斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對陜北白絨山羊小腸形態(tài)發(fā)育和消化酶活性的影響

曲星梅，薛復(fù)來，黃曉瑜，張宇，邢曉楠，張恩平

斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對陜北白絨山羊小腸形態(tài)發(fā)育和消化酶活性的影響

曲星梅1，薛復(fù)來2，黃曉瑜1，張宇1，邢曉楠1，張恩平1

（1西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院，陜西楊凌 712100；2山東諸城市畜牧獸醫(yī)管理局，山東諸城 262200）

【】研究斷奶日齡和飼喂不同營養(yǎng)水平的日糧對6月齡陜北白絨羔羊小腸形態(tài)發(fā)育和小腸道主要消化酶活性的影響。間接闡明陜北白絨山羊最佳斷奶日齡和飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，為兩年三胎體系中羔羊早期斷奶和日糧配制提供一定的技術(shù)參數(shù)和理論依據(jù)。選取54日齡左右健康、體重相近（（10.73±1.03）kg）的陜北白絨山羊羔羊54只，隨機(jī)分為6組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)3只羊。試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組羔羊分別于90、75、60日齡斷奶，斷奶后飼喂標(biāo)準(zhǔn)日糧；試驗Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組羔羊均于60日齡斷奶，斷奶后分別飼喂消化能和粗蛋白水平為標(biāo)準(zhǔn)日糧85%、115%、130%的試驗日糧。試驗羊飼喂至6月齡，試驗期間測定羔羊體重和采食量。試驗結(jié)束后，從每個重復(fù)中隨機(jī)挑選1只羊進(jìn)行屠宰（屠宰前未禁食），分別采集十二指腸中上部、空腸中段、回腸末端組織樣品2 cm2，制成石蠟切片觀察小腸形態(tài)；采集小腸各段食糜用于測定其胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、麥芽糖酶、蔗糖酶和α-淀粉酶的活性。（1）斷奶日齡影響4—6月齡羔羊生長，Ⅲ組羔羊平均日增重顯著高于Ⅰ組（＜0.05）。（2）斷奶日齡影響6月齡羔羊小腸的組織形態(tài)，十二指腸的肌層厚度和空腸絨毛表面積Ⅲ組顯著高于Ⅰ和Ⅱ組（＜0.05）；十二指腸絨毛寬度、回腸絨毛寬度Ⅱ、Ⅲ組顯著高于Ⅰ組（＜0.05）。（3）斷奶日齡影響小腸內(nèi)消化酶的活性，十二指腸和回腸中脂肪酶活、空腸和回腸中的糜蛋白酶活性Ⅲ組顯著高于Ⅰ和Ⅱ組（＜0.05）。（4）日糧營養(yǎng)水平影響小腸組織形態(tài)，十二指腸的絨毛高度、絨毛寬度、肌層厚度、絨毛表面積和空腸的絨毛高度、肌層厚度以及回腸的絨毛高度、V/C等指標(biāo)Ⅴ和Ⅵ組顯著高于Ⅲ組和Ⅳ組（＜0.01）。（5）日糧營養(yǎng)水平影響小腸內(nèi)消化酶的活性，十二指腸中糜蛋白酶活、胰蛋白酶活性V組和VI組顯著高于Ⅲ組和Ⅳ組（＜0.05）。空腸中糜蛋白酶活和回腸中胰蛋白酶活V組顯著高于其他3組（＜0.05）。本試驗條件下，就陜北白絨山羊生長性能、小腸形態(tài)發(fā)育以及主要消化酶活性等指標(biāo)而言，60日齡斷奶最佳；4—6月齡斷奶羔羊日糧消化能和蛋白水平按現(xiàn)行飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的1.15倍設(shè)置為宜。

陜北白絨山羊；營養(yǎng)水平；斷奶日齡；小腸形態(tài)；消化酶活性

0 引言

【研究意義】日糧營養(yǎng)物質(zhì)在動物體內(nèi)的消化吸收主要依賴小腸完整的結(jié)構(gòu)和腸道內(nèi)各種消化酶的作用。消化酶的活性受日糧和腸道內(nèi)環(huán)境因素調(diào)控[1]，而腸道內(nèi)環(huán)境跟斷奶日齡息息相關(guān)。近年來，有關(guān)陜北白絨山羊羔羊早期斷奶的研究報道較多，但最佳斷奶日齡的研究結(jié)果不盡一致。【前人研究進(jìn)展】Dunsford[2]等指出，降低日糧蛋白水平可能會引起日糧抗原水平降低，從而改善小腸結(jié)構(gòu)；李輝[3]研究表明當(dāng)過多蛋白質(zhì)在犢牛小腸內(nèi)發(fā)酵時，會導(dǎo)致小腸絨毛縮短和隱窩深度加深；郭江鵬[4]等研究指出可對羔羊?qū)嵤?8日齡斷奶，且羔羊小腸內(nèi)主要消化酶活性恢復(fù)能力不遜于42日齡斷奶羔羊；張宏福[5]等研究表明，早期斷奶會對機(jī)體內(nèi)的消化酶活性產(chǎn)生阻礙作用，阻礙程度和開始恢復(fù)所需的時間、恢復(fù)的程度與斷奶日齡有關(guān)。孟慶蕊[6]指出陜北白絨山羊60日齡左右可以實現(xiàn)普遍斷奶。當(dāng)滿足斷奶羔羊體重為12 kg以上或者體重達(dá)到初生重4倍時，即可實行45日齡斷奶。隨著消化器官功能的不斷完善，羔羊可逐步適應(yīng)植物性日糧，提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率。【本研究切入點(diǎn)】隨著舍飼養(yǎng)殖的進(jìn)行，養(yǎng)殖成本相應(yīng)增加，“兩年三胎”密集繁殖體系比較適宜陜北白絨山羊的養(yǎng)殖。本研究設(shè)置不同斷奶日齡與不同日糧營養(yǎng)水平進(jìn)行飼養(yǎng)試驗，進(jìn)一步探究斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對斷奶羔羊小腸消化道發(fā)育和主要消化酶的影響，【擬解決的關(guān)鍵問題】為確定陜北白絨山羊羔羊適宜早期斷奶日齡和高效舍飼養(yǎng)殖提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計和飼養(yǎng)管理

試驗于2017年7—11月在陜西省榆林市橫山縣狄青塬陜北白絨山羊原種場進(jìn)行。選取健康、日齡（（54±1.60）d）、體重（（10.73±1.03）kg）相近的陜北白絨山羊雌性羔羊54只，隨機(jī)分為6個處理組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)3只羊。試驗I、II、III組羔羊分別于90、75、60日齡斷奶，斷奶后飼喂標(biāo)準(zhǔn)日糧（參考NY/T816—2004肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和NRC飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)水平配制，營養(yǎng)水平100%）；試驗IV、V、VI組羔羊統(tǒng)一于60日齡斷奶，分別飼喂消化能和粗蛋白水平為標(biāo)準(zhǔn)日糧的85%、115%、130%的試驗日糧。斷奶前各組羔羊從20日齡開始用對應(yīng)營養(yǎng)水平的顆粒飼料進(jìn)行補(bǔ)飼。試驗期為羔羊54—180日齡，其中預(yù)試期7 d，羔羊60日齡開始正式試驗，試驗羊初始體重各組間差異不顯著（＞0.05）。每天8：00和17：00投料飼喂，自由采食，自由飲水。每日準(zhǔn)確記錄投料量和剩料量，每30 d稱量一次試驗羊體重。

1.2 試驗日糧

參考NY/T816-2004肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和NRC肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)增重目標(biāo)分階段設(shè)計配方配制標(biāo)準(zhǔn)日糧：第一階段為2—4月齡，按體重10—19 kg，日增重150 g育肥羔羊營養(yǎng)需要配制；第二階段為4—6月齡，按體重15—27 kg，日增重200 g育肥羔羊營養(yǎng)需要配制。按標(biāo)準(zhǔn)日糧消化能和粗蛋白水平的85%、115%和130%配制3種試驗日糧。各組日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1)預(yù)混料為每千克日糧提供：VA 1 000 IU，VD 200 IU，VE 20 IU，F(xiàn)e 40 mg，Zn 30 mg，Cu 15 mg，I 2 mg，Mn 40 mg。2)除消化能為計算值外，其他營養(yǎng)成分含量均為實測值

1)The premix provided the following staff for per kg diet: VA 1 000 IU,VD 200 IU,VE 20 IU, Fe 40 mg, Zn 30 mg, Cu 15 mg, I 2 mg, and Mn 40 mg.2)All nutrients content data were measured values except DE were calculated value

1.3 樣品采集

試驗期結(jié)束后，各組每個重復(fù)隨機(jī)挑選1只試驗羊進(jìn)行屠宰（屠宰前未禁食），采取頸動脈放血致死，按文獻(xiàn)[7]提供的方法分別結(jié)扎并采集十二指腸中上部、空腸中段、回腸末端組織樣品2 cm2，并用PBS緩沖液沖洗干凈，濾紙吸干，分別放入加有4%多聚甲醛的離心管中，4℃保存，用于觀察小腸的形態(tài)；另外分別取十二指腸、空腸、回腸各段內(nèi)容物(約10 g)用四層紗布過濾，于10 mL離心管中，立即放入液氮中，之后于-80℃冰箱中凍存，用于測定酶活。

1.4 測定指標(biāo)和方法

1.4.1 小腸組織形態(tài)的測定 用蒸餾水將固定于4%多聚甲醛液中的小腸組織樣品沖洗干凈，將其分別置于10%、20%、30%、50%、70%、85%、95%和100%的無水乙醇中進(jìn)行脫水處理，然后再依次置于25%、50%、75%、100%的二甲苯溶液中透明，之后進(jìn)行石蠟包埋處理，用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片，厚度為6 μm。從每個組織樣中選取4片，用蘇木精／伊紅染色法（H&E）進(jìn)行染色[8]，制成石蠟組織切片，在 4×10倍顯微鏡（E400，日本尼康）和Image-Pro Plus 6.0軟件下觀測小腸組織切片的絨毛高度及寬度（絨毛表面積=絨毛高度×絨毛寬度）、隱窩深度、肌層厚度。對每個樣本觀察3個非連續(xù)切片，每張切片選擇3個視野，針對每個視野分別測定8組數(shù)據(jù)，其平均值作為1個測定數(shù)據(jù)。

1.4.2 小腸主要消化酶測定 淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、蔗糖酶和麥芽糖酶活性測定依照文獻(xiàn)[9]，脂肪酶活性測定參照文獻(xiàn)[10]。

1.5 統(tǒng)計與分析

數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，用Excel 2003記錄整理，采用SPSS18.00統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），LSD法進(jìn)行多重比較。統(tǒng)計分析以＜0.05為差異顯著，＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對陜北白絨山羊斷奶羔羊生長性能的影響

斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對陜北白絨山羊斷奶羔羊生長性能的影響見表2。就斷奶日齡影響而言，羔羊4—6月齡階段，Ⅲ組平均日增重和干物質(zhì)采食量顯著高于I組（＜0.01），與II組差異不顯著（＞0.05）。就日糧營養(yǎng)水平影響而言，羔羊4—6月齡階段，V和VI組日增重顯著高于III、IV組（＜0.01），而耗料增重比顯著低于III、IV組（＜0.05），V組羔羊干物質(zhì)采食量顯著高于III、IV、VI組（＜0.01）。

表2 斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對陜北白絨山羊斷奶羔羊生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著（＜0.05），不同大寫字母表示差異極顯著（＜0.01）。下同

Different lower-case letters in the same row means significant difference between the treatments (＜0.05), different capitals in the same row means very significant difference between treatments (＜0.01). The same as below

2.2 斷奶日齡對6月齡陜北白絨山羊小腸組織形態(tài)的影響

不同日齡斷奶對6月齡陜北白絨山羊斷奶羔羊小腸組織形態(tài)的影響見表3。II組羔羊十二指腸絨毛高度、隱窩深度、絨毛表面積顯著高于其他兩組（＜0.01）。III組十二指腸的肌層厚度和空腸的絨毛表面積顯著高于其他兩組（＜0.05）。II、III組羔羊十二指腸絨毛寬度、回腸絨毛寬度顯著高于I組（＜0.05）。

表3 斷奶日齡對陜北白絨山羊斷奶羔羊小腸形態(tài)發(fā)育的影響

2.3 斷奶日齡對6月齡陜北白絨山羊小腸主要消化酶活性的影響

不同日齡斷奶對6月齡陜北白絨山羊小腸主要消化酶性活的影響見表4。I組空腸和回腸中α-淀粉酶活性顯著高于其他兩組（＜0.05），III組十二指腸和回腸中脂肪酶活性顯著高于其他兩組（＜0.05），III組空腸和回腸中的糜蛋白酶活性顯著高于其他兩組（＜0.05），II組空腸中胰蛋白酶活性顯著高于其他兩組（＜0.01）。

2.4 日糧營養(yǎng)水平對6月齡陜北白絨山羊小腸組織形態(tài)的影響

飼喂不同營養(yǎng)水平日糧對6月齡陜北白絨山羊斷奶羔羊小腸組織形態(tài)的影響見表5。V和VI組羔羊十二指腸的絨毛高度、絨毛寬度、肌層厚度、絨毛表面積和空腸的絨毛高度、肌層厚度以及回腸的絨毛高度、V/C顯著高于其他兩組（＜0.01）。VI組十二指腸隱窩深度和空腸V/C以及回腸絨毛寬度、絨毛表面積顯著高于其他3組（＜0.01）。V組十二指腸V/C和回腸肌層厚度顯著高于其他3組（＜0.01）。

2.5 日糧營養(yǎng)水平對6月齡陜北白絨山羊小腸主要消化酶活的影響

飼喂不同營養(yǎng)水平日糧對6月齡陜北白絨山羊斷奶羔羊小腸主要消化酶活的影響見表6。IV組十二指腸和空腸中α-淀粉酶活顯著低于其他3組（＜0.01），而十二指腸中的蔗糖酶活顯著高于其他3組（＜0.05）。V組和VI組十二指腸中糜蛋白酶活、胰蛋白酶活顯著高于其他兩組（＜0.05）。V組空腸中糜蛋白酶活和回腸中胰蛋白酶活顯著高于其他3組（＜0.05）。

表4 斷奶日齡對6月齡陜北白絨山羊小腸主要消化酶活性的影響

表5 日糧營養(yǎng)水平對6月齡陜北白絨山羊小腸形態(tài)發(fā)育的影響

表6 日糧營養(yǎng)水平對6月齡陜北白絨山羊小腸主要消化酶的影響

3 討論

3.1 斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對陜北白絨山羊6月齡羔羊小腸組織形態(tài)的影響

小腸由十二指腸、空腸和回腸三部分組成，是營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要場所。小腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)是其消化吸收功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。徐永平等[11]報道小腸腸壁主要是由吸收營養(yǎng)物質(zhì)的絨毛和分泌消化液的隱窩構(gòu)成，腸道消化酶含量和活性對小腸充分消化吸收日糧營養(yǎng)素起著決定性作用。絨毛高度、絨毛寬度、隱窩深度和V/C是衡量小腸消化吸收功能的重要指標(biāo)，這些指標(biāo)能夠反映小腸發(fā)育是否健康。本研究結(jié)果顯示，60 d和75 d斷奶羔羊干物質(zhì)采食量顯著高于90 d斷奶羔羊，且60 d斷奶羔羊平均日增重顯著高于90 d斷奶羔羊平均日增重。前期消化代謝試驗[12]表明，60 d斷奶組羔羊?qū)θ占Z氮和能量的消化利用率顯著高于75 d和90 d斷奶組，且生產(chǎn)性能達(dá)到最佳。試驗結(jié)果顯示，75 d斷奶羔羊十二指腸絨毛高度、隱窩深度、絨毛表面積最高，且75 d和60 d斷奶羔羊十二指腸絨毛寬度、肌層厚度和回腸絨毛寬度高于90 d斷奶羔羊。宋代軍[13]等指出30日齡斷奶對羔羊小腸黏膜損傷較小，恢復(fù)較好，30日齡之前，斷奶越早，羔羊小腸黏膜損傷越大，絨毛高度越低，隱窩加深越嚴(yán)重，斷奶10 d后的恢復(fù)情況也越差。陳鼎[14]研究指出，若小腸絨毛表面積越大，絨毛高度越高且整體分布均勻，那么小腸對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收功能就越強(qiáng)。Lindvall等[15]研究表明隱窩深度反映了細(xì)胞的生成率，隱窩變淺促使腸上皮細(xì)胞成熟率上升，細(xì)胞的分泌能力增強(qiáng)，消化液分泌增多，從而使化學(xué)消化功能增強(qiáng)；同時腸黏膜上皮細(xì)胞的生長加快增強(qiáng)了腸道損傷的修復(fù)作用，并提高了機(jī)體對飼料利用率，對動物生產(chǎn)性能的提高起到積極作用。因此，從試驗結(jié)果來看75 d斷奶羔羊的小腸絨毛高，表面積大，但是隱窩深度也相對較深，總體而言75 d和60 d相對于90 d斷奶腸部發(fā)育的更加完善，小腸的消化吸收能力也更強(qiáng)。試驗結(jié)果與前人研究有所不同，原因可能是前人研究主要關(guān)注羔羊于30日齡之前斷奶，而本試驗羔羊斷奶均在60日齡之后，斷奶時得到充分胃腸道發(fā)育，功能趨于完善，羔羊已經(jīng)能消化吸收植物性飼料，所以并未發(fā)現(xiàn)斷奶日齡越早小腸黏膜損傷越嚴(yán)重的現(xiàn)象。

日糧營養(yǎng)水平是調(diào)控腸道組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的主要因素之一，適宜的營養(yǎng)水平能夠促使小腸健康發(fā)育，使小腸更好地吸收營養(yǎng)物質(zhì)。POND等研究表明，蛋白質(zhì)或能量缺乏時會阻礙小腸組織形態(tài)的發(fā)育，但當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)和能量攝入恢復(fù)正常后，小腸組織形態(tài)根據(jù)其營養(yǎng)缺乏程度，隨之發(fā)生不同程度的恢復(fù)發(fā)育[16-18]。日糧中蛋白質(zhì)來源、蛋白營養(yǎng)水平以及碳水化合物的組成，都可顯著影響動物小腸組織形態(tài)的發(fā)育水平[3,19]。丁莉[20]研究指出隱窩變淺，表明細(xì)胞成熟率上升，其分泌功能增強(qiáng)。V/C能夠綜合反映小腸的功能狀態(tài)，比值下降時，說明消化功能下降并可能伴有腹瀉；比值上升時，說明腸內(nèi)膜面積較大，消化吸收能力較強(qiáng)。本試驗結(jié)果顯示，日糧營養(yǎng)水平為115%、130%的高能高蛋白組顯著提高了十二指腸和回腸的絨毛高度、絨毛表面積，且增加了空腸和回腸V/C的比值。呂凱等[21]研究表明，蛋白質(zhì)水平在15.01%—21.03%，日糧蛋白質(zhì)水平越高，斷奶羔羊小腸各段絨毛長度越長，空腸的V/C值越大，小腸絨毛的發(fā)育越好。本試驗結(jié)果與呂凱等研究結(jié)果趨勢一致，但是蛋白質(zhì)水平不在15.01%—21.03%范圍內(nèi)，主要原因可能是呂凱試驗對象是藏羊，且試驗階段不滿2月齡，而本試驗對象是6月齡的陜北白絨山羊。日糧營養(yǎng)水平為115%時，回腸肌層厚度以及十二指腸V/C達(dá)到最高值，日糧營養(yǎng)水平為130%時，空腸和回腸的隱窩深度均最低。原因可能是合適的能蛋比給絨山羊提供了一個完善的營養(yǎng)平臺，日糧中所提供的蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)不僅滿足了小腸各段的正常生長發(fā)育，而且使微生物區(qū)系和菌群數(shù)量達(dá)到了一個最好的狀態(tài)，提高了對營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率，從而提高了絨山羊的生長性能。相對應(yīng)地，日糧營養(yǎng)水平為85%時，日糧中各營養(yǎng)物質(zhì)含量比較低，尤其是在羔羊的育成階段，羔羊生長速度快，營養(yǎng)限飼的情況下會阻礙小腸的生長發(fā)育，甚至動員機(jī)體內(nèi)的蛋白質(zhì)和脂肪來進(jìn)行生命活動，從而使絨山羊的整體生長發(fā)育受限。Velazques[22]等認(rèn)為日糧碳水化合物和蛋白質(zhì)的微生物發(fā)酵產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸可刺激前胃的發(fā)育，其中丙酸和丁酸是最主要的。丙酸和丁酸的代謝不僅可為胃黏膜上皮生長和肌肉收縮提供能量，同時可促進(jìn)胃腸上皮細(xì)胞的增殖分化。與祁敏麗[23]等研究結(jié)果一致，在羔羊3月齡之后，日糧中能量水平的降低使胃腸道發(fā)育緩慢，腸道受到損傷引起細(xì)胞肥大，致使隱窩深度增加。

3.2 斷奶日齡和日糧營養(yǎng)水平對陜北白絨山羊6月齡羔羊小腸主要消化酶活性的影響

消化酶在機(jī)體內(nèi)催化糖、脂肪和蛋白質(zhì)的水解，小腸中消化碳水化合物的主要酶是淀粉酶，研究表明，腸液中的淀粉酶活性與動物年齡有關(guān)，隨年齡增長而增強(qiáng)。此外，腸液中的淀粉酶活性也受到采食量和日糧營養(yǎng)素的影響，隨著進(jìn)食淀粉量的增加，胰腺和小腸內(nèi)容物淀粉酶活性增強(qiáng)[24-26]。小腸中胰蛋白酶和糜蛋白酶在日糧蛋白質(zhì)的消化中起重要作用，胰蛋白酶和糜蛋白酶兩者共同作用將蛋白質(zhì)分解成大小不等的肽段,羧肽酶和氨肽酶再將其降解氨基酸。Kreikemier[27]等認(rèn)為胰蛋白酶和糜蛋白酶活性與動物的年齡以及采食的日糧成分有關(guān)。本試驗結(jié)果顯示，60 d斷奶羔羊空腸、回腸段糜蛋白酶活性和十二指腸、回腸段脂肪酶活性最高，原因可能是60 d斷奶羔羊干物質(zhì)采食量增加，進(jìn)入腸道內(nèi)的蛋白質(zhì)和粗脂肪也會隨之增加，需要更多的酶對蛋白質(zhì)和粗脂肪進(jìn)行消化，符合“酶－底物關(guān)系”學(xué)說的規(guī)律。而75 d斷奶羔羊空腸段胰蛋白酶活性最高，可能因為60 d、75 d的干物質(zhì)采食量均高于90 d斷奶羔羊，蛋白質(zhì)攝入量隨之增加，因其胰蛋白酶和糜蛋白酶共同作用于蛋白質(zhì)，75 d斷奶羔羊小腸中糜蛋白酶并無顯著增加，所以致使分泌更多的胰蛋白酶來分解蛋白質(zhì)。郭江鵬[4]等研究發(fā)現(xiàn)28日齡斷奶羔羊小腸內(nèi)主要消化酶活性恢復(fù)能力不遜于42日齡斷奶羔羊。本試驗條件下斷奶日齡對羔羊小腸內(nèi)麥芽糖酶和蔗糖酶活性無顯著影響，這與前人研究結(jié)果一致。

Gorrill[28]等指出,反芻動物在小腸段的蛋白水解酶活性在其前三分之二段高于后三分之一段。佟莉蓉[29]表明，犢牛空腸前段的胰蛋白酶活性最高,而α-淀粉酶活性在空腸中、后段最高。本試驗中胰蛋白酶、糜蛋白酶和α-淀粉酶最高活性均出現(xiàn)在空腸段，與Gorrill等的結(jié)果一致。張振斌[30]等研究發(fā)現(xiàn)，采食量的增加能夠增強(qiáng)斷奶仔豬空腸段內(nèi)容物胰蛋白酶的活性，增強(qiáng)幅度逐漸達(dá)到并超過哺乳仔豬水平，可能是采食量增加可以促使合成更多的胰蛋白酶。本試驗結(jié)果顯示，日糧營養(yǎng)水平為115%時，斷奶羔羊十二指腸段糜蛋白酶和回腸段胰蛋白酶活性最高，對干物質(zhì)的采食量同樣達(dá)到最高值，原因可能是日糧營養(yǎng)水平為115%時，羔羊攝入較多的能量和蛋白質(zhì)，能夠加強(qiáng)消化器官以及消化腺功能的發(fā)育完善，相較于日糧營養(yǎng)水平為115%時，日糧營養(yǎng)水平為130%對胰腺分泌蛋白酶的刺激減弱，所以內(nèi)容物中胰蛋白酶和糜蛋白酶活性前者大于后者，該試驗結(jié)果同樣也遵循“酶－底物關(guān)系”學(xué)說的規(guī)律[31]。小腸酶活性測定結(jié)果與小腸營養(yǎng)物質(zhì)利用率及生長性能測定結(jié)構(gòu)相互印證，進(jìn)一步說明日糧營養(yǎng)水平為115%時，陜北白絨山羊的生產(chǎn)性能最佳。研究表明,飼糧精粗比影響皺胃和小腸內(nèi)環(huán)境及某些酶的活性[32-33]，本試驗條件下，日糧營養(yǎng)水平為130%時，精料的比值最高，由此可以推斷出，可能由于該日糧中精料比例太高，抑制了胰蛋白酶和糜蛋白酶的分泌，從而降低了各營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率。

4 結(jié)論

（1）斷奶日齡顯著影響6月齡陜北白絨山羊小腸形態(tài)發(fā)育和α-淀粉酶、脂肪酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶活性，進(jìn)而影響其生產(chǎn)性能，本試驗條件下，60 d斷奶增重效果最好。

（2）日糧營養(yǎng)水平顯著影響6月齡陜北白絨山羊小腸形態(tài)發(fā)育和α-淀粉酶、蔗糖酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶活性，進(jìn)而影響其生產(chǎn)性能。本試驗條件下，日糧消化能蛋白水平為飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的115%時能充分發(fā)揮其生產(chǎn)潛能。

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Effects of Weaning Age and Dietary Nutritional Levels on Intestinal Morphology and Activity of Digestive Enzymes in 6-month-old Shaanbei White Cashmere Goats

QU XingMei1, XUE FuLai2, HUANG XiaoYu1, ZHANG Yu1, XING XiaoNan1, ZHANG EnPing1

（1College of Animal Science and Technology, Northwest A&F University, Yangling 712100, Shaanxi;2Zhucheng Animal Husbandry and Veterinary Administration of Shandong Province, Zhucheng 262200, Shandong）

【】This study aimed to investigate the effects of weaning age and dietary nutritional levels on intestinal morphology and activity of major digestive enzymes of 6-month-old Shaanbei white Cashmere goats.【】 Fifty-four Shaanbei white Cashmere female goats aged 54 days (live body weight was (10.73±1.03)kg) were randomly assigned to 6 groups, with 3 replications per group and 3 goats per replication. Group I, II, and III were fed standard diets, and the weaning age was 90 d, 75 d and 60 d, respectively. Goats in group IV, V and VI were all weaned at 60 d, and were fed diet with 85%, 115%, 130% digestive energy and protein levels of the standard diets, resptectively. Goats were fed to 6-month-old. At the end of the trial period, 1 goat were randomly selected from each replicate for slaughter (no fasting before slaughter), and 2 cm2tissue samples were collected from upper middle section of duodenum, middle jejunum and distal ileum, respectively. Paraffin sections of sampling tissues were made to observe the morphology of the small intestine. Chyme from each segment of the small intestine was collected for the determination of the enzymes activity of trypsin, chymotrypsin, lipase, alpha-amylase, sucrase and maltase.【】The results showed that: (1) Weaning age affected growth performance of lamb in 4-6 month. The lamb average daily gain of group Ⅲ was significantly greater than that of groupⅠ(＜0.05). (2) Weaning age affected small intestine histological morphology of 6- month-old lambs. Muscular layer thickness of duodenum and villi surface area of jejunum of group Ⅲ was significantly greater than that of group I or group II (＜0.05);the villi width of duodenum and the villi width of ileum groupII and group III was significantly higher than that of group I (＜0.05). (3) weaning age affected the activity of digestive enzymes in small intestine. The activity of lipase in duodenum and ileum, the activity of chymotrypsin in jejunum and ileum, group III was significantly higher than that of groupI or group II (＜0.05). (4) Nutrient level of diets affected small intestine histological morphology of 6-month-old lambs. The villi height, villi width, muscle layer thickness and villi surface area of duodenum, and the villi height, muscle layer thickness of jejunum, and the villi height, ratio of V/C, groupV and group VI was significantly higher than that of group III and group IV (＜0.01). (5) Nutrient level of diets affected the activity of digestive enzymes in small intestine. The activity of chymotrypsin and trypsase in jejunum of group V and group VI was significantly higher than that of group III and group IV (＜0.05); the activity of chymotrypsin in jejunum and the activity of trypsase in ileum of group V was significantly higher than that of each other group (＜0.05). 【】In this study, in terms of growth performance, small intestine morphology and activity of main digestive enzymes in Shaanbei white Cashmere goat, the best weaning time of lamb was at 60 d, and the optimum dietary energy and protein level was recommended to use 1.15 times the setting standard.

Shaanbei white Cashmere goat; nutritional level; weaning age; small intestinal morphology; activity of digestive enzymes

10.3864/j.issn.0578-1752.2019.19.015

2018-10-10；

2019-07-22

國家重點(diǎn)研發(fā)計劃項目（2016YFD0500508）、陜西省重點(diǎn)研發(fā)計劃項目（2017TSCXL-NY-04-02）、陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新轉(zhuǎn)化項目（NYKJ-2016-04）

曲星梅，E-mail：554889445@qq.com。

張恩平，E-mail：zhangenping@nwsuaf.edu.cn

（責(zé)任編輯 林鑒非）