復方痔瘺洗劑質量標準制定

王新華　段方紅

【摘? 要】目的：建立較為完善的復方痔瘺洗劑的質量標準。方法：采用化學方法鑒別復方痔瘺洗劑中芒硝的化學成份，采用薄層色譜法鑒別復方痔瘺洗劑中當歸、防風有效成份，采用高效液相色譜法測定防風中的有效成份5-0-甲基維斯阿米醇苷含量。結果：化學鑒別專屬性強、靈敏度高，薄層色譜顯色清晰，高效液相色譜法精密度、重復性符合要求。結論：該方法檢測結果準確可靠，簡便易于操作，可用于復方痔瘺洗劑的質量控制。

【關鍵詞】復方痔瘺洗劑;薄層色譜;高效液相色譜;質量標準

【中圖分類號】R726.12????? 【文獻標識碼】B????? 【文章編號】1004-7484（2020）09-0267-01

復方痔瘺洗劑為本院臨床使用多年的協定處方制劑，是一種主要治療痔瘡的外用洗液。該方由魚腥草、芒硝、當歸、防風、花椒、馬齒莧、白礬、側柏葉等組成，具有清熱散結，活血止血，消腫止痛的作用，用于治療痔瘡等療效明顯，副作用少。該制劑質量控制目前僅參照《中國藥典》（2015版）制劑通則洗劑項下，進行制劑成品的PH值、裝量和微生物限度等項目檢查。為制定較為完善的制劑質量標準，更好地控制制劑質量，現增加了該制劑中芒硝的化學成份鑒別^[1]，以及當歸和防風的薄層色譜法（TLC）鑒別^[1]，采用高效液相色譜法（HPLC）測定防風中的有效成份5-0-甲基維斯阿米醇苷含量^[2]。報道如下：

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津LC-20A高效液相色譜儀（日本島津）;SPD-10AVP檢測站（日本島津）;LC-solusion色譜工作站;KB-500DB型數控超聲波清洗器;FW80，METTLERAE240型分析天平

1.2 試藥 復方痔瘺洗劑（編號151023，本院提供）;當歸對照藥材（批號：120927-201516）;

防風對照藥材（批號：120947-201409）;5-0-甲基維斯阿米醇苷對照品（批號：111523-201509）

以上對照均來自中國食品藥品檢定研究院;甲醇（色譜純），純化水（自制），其他試劑（分析純）。

2 方法與結果

2.1 鑒別

2.1.1 處方中芒硝的鑒別 取本品1ml至10ml刻度試管中，加水稀釋至刻度，搖勻，照一般鑒別試驗^[1]項下鈉鹽與硫酸鹽的鑒別反應試驗。鈉鹽鑒別試驗為取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即現鮮黃色。硫酸鹽鑒別試驗為取供試品3ml，滴加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀;分離，沉淀在氫氧化鈉試液中溶解。

2.1.2 處方中當歸的TLC鑒別

供試品溶液的制備：取本品20ml，用乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，揮至1ml，作為供試品溶液。

對照品溶液的制備：取當歸對照藥材0.5g，加乙醚20ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚1ml使溶解，作為對照藥材溶液。

陰性樣品溶液的制備：取處方中藥材，除去當歸，按本制劑制備工藝制備不含當歸的陰性樣品，同上述方法制成陰性樣品溶液。

方法：照薄層色譜法^[1]試驗，吸取供試品溶液、陰性樣品溶液20μl、對照藥材溶液10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，而陰性樣品在相應的位置處沒有熒光斑點。樣品斑點清晰，分離效果好，3批樣品檢測重現性好。試驗結果見圖1。

2.1.3處方中防風的TLC鑒別

供試品溶液的制備：取本品20ml，加乙醚振搖提取2次，每次20ml ，棄去乙醚液。水液加水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml， 合并正丁醇液，加入氨試液40ml，搖勻，放置使分層，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。

對照藥材溶液的制備：取防風對照藥材1g，加水50ml，煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，同法制成對照藥材溶液。

對照品溶液的制備：取5-0-甲基維斯阿米醇苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。

陰性樣品溶液的制備：取處方中藥材，除去防風，按本制劑制備工藝制備不含防風的陰性樣品，同上述方法制成陰性樣品溶液。

方法：照薄層色譜法^[1]試驗，吸取上述四種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。而陰性樣品在相應的位置處沒有熒光斑點。樣品斑點清晰，分離效果好，3批樣品檢測重現性好。試驗結果見圖2。

2.2 檢查 按照制劑通則洗劑項下有關的各項規定檢查^[1]。

2.3 含量測定

2.3.1 對照品溶液制備^[2] 精密稱取5一O一甲基維斯阿米醇苷對照品適量，用甲醇稀釋，制成1ml含5一O一甲基維斯阿米醇苷12.81ug溶液備用。

2.3.2 供試品溶液的制備^[2] 取復方痔瘺洗劑，用0.45um微孔濾膜過濾，精密量取濾液50mL置蒸發皿水浴濃縮至5ml左右，移至量50mL瓶中，加甲醇定容至刻度。

2.3.3 樣品測定 分別取對照品溶液以及按“2.3.2”項下制成的三批樣品溶液，依法^[1]測定，計算含量即得。

3 討論

關于定量分析指標成份的確定。對防風中有效成份研究，國內文獻報道^[3-5]較多，大多采用高效液相色譜法對其中的有效成份進行定量分析。鑒于其有效成份中5一O一甲基維斯阿米醇苷為該中藥發揮藥效作用的主要化學成份^[6]，同時也為了便于定量分析，防止其他成分干擾^[7]，本文選擇其中的有效成份之一5一O一甲基維斯阿米醇苷作為復方痔瘺洗劑定量分析的指標。

參考文獻

[1]《中國藥典》2015年版4部，中國醫藥科技出版社[M].

[2]田曉東，俞桂新，藍悠，李暉.HPLC測定消痔坐浴劑中5一O一甲基維斯阿米醇苷的含量[J].《江西中醫藥》，2013， 44 （5）：54-56

[3]張特立，于春月，魏興波，單靜思，劉肖瑩.防風有效成分的提取工藝研究[J].《黑龍江醫藥科學》，2012，35（3）：26-27

[4]姜艷艷，劉斌，石任兵.高效液相色譜法測定防風色原酮部位中4種成分含量[J].北京中醫藥大學學報，2006，29（2）：128.

[5]胡紫艷，馮振斌，蔣健.HPLC測定不同產地防風中4種有效成分的含量[J].《中國執業藥師》，2016，13（11）：32

[6]嚴葉霞.反相高效液相色譜法測定防風通圣丸中5-0一甲基維斯阿米醇苷的含量[J].《中南藥學》，2012，10（2）：102

[7]張銳，彭楊銳.HPLC法測定防芷鼻炎膠囊中5-0一甲基維斯阿米醇苷[J].《中草藥》2007，38（9）：1343

作者簡介：

王新華（1965-），男，山東長清，本科，副主任藥師，研究方向：主要從事藥事管理工作。