豫南地區適栽灰樹花品種篩選試驗

龔鳳萍 上官端琳 竹 瑋 段慶虎 張宗源 尹川川 易紅巖 冉忠萍 張應香

（信陽市農業科學院，河南信陽464000）

灰樹花是擔子菌亞門的非褶菌目、多孔菌科、奇果屬，俗稱栗蘑，是一種名貴的食、藥兼用菌[1]，其營養豐富，肉質鮮嫩，味如雞絲，脆似玉蘭，藥用價值更高，富含硒等人體必需微量元素，尤其富含灰樹花多糖（以β-葡聚糖為主），是一種極好的天然免疫調節劑，具有顯著的防癌抗癌和改善健康功效，目前作為一種高級保健品風行日本、美國市場[2]。灰樹花的食用及藥用價值正引起人們廣泛關注，市場需求量逐年上升，其市場前景廣闊。

我國在20世紀80年代開始人工馴化栽培灰樹花。目前已經形成浙江慶元第一季割口出菇、第二季脫袋覆土出菇和河北遷西的覆土出菇兩種模式。有報道野生灰樹花發生于夏秋間的栗樹根部周圍及櫟、栲等闊葉樹的樹干及木樁周圍[3]。豫南山區分布大量的殼斗科樹種，每年的板栗樹開花季節雨后在其根部能采到野生灰樹花，說明豫南山區具有栽培灰樹花的自然條件。同時，豫南山區栽培大面積板栗樹，僅新縣就有2萬hm2。每年栗園改造、修剪產生大量廢枝條等，為灰樹花栽培提供了充足的原料。由此可見，豫南山區有著栽培灰樹花氣候條件和資源優勢。為此筆者開展灰樹花引種及比較試驗，以期為當地灰樹花栽培提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試灰樹花菌株:從灰樹花主產地河北遷西、河南省農科院（植物營養與資源環境研究所保藏）引進灰樹花菌株5個，詳見表1。

表1 各供試灰樹花菌株及來源

母種配方:去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蛋白胨1.5 g，磷酸二氫鉀2 g，硫酸鎂 0.5 g，維生素B1 20 mg，加水1000 mL，pH 6.0。

原種配方:棉籽殼80%，麩皮17%，石膏1%，葡萄糖1%，硫酸鎂1%。

栽培種配方:木屑45%，棉籽殼32%，麩皮15%，豆粉5%，糖1%，石膏1%，硫酸鎂1%，料含水量50%～53%。

1.2 試驗方法

1.3 拮抗試驗及菌絲培養比較試驗

供試灰樹花菌株拮抗試驗及菌絲培養試驗參考文獻[4]。將滅過菌的母種培養基在60～70℃時趁熱倒入9 cm的培養皿中，冷卻備用。用直徑為0.5 cm的打孔器截取供試灰樹花母種各一塊，兩兩接種于培養皿中央，間距1 cm以上，封口置25℃培養。待兩菌落長至一起1～2 d，觀察菌落連接處有無拮抗線。同樣挑取供試灰樹花母種一塊于培養皿中央，封口置25℃培養。待菌絲生長7 d后劃線一次，培養14 d后第二次劃線。用游標卡尺測定兩次劃線的間距（cm），除以培養天數即可得出各個供試菌株的菌絲日均長速。

1.4 栽培比較試驗

2016年5月11日接種一批，2017年2月19日接種一批。栽培料配方參照栽培種配方。主料木屑、棉籽殼先預濕堆悶1～2 d，裝袋前將麩皮等輔料拌入主料中混勻，調至培養料含水量50%～53%。拌料完畢立即裝袋，栽培袋為規格20 cm×38 cm×0.005 cm高壓聚丙烯袋。每個供試灰樹花菌株接種20袋，三次重復。料裝袋完畢后插入接種棒封口。袋肩料面離封口處留約1 cm空間，便于后期現原基。高壓滅菌，126℃保持2.5 h。采用立體打穴接種，棉塞封口。接種后料袋置于23～25℃暗培養。保持發菌室內空氣新鮮、氧氣充足。

菌絲培養30～40 d基本發菌滿袋，菌袋表面有白色菌膜表明菌絲達到生理成熟，此時加強通風和給予50 lx散射光刺激原基形成。當白色菌膜漸變成灰黑色隆起，開口催蕾。方法:一是用刀在原基形處劃“V”或“X”形的刀口；二是直接將封口塞子拔掉或割掉。開口后覆蓋地膜保濕，提高空氣相對濕度到80%以上，溫度20～23℃無光培養，使開口處菌絲復白，約7～10 d形成饅頭狀原基。當原基表面分泌淡黃色液滴并出現凹陷時，應當注意，不可將黃色液滴沖掉，否則子實體會停止發育。當子實體分化成珊瑚狀小梗時可以進入出菇棚進行出菇管理。出菇要求空氣相對濕度90%～95%，溫度20～25℃，避免環境因素劇烈變化影響原基分化及其進一步生長。噴霧時盡量不要噴灑在子實體上，在走道或棚內空間噴霧增濕，地面噴水保濕。當菌蓋邊緣白色生長圈消失、背面出現小孔時表明子實體發育成熟，可以采收。在20～25℃的溫度條件下從原基形成到子實體采收大約25 d。

觀察記錄灰樹花菌絲長勢（顏色、粗細、致密度等）、菌絲滿袋時間、開口催蕾后染雜菌情況、現原基時間及子實體形態特征。

2 結果與分析

2.1 供試灰樹花菌株拮抗試驗結果

通過拮抗試驗觀察（表2），除了HSH4、HSH5之間無拮抗線外，其余均有明顯的拮抗線，表明這兩個菌株為同種異名。可以確定供試5個菌株實際為4個。

表2 供試灰樹花菌株拮抗試驗結果

2.2 供試灰樹花菌株的菌絲長速、長勢

由圖1可看出，菌絲長速較快的是HSH6，日均長速為3.3 mm∕d，其次為HSH4，日均長速為 3.2 mm∕d，再次為HSH2，日均長速為 2.9 mm∕d，最慢的是HSH3，日均長速為2.0 mm∕d。菌絲長勢（表2）:菌絲最為濃密、長勢最強的是HSH6，尖端菌絲整齊、顏色潔白、濃密；其次是HSH4，尖端菌絲整齊、分叉較多、顏色白、較密；較差的是HSH2、HSH3，尖端菌絲較整齊，顏色較白、較稀疏。

由此可見，四個供試灰樹花菌株中HSH6菌絲長勢最好，長速最快；其次是HSH4；最差的是HSH2、HSH3。

表2 供試灰樹花菌株菌絲生長情況

圖1 供試灰樹花菌株菌絲長速

2.3 供試灰樹花菌株栽培試驗結果

2016年栽培試驗結果見表3。從表3可看出，4個菌株中表現最好的是HSH4，具有抗性強、易現原基的特性；其次是HSH2，雖然可以現原基，但是菌絲抗逆性較差，菌袋開口后有易感染雜菌的現象；HSH3、HSH6可能菌絲沒達到生理成熟，在7月中旬沒能現原基，到了8月因高溫未能出菇。

HSH4菌株一潮菇平均袋產為143 g，HSH2一潮菇平均袋產量為122 g。所有供試菌株在出過一潮菇后因遇到高溫天氣，菌絲受高溫熱害，沒能繼續出菇。

2017年2月19日栽培試驗結果見表4。由表4看出，HSH2菌絲長勢較弱，開口催蕾時易感染雜菌，出菇較晚，頭潮單袋產量為110 g，子實體覆瓦狀，色澤灰黑色，菌蓋邊緣有一圈白色，菇形較好（圖2）。HSH4菌絲抗性較強、長速快，菌絲滿袋時間較HSH2提早近15 d。菌絲開口后易形成白色原基，且不易感染雜菌。產量上明顯高于HSH2，頭潮單袋產量為204 g。子實體呈灰白色，珊瑚狀分支較多（圖3）。HSH3、HSH6未出菇。

灰樹花在分化階段，光照不足、通風不良時子實體易出“菜花菇”（圖4）。

出菇一潮后按照河北遷西模式進行覆土栽培管理。時值5月底高溫天氣，棚內溫度接近30℃，出過一潮菇的菌袋已經出現吐黃水現象，菌絲抗性降低，覆土后透氣性差，菌袋變軟腐爛。

表3 供試灰樹花菌株栽培試驗出菇情況（2016）

圖2 灰樹花菌株HSH2子實體

圖3 灰樹花菌株HSH4子實體

圖4 畸形灰樹花

圖5 單層地擺出菇

表4 供試灰樹花栽培試驗出菇情況（2017）

3 小結與討論

試驗結果表明，從生物學性狀試驗結果看，HSH6、HSH3菌絲長速快、長勢強，但是兩批栽培試驗均不能正常出菇。康源春等對雙孢蘑菇試驗，初步得出菌絲生長強弱與其產量有一定相關性，但菌絲生長快、活力旺、抗逆力強的品種其產量并不一定很高[5]。HSH6、HSH3菌株菌絲長速快、長勢強、其不出菇是否因出菇方式不適合或是其他原因還有待進一步研究。

栽培試驗表明，HSH4適應性較強，開口后菌絲抗逆性較強，現原基袋數可達100%，子實體色澤灰白。管理上可較為粗放些，較穩產；HSH2菌袋開口催蕾時易染雜菌，現原基袋數在90%左右，因此，需要更精細管理，才能促其現蕾提高產量，但其子實體色澤灰黑色，菇形好，受市場歡迎。

觀察發現，培養架外側的菌袋袋口菌絲出現過早吐黃水現象，而培養架內側的菌袋沒有發現這種現象。說明灰樹花發菌過程中需要完全黑暗，否則有散射光會促使菌絲過早由營養生長轉為生殖生長，如果達不到催蕾環境條件要求，菌絲會出現吐黃水現象，易滋生雜菌，造成菌袋污染，影響后期出菇。

灰樹花出菇管理最大難點是催蕾環節，這個環節掌握不好會造成不出菇導致絕收。割口出菇管理更為復雜，對環境要求很苛刻，溫、光、濕、氣有一個因素控制不好會出現菌絲變干，很難達到100%現原基。割口菌袋裸露菌絲抗性差易染雜菌。筆者發現利用棉塞（無棉蓋體）封口或扎繩封口方式，當菌絲滿袋袋壁出現白色菌膜時稍稍松開扎繩，或松動棉塞，增強袋口透氣性，在袋內現腦狀原基，進而分化成蜂窩狀菇蕾。這種催蕾方式優點是，利用菌絲在微微透氣后呼吸旺盛產生水氣達到保濕作用，當溫度在20～25℃時，10 d左右即可由白毛團形成原基。催蕾溫度低于18℃以下灰樹花較難形成原基，只有當腦狀原基分化后，再進入出菇棚進行出菇管理，方可穩產。

豫南地區灰樹花栽培頭潮菇在開口保濕、加強光照和通風等條件下能正常現蕾、出菇（圖5），但是如何能保證第二潮、第三潮菇高產還有待進一步探索。