膠體金法在檢測腸道病毒71型IgM和柯薩奇病毒A16型IgM中的應用

韋冬明，羅園生，彭心華

吉安市婦幼保健院檢驗科 (江西吉安 343000)

手足口病是由于腸道病毒感染導致的常見傳染性疾病，可致病的腸道病毒種類有20多種，主要是由被污染過的食物通過口腔進入到消化道，并進行大量增殖，多發于嬰幼兒，表現為口痛、厭食、低熱、手足口多部位出現小皰疹或潰瘍等。雖然多數患兒在患病后可以自行康復，但也有小部分患兒出現心肌炎、肺水腫和無菌性腦膜炎等并發癥，嚴重甚至死亡。腸道病毒71型IgM(EV71-IgM)和柯薩奇病毒A16型IgM(CA16-IgM)是引起手足口病最為常見的兩種病毒，多存在于感染急性期。對這兩個指標的檢測有利于對手足口病的及時診斷和有效治療。研究表明，膠體金法和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法對EV71和CA16的檢測均較為有效，但哪種方法效果更好尚無定論[1]。本研究旨在探討膠體金法在檢測EV71-IgM和CA16-IgM中的應用價值。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2017-2018年收治的400例手足口病患兒作為研究對象，男253例，女147例；年齡7個月至6歲，平均(4.49±2.46)歲；發病時間均在48 h內。患兒均符合衛生部發布的《手足口病診療指南(2010年版)》[2]的相關診斷標準；排除合并其他嚴重疾病的患兒。

1.2 方法

采集患兒的靜脈血2 ml，放在含有分離膠的促凝管中進行離心操作，分離血清進行膠體金法檢測，然后存放在4 ℃的冰箱中，在第2天進行ELISA法檢測。

檢測試劑及儀器：膠體金法采用北京萬泰生物藥業有限公司生產的抗EV71-IgM抗體檢測板、抗CA16-IgM抗體檢測板；ELISA法采用北京萬泰生物藥業有限公司生產的抗EV71-IgM抗體試劑、抗CA16-IgM抗體試劑；采用北京拓普DEM-3型洗扳機和鄭州安圖PHOMO型酶標儀，有關試劑購自北京貝爾生物公司。

檢測方法：標本在檢測器中即分離出血清，膠體金法嚴格按照實際說明書進行操作，在規定的時間內進行目測判讀，不管色帶顏色的深淺，均視為陽性記錄；ELISA法嚴格按照試劑說明書操作，在450 nm的主波長和630 nm的次波長下測定吸光度(A)值，以0.1+A陰性對照均值為Cut off值，A陰性對照<0.05按照0.05計算。

1.3 臨床評價

以最終確診結果為參照，比較膠體金法與ELISA法對于CA16-IgM抗體、EV71-IgM抗體的檢測結果和符合率。

1.4 統計學處理

采用SPSS 19.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種方法對于CA16-IgM抗體的檢測結果和符合率比較

膠體金法檢出CA16-IgM抗體的符合率低于ELISA法，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩種方法對于CA16-IgM的抗體的檢測結果和符合率比較[例(%)]

2.2 兩種方法對于EV71-IgM抗體的檢測結果和符合率比較

膠體金法檢出EV71-IgM抗體的符合率低于ELISA法，但差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩種方法對于EV71-IgM抗體的檢測結果和符合率比較[例(%)]

3 討論

手足口病是由多種腸道病毒引起的臨床上的常見疾病，好發于嬰幼兒，嚴重時可導致死亡。此病最早在1957年由新西蘭初次報道，并于1958年成功分離了柯薩奇病毒，在1959年首次提出將此種疾病命名為“手足口病”。其一直都是社會的關注點，并已被列入全球性傳染病，在世界絕大部分區域均有對此類疾病的報道。臨床研究表明，人類是腸道病毒唯一的傳染源，主要經過消化道和呼吸道進行傳播，甚至接觸患兒皮膚水泡液體都能被感染，需要引起家長的注意[3-4]。在患病初期，患兒喉嚨部位和糞便中均可以發現病毒，可以進行傳染，因此，一旦患兒疑似感染手足口病必須立即就醫，及時診斷和治療。由于在人群中較易出現密切接觸，患兒的飛沫皰疹液、糞便中的病毒以及被病毒所污染后的水源若經口感染，均會導致手足口病的廣泛性流行，即使治愈后也不能終身免疫。因此，早期診斷及鑒別引起手足口病的病毒十分必要。

EV71-IgM和CA16-IgM是引起手足口病最為常見的兩種病毒，臨床上通過對這兩種病毒的檢測基本可以確診，常用的檢測方法包括膠體金法和ELISA法兩種[5]。本研究進一步探究了這兩種方法對于手足口病EV71-IgM抗體、CA16-IgM抗體檢測的效果，結果顯示，膠體金法檢出CA16-IgM、EV71-IgM抗體的符合率低于ELISA法，但差異無統計學意義(P>0.05)，提示，膠體金法對兩種病毒的檢測靈敏度較好。膠體金法檢測CA16-IgM抗體、EV71-IgM抗體，操作簡便，快速及時，檢測范圍廣，利于早期發現，對于操作技術人員的要求也不高，在縣級醫院、基層醫院的推廣性較強。但需指出，利用膠體金法進行檢測時可能出現假陽性較高的情況，使臨床對患兒產生過度醫療，同時在臨床上若患兒手足口病癥狀明顯，但膠體金法檢測呈陰性時，仍然需結合臨床癥狀進行進一步的檢測，以確保患兒可以得到有效的救治，以免漏診。值得一提的是，本研究也存在一定的不足之處，如未邀請其他的醫療機構開展協同性的研究，可能對結果產生一定的偏倚，今后可嘗試邀請其他醫療機構共同進行課題研究，從而獲得更具代表性的研究結論[6]。

綜上所述，膠體金法檢測CA16-IgM抗體、EV71-IgM抗體的符合率與ELISA法相近，可為臨床患兒提供早期診斷的依據。