代料栽培黑木耳培養料添加豆粕和活性肽的比較試驗

賀國強 吳尚軍 胡曉艷 趙海康 鄧德江 魏金康

（北京市農業技術推廣站，北京朝陽100029）

代料栽培黑木耳以其生產周期短、收益高等優點取代了木段栽培方式。代料栽培黑木耳的培養料加入一定量豆粕、黃豆粉、麩皮等含氮量較高的氮源物質，雖可促進菌絲生長和提高黑木耳產量，但也增加了生產成本。活性肽（biopeptides）是指對生物機體的生命活動有益或具有生理作用的肽類化合物，是蛋白質中20個天然氨基酸以不同組成和排列方式構成的從二肽到復雜的線性、環形結構的不同肽類的總稱，也是源于蛋白質的多功能化合物[1]。活性肽可以由豆粕經過微生物發酵后噴霧干燥制備，其成分較為復雜。經微生物發酵后豆粕大分子蛋白得到有效地降解，發酵產物中小分子蛋白肽顯著增加，同時發酵產物中蛋白酶活性和益生素含量顯著增加，制得的肽產品具有較好的生理特性和加工特性[2-3]。前期的試驗表明，在PDA中加入活性肽，黑木耳菌絲萌發快，菌絲生長速度快而且濃密，但有關活性肽在黑木耳栽培料中應用研究尚未見報道。為此，筆者進行了用活性肽部分或全部取代黑木耳培養料中豆粕栽培黑木耳試驗，以期為黑木耳代料栽培培養料的開發利用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株及培養材料

黑木耳黑29，引自黑龍江省微生物所。活性肽為豆粕微生物發酵液噴霧干燥制成，由北京菇友生物科技公司提供。豆粕為生產用商品豆粕粉。培養料配方:以樺木、柞木木屑為主料，麩皮、豆粕等為輔料，按照木屑86.5%，麩皮10%，豆粕2%，石膏1%，石灰0.5%的配方配制培養料，然后裝袋。栽培袋規格16.5 cm×36 cm，裝袋后料柱高20 cm。

1.2 試驗方法

用活性肽部分或全部取代豆粕，共設4個處理:處理①，培養料中僅加豆粕（添加量為培養料干重的2%），處理②，培養料中僅添加活性肽（添加量為培養料干重的0.3%）；處理③，培養料中既不加活性肽也不加豆粕（CK）；處理④，培養料中添加豆粕（添加量為培養料干重的1%）及活性肽（添加量為培養料干重的0.15%）。每個處理3次重復。以干料計算，投料約600 kg。拌料裝袋后，按常規方法滅菌、接種、發菌。開口出耳時各處理隨機排列。

1.3 考察內容及方法

發菌期記錄菌絲生長情況，包括菌絲日均長速、菌絲滿袋所需時間、菌絲長勢、菌絲顏色。

菌絲日均長速的測定方法:待菌絲由接種部位長過袋肩部時，用筆劃線標記菌絲生長位置，并記錄日期；當菌絲快長至菌袋底部時再次用筆劃線標記菌絲生長位置，并記錄日期。兩次劃線的間距除以兩次測量的間隔天數就得到菌絲日均長速。

催芽時，觀察記錄耳芽形成時間、耳芽整齊度。耳芽形成時間是從開口催芽起，至有耳芽開始形成的天數。耳芽整齊度指開口第20天，形成耳芽的孔數占所開孔數量的百分比。耳片適采時，測定記錄耳片的鮮耳長度、鮮耳寬度、鮮耳厚度，并統計每袋的鮮耳產量、干耳產量。稱取一定量晾干后的干耳，用溫水泡發過夜，瀝去多余水分，稱重，計算泡發率。計算公式為Y=m1∕m。式中:Y為樣品泡發率；m1為樣品濕重，單位g；m為樣品干重，單位g。

每個處理取200 g干耳，進行營養成分分析。可溶性總糖的測定用硫酸蒽酮法；粗蛋白:采用GB 5009.5－2016測定；粗脂肪:采用GB 5009.6－2016測定；灰分:采用GB 5009.4－2016測定；鐵:采用GB 5009.268－2016測定。

2 結果與分析

2.1 添加活性肽對黑木耳菌絲生長的影響

由表1可知，黑木耳菌絲生長最佳為處理①（培養料中添加2%豆粕），日均長速為0.34 cm∕d，較顯著高于其他處理，且菌絲粗壯、濃密；從菌絲滿袋時間來看，最佳為處理①，滿袋時間為40 d；其次為處理④，滿袋時間為44 d，顯著快于其他處理。綜合可知，處理①為黑木耳菌絲生長的最佳試驗配方。

表1 添加活性肽對黑木耳菌絲生長的影響

2.2 添加活性肽對黑木耳子實體生長發育的影響

由表2可見，出現耳芽時間最早為處理②，現耳芽時間為11 d。耳芽整齊度由高到低依次為處理②=處理④＞處理①＞處理③。從鮮耳朵長度來看，最佳為處理④，達4.22 cm，但與處理②差異不顯著；從鮮耳朵寬來看，最佳為處理③，達5.32 cm，但與其他處理差異不顯著。從鮮耳厚來看，最佳為處理②、④，達1.74 cm、1.72 cm，二者無顯著性差異，與其他處理差異較為顯著。

表2 不同處理黑木耳子實體生長發育情況

2.3 添加活性肽對黑木耳產量的影響

由表3可知，幾個處理的平均每袋鮮耳產量、平均每袋干耳重順序為①＞④＞②＞③；產量最高的為處理①（培養料中添加2%豆粕），分別為312 g、53.2 g；最低為處理③，分別為195 g、34.2 g；二者與其他處理差異顯著。因此，培養料中不加活性肽和豆粕都會影響黑木耳產量，而且添加豆粕的效果略優于活性肽。

表3 不同處理黑木耳產量及泡發率

2.4 添加活性肽對黑木耳主要營養成分的影響

從表4可知，各處理黑木耳的可溶性總糖含量由高到低依次為處理②＞④＞①＞③，最高為處理②，為33.1 mg∕g；粗蛋白含量由高到低依次為處理②＞④＞①＞③，最高可達14.4%；粗脂肪含量由高到低依次為處理②＞④=①＞③；灰分含量由高到低依次為處理④＞②＞③＞①；鐵含量由高到低依次為處理②＞④＞①＞③。

表4 不同處理黑木耳主要營養成分

3 小結與討論

試驗結果表明:活性肽可以部分替代豆粕作為培養料的輔料栽培黑木耳；培養料最佳氮源添加比例為0.15%活性肽，1%豆粕。

添加活性肽可以加快黑木耳菌絲生長，縮短菌絲發滿袋的時間，但其促進菌絲生長的作用不及添加豆粕。添加活性肽的黑木耳菌絲長勢更佳，菌絲濃密、潔白，這與PDA加入活性肽可促進菌絲生長結果一致。

輔料是在栽培基質組成中配量較少、含氮量較高、用來調節培養基質的碳氮比的物質。如糠、麩、餅肥、禽畜糞、大豆粉、玉米粉等。活性肽含氮量高，粗蛋白高達24.3%，總氮4.55%，C∶N比為7.17，符合行業標準要求，可以作為輔料（氮源）添加物使用。

試驗表明，添加豆粕或活性肽，均可以顯著提高黑木耳的產量，添加2%豆粕效果優于添加0.3%的活性肽。但活性肽的成本（每袋0.03元）僅為豆粕（每袋0.1元）的30%。

活性肽和豆粕混合使用增產效果優于活性肽單獨使用。單純使用活性肽的作用不如豆粕，表明活性肽不能完全取代豆粕。研究表明，黑木耳栽培培養料中氮源偏少會影響黑木耳產量和品質[4]。試驗表明0.3%活性肽添加量與添加2%豆粕相比，培養料氮含量稍顯不足，因此影響了黑木耳產量。

研究表明，不同氮源對子實體中膠原蛋白含量的影響存在差異[5]。添加活性肽處理組的黑木耳產量雖低于豆粕，但試驗獲得的黑木耳除灰分指標外，可溶性總糖、粗蛋白、粗脂肪含量、鐵含量均隨著活性肽的添加量的增加而上升，表明添加活性肽可以改善黑木耳的品質。