一款膠原蛋白復合粉改善皮膚水分人體試食實驗研究

□ 周致瑩 喬小青 張旭光

湯臣倍健股份有限公司，廣州，510000

1 引言

膠原蛋白（collagen）是一種非水溶性纖維狀的含糖蛋白質，來自于脊椎動物的結締組織。膠原蛋白不僅是脊椎動物細胞外間質的重要成分，而且是其體內含量最為豐富的蛋白質。在人體內，膠原蛋白對皮膚具有保水、保濕以及保持彈性等重要作用[1]。另外有研究表明，口服膠原蛋白對真皮和表皮均具有改善作用，因其吸收利用率好，易于擴散到皮膚的深層和表層，從而使角質層水分得以提高，達到表皮細胞活性提高、皮膚膚質提升的作用[2]。本款膠原蛋白復合粉除膠原蛋白外，還含有具有保濕作用的庫拉索蘆薈凝膠凍干粉（Aloe vera gel freeze-dried powder）和透明質酸鈉（Sodium hyaluronate）。本研究將幾款具有補水保濕作用的原料制成粉劑產品，按照《保健食品檢驗與評價技術規范》的方法進行功能學評價，對人體進行改善皮膚水份功能實驗研究，為開發同類型的膠原蛋白保健食品提供實驗支持。

2 材料和方法

2.1 受試物

膠原蛋白復合粉，粉劑，淡黃色粉末，本品的主要成分及含量為膠原蛋白（66.7%）、庫拉索蘆薈凝膠凍干粉（0.8%）、透明質酸鈉（0.6%）。核準凈含量：4.5g/袋，人體推薦量為每日1次，每次1袋，服用量為4.5g/日。安慰劑除功效成分外，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試物一致。

2.2 受試對象

按自愿原則選擇30-50歲，皮膚水分≤12的受試者

2.2.1 診斷標準

前額眉間皮膚水分≤12，無炎癥、痛癢等癥狀。

2.2.2 納入者標準

凡前額眉間皮膚水分≤12的自愿受試者，經體檢合格均可進行試食觀察。

2.2.3 排除者標準

2.2.3.1 年齡在30歲以下或者50歲以上者，妊娠或者哺乳期婦女，對本保健品過敏者。

2.2.3.2 合并有心肝腎和造血系統等嚴重原發性疾病，精神疾病患者。

2.2.3.3 不符合納入標準，未按規定用受試物，無法判定功效或資料不全影響功效或安全性判斷者。

2.3 實驗設計與分組

采用自身前后對照和組間對照兩種形式。104名受試者隨機分為試食組和對照組，試食組服用受試物，對照組服用安慰劑。

2.4 服用劑量和時間

每日1次，每次1袋，服用限量為4.5g/日，連續30天，受試者在試食期間停止服用有關改善皮膚水分的藥物或者其他保健品及化妝品，不改變原來的飲食習慣，正常飲食。

2.5 儀器與試劑

CA-500型血球計數儀（日本產），BM-200尿十項分析儀（美國產），日立7100全自動生化分析儀（日本產），Skin Analyzer SHP88儀（德國產），生化試劑盒全部由中生公司提供。

2.6 觀察指標

以下觀察指標實驗前后各檢查一次。

2.6.1 功效性觀察

2.6.1.1 一般情況

詳細詢問病史，了解受試者飲食情況，觀察精神狀況、睡眠、飲食、大小便、血壓等主要臨床癥狀。觀察受試物對受試者是否有不良影響。

2.6.1.2 皮膚水分檢測

2.6.1.2.1 測定環境：在寬敞、通風條件良好，溫度、濕度適中的空間環境穩定的檢查室中進行。

2.6.1.2.2前額眉間皮膚水份測定

在安靜狀態下，用潔凈棉球蘸蒸餾水清潔眉間被測部位，擦干后15分鐘進行水分的測定，試食前后測定工作由同一臺儀器、同一人操作完成。

2.6.2 安全性觀察

2.6.2.1 血液、尿常規及便常規檢查

紅細胞計數，血紅蛋白，白細胞計數，尿十項，便常規檢測。

2.6.2.2 生化指標測定

血清白蛋白ALB，總蛋白TP，肝腎功能（總膽紅素TBIL，谷丙轉氨酶ALT，尿素氮BUN，肌酐CRE），血糖GLU、血脂（總膽固醇TC，甘油三酯TG）。

2.6.2.3 腹部B超，心電圖，X線胸部透視。（在實驗開始時檢查一次）

2.7 改善皮膚水分功效判定

有效：水分得到改善，并經統計學檢驗有顯著性差異。

無效：水分沒有得到明顯的改善。

2.8 數據統計分析

實驗數據為劑量資料，用t檢驗進行分析。凡自身對照資料可以采用配對t檢驗，兩組均數比較采用成組t檢驗，后者需要進行方差齊性檢驗，對非正態分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態方差后，用轉換的數據進行t檢驗。

有效率采用χ2檢驗進行檢驗。四格表總例數小于40，或總例數等于或大于40但出現理論數等于或小于1時，應改為確切概率法。

3 結果與分析

3.1 一般狀況

受試者104人，隨機分為實驗組和對照組，共100例有效，均為女性。試食組50例，年齡最小35歲，最大50歲，平均年齡（45.10±4.85）歲；對照組50例，年齡最小31歲，最大50歲，平均年齡（44.34±5.15）歲。

3.2 受試物對皮膚水分變化的影響

?

3.3 功效判斷

?

由表1、2可見，試食組試食前后皮膚水分增加有顯著性差異（P＜0.001），總有效率為84.00%顯著高于對照組（P＜0.001）；實驗后試食組皮膚水分增加2.70±2.21，而對照組無明顯變化，兩組比較（P＜0.001）。試食組試食后與對照組相比，皮膚水分有顯著性差異（P＜0.001）。

3.4 一般情況

?

3.5 血常規和血生化變化

?

由表4可見，試食前后試食組和對照組各項血生化和血常規指標均在正常范圍內。

3.6 血壓、心率、尿和便常規變化

?

由表5可見，試食前后試食組和對照組血壓、心率、尿和便常規指標均在正常范圍。

3.7 腹部B超，心電圖，X線胸部透視試食前后試食組和對照組均在正常范圍內。

3.8 受試者脫失率

納入受試者104例，試食組52例、對照組52例。其中試食組試食結束時有2例未在規定時間按時接受復查；對照組有2例未在規定時間內按時接受復查。試食組與對照組各有2例符合受試者排除標準，有效受試者每組50例，受試者脫失率均為3.85%。

3.9 不良反應觀察

?

未見過敏及其他不良反應。

3.10 結論

采用自身與組件對照兩種對照設計，納入病例104例，隨機分為試食組和對照組。有效受試者100例，試食組、對照組各50例。試食組按要求服用該膠原蛋白復合粉30天后，皮膚水分平均增加2.70±2.21，與對照組比較有顯著差異（P＜0.001），其中42例皮膚水分增加，有效率為84.00%；對照組為安慰劑組，30天后復查時有20例皮膚水分增加，有效率為40.00%。試食組有效率高于對照組（P＜0.001）。服用該膠原蛋白復合粉前后，試食組自身比較及與對照組比較，皮膚水份均顯著性增加（P＜0.001）。因此，可以認定，該膠原蛋白復合粉具有改善皮膚水分的作用。

試食者胸透、腹部B超、心電圖均基本在正常范圍內。試食該膠原蛋白復合粉前后，血常規、尿常規、便常規及血生化指標均在正常范圍內，說明該膠原蛋白復合粉對受試者健康無不良影響。此外，試食該膠原蛋白復合粉后，未見過敏及其他不良反應。

4 討論

本研究采用的方法為將受試者隨機分成實驗組和對照組兩組，分別使用膠原蛋白復合粉和安慰劑，安慰劑除功效成分外，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試產品一致。實驗結果顯示：食用膠原蛋白復合粉后受試者皮膚水分得到了顯著的改善，同時血常規、血生化等各項指標的檢測結果也均未見異常。試食組在試食膠原蛋白復合粉之后皮膚水分得到了明顯的提高，并與試食前皮膚水分具有顯著性差異，同時也與對照組皮膚水分改善情況比較后也具有顯著性差異，說明該種膠原蛋白復合粉不僅能夠改善皮膚水分，而且對人體沒有任何的不良影響。

皮膚老化是人體衰老的外在表現，是內源性和外源性因素等綜合作用的結果。膠原蛋白因其獨特的皮膚修復能力，且具有較大的親和力、良好的生物相容性，已被廣泛應用于醫學領域[3]。由于膠原蛋白分子含有許多的親水取代基，因此，具有很強的保濕能力，具體體現在提高組織細胞的貯水能力、使皮膚潤澤保濕[4]。大量的實驗研究表明，試食膠原蛋白能起到改善皮膚水分的作用。馬慧軍[5]應用膠原蛋白凝膠對各類淺Ⅱ度以下燒傷創面進行護理，發現膠原蛋白凝膠組在色素沉著發生率及疼痛緩解時間上均有明顯下降。周雙琳[6]通過人體試食實驗，口服小分子魚膠原蛋白粉，發現可在一定程度地改善女性面部膚質，且無明顯不良反應，具有較好的安全性和有效性。余宙[7]等使用魚膠原蛋白粉進行了人體試食的安全性與功能性研究，發現試食組食用前后，自身對照皮膚水分有顯著差異（P＜0.05），具有顯著的改善皮膚水分作用。

作為該款膠原蛋白復合粉其他兩種成分亦有保濕作用，有研究表明庫拉索蘆薈提取液可以很好的降低皮膚失水率和提高皮膚的含水量[8]。萬克英等[9]通過動物試驗，表明蘆薈凝膠中的多糖成分能促進皮膚組織中纖維連接蛋白增加，有助于皮膚水分的改善。透明質酸由于具有很強的吸水性而有保濕作用，其保濕效果與甘油相比效果更好，能夠使用皮膚在不同季節環境下保濕的需求[10]。