期短，僅40 min。

本次研究兩種檢測來自不同人群，但樣本均來自同一醫院，收集時間超過5個月，且樣本數量足夠，對兩種檢測結果統計分析影響較小。本研究結果顯示：化學發光免疫法HSV-1 IgM陽性檢測率（7.95%）、HSV-2 IgM陽性檢測率（9.84%）和總HSV IgM陽性檢測率（17.80%），與何衛東等[5]報道的結果相近;且高于酶聯免疫法HSV-1 IgM陽性檢測率（2.81%）、HSV-2 IgM陽性檢測率（2.81%）和總HSV IgM陽性檢測率（5.62%），差異具有統計學意義（P<0.05）。

綜上所述，GH高危人群HSV血清學檢測化學發光免疫法陽性率高于酶聯免疫法，且操作簡單，檢測時間周期短。

參考文獻：

[1]樊建勇，趙陽，楊慧蘭.單純皰疹病毒的生物學特點及其潛伏復發機制研究進展[J].皮膚性病診療學雜志，2015，22（1）：82-85.

[2]鐘道清，周天恩.肥大細胞在HSV-2感染所致生殖器皰疹中的作用[J].皮膚性病診療學雜志，2018，25（3）：128-131.

[3]柯吳堅，楊斌.2015年美國CDC生殖器皰疹治療指南解讀[J].中國皮膚性病學雜志，2016，30（5）：530-533.

[4]鄒先彪.《2014英國生殖器皰疹指南》解讀[J].中國臨床醫生雜志，2016，44（1）：14-15.

[5]何衛東，劉明春，陳秋月，等.化學發光法檢測育齡婦女單純皰疹病毒結果分析[J].中國衛生標準管理，2018，9（16）：117-119.

收稿日期：2019-3-26;修回日期：2019-4-18

編輯/楊倩