湯國寧 殷紅蓮 韋啟飛
653100玉溪市中醫醫院檢驗科,云南玉溪
布魯菌病(Brucellosis,簡稱布病)是由布魯菌感染引起的一種人畜共患疾病,患病的羊、牛等疫畜是布病主要傳染源,布魯菌可以通過破損的皮膚黏膜、消化道和呼吸道等途徑傳播。臨床特點為長期發熱、多汗、關節痛、睪丸炎、肝脾腫大等。近幾年由于養殖業發展迅猛,全國發病率呈上升趨勢[1],雖然玉溪地區屬布魯菌病的非流行區域,但從2009年以來仍出現散發病例。為提高臨床醫生和實驗室人員對布魯菌病的認識,熟悉此病的特點和早期診斷,現結合本院2009年5月-2016年5月確診的11例布魯菌病患者臨床資料進行回顧性分析。
2009年5月-2016年5月收治布魯菌病患者11例,男10例,女1例,年齡14~72歲,平均(46.09±4.76)歲;其中學生2例,農民9例。按照中華人民共和國衛生行業標準WS269-2008《布魯菌病診斷標準》進行診斷。
實驗室檢查:①血培養:無菌操作抽取靜脈血20 mL分別注入需氧和厭氧血培養瓶中,置于BacT/Alert3D血培養儀中培養;采用Vitek 2 Compact微生物鑒定儀及配套GN鑒定卡進行菌種鑒定,上述儀器及試劑均由法國生物梅里埃公司提供。②培養鑒定布魯菌要點:血培養生長緩慢,一般需3 d左右,需氧瓶報警(圖1);血培養儀陽性報警后,取培養瓶中的血液轉種到麥康凱平皿,72 h后可形成灰白色、圓形、邊緣整齊、細小不溶血的菌落(圖2);細菌涂片革蘭染色,細菌形態為沙灘細沙樣排列的革蘭陰性短小球桿菌(圖3),柯氏染色布魯菌被染成紅色,其他桿菌被染成藍色;生化反應不典型,觸酶陽性,氧化酶陽性,快速(15 min)尿素酶陽性可高度懷疑布魯菌,布魯菌血清學凝集實驗有助于診斷。

圖1 布魯菌生長曲線

圖2 布魯菌血平皿生長菌落

圖3 布魯菌革蘭染色形態
一般情況:11例患者資料均上報玉溪市預防疾病中心,全部患者結果已經得到玉溪市預防疾病中心確認。
流行病學史:11例患者均居住農村,均養殖家犬家畜,有密切豬、牛、羊動物接觸史,病史10 d~4個月。
布魯菌病發病情況:病例主要集中在玉溪市紅塔區5例、江川區1例、華寧縣2例、通海縣1例和澄江縣1例,其中紅塔區病例占比較大(45.45%)。患者初診為腰椎間盤突出及關節痛伴發熱待查7例,高血壓2例,糖尿病1例,呼吸道感染1例。分別收治骨傷科3例,針灸科3例,心內科2例,糖尿病科1例,肺病科1例,民族民間醫藥科1例,最終均根據血培養結果診斷為布魯菌病。
實驗室檢查:血培養陽性報警時間為2~5 d,平均3.2 d。僅需氧瓶報警,血培養陽性生長曲線具有一定特點,48 h左右可出現較短的生長期且很緩慢,生長期對應的縱軸較短,穩定平緩。
全面詢問病史是診斷布魯菌病的重要途徑,非疫區醫務人員應提高對布魯菌的認識,應詳細詢問病史、高度重視患者從事的職業。本院確診的11例布魯菌病患者均家住農村,成人感染居多,男性明顯多于女性,可能為成人接觸家禽概率較高所致,且男性多為主要勞動力,從事喂養家犬家畜,撿拾牛、羊、豬糞等勞動,接觸家畜機會更大,而男性衛生習慣和防病意識不如女性,密切接觸家犬家畜或其排泄物等均是感染布魯菌病的高危因素,從而造成了較高的感染率。從布魯菌病發病區域分析,11例病例中紅塔區占比最大為45.45%,原因可能與紅塔區人員交流頻繁,餐飲業、畜牧業和旅游發達有關。
臨床診斷布魯菌病主要根據患者病史、接觸史、臨床體征等流行病學特征及微生物培養結果、血清免疫學實驗[2],在掌握流行病學特征的同時,對發熱患者應重視血培養,實驗室人員應熟練掌握布魯菌血培養特點,對臨床早期診斷至關重要。血培養具有一定特點,表現為報陽時間為2~5 d,平均3.2 d,僅需氧瓶報警,報陽生長曲線可在48 h左右出現較短的生長期且很緩慢,生長期對應的縱軸較短,穩定期短,與郭素芳報道的布魯菌生長曲線及報陽時間一致[3]。細菌涂片革蘭染色,細菌形態為細沙樣排列的革蘭陰性短小球桿菌,柯氏染色布魯菌被染成紅色,快速尿酶實驗陽性時,微生物實驗室人員應高度懷疑布魯菌。同時,實驗室應加強與臨床溝通,獲取更多臨床信息,以利于實驗室診斷。當實驗室得到有價值結果時應及時回饋臨床協助診斷。
布魯菌可經消化道、皮膚黏膜、呼吸道等途徑侵入人體而引起感染和發病,臨床癥狀主要表現為反復不規則發熱、盜汗、乏力、關節痛等[4]。患者初診時多表現為腰椎間盤突出及關節痛伴發熱待查、呼吸道感染等,所以分別收治骨傷科、針灸科等不同科室,故本病臨床表現復雜多變,癥狀各異,輕重不一,呈多器官病變或局限某一局部,涉及多個臨床科室,給臨床診治帶來一定困難。部分患者臨床癥狀與普通感冒相似,易引起臨床誤診,也易被人們忽視,使該病未能得到及時診治。本次研究中3例患者因首發病住院未及時行血培養導致誤診誤治,第二次發病住院行血培養才得以確診。
此外,布魯菌侵襲力較強,可以通過黏膜、完整皮膚、呼吸道和消化道感染人類,氣溶膠是實驗室獲得性感染的主要途徑,國內外文獻已有實驗室爆發感染報道[5],所以微生物實驗室人員一定要熟練掌握布魯菌血培養特點,做好自身安全防護工作,正確使用生物安全柜,規避感染風險。