細胞蠟塊對惡性胸腹水的診斷價值

范紅蕓 韓燁 王貝 曾祥勝 李明

[摘要] 目的 通過對惡性胸腹水實施不同的診斷方法，觀察其臨床效果，探究不同診斷方法的臨床應用特點。 方法? 從來該院診治的2018年7月—2019年2月的晚期腫瘤合并惡性胸腹水患者中隨機抽取79例，采用隨機數字法隨機分為對照組39例：實施常規細胞學檢查，觀察組40例：實施細胞蠟塊檢查，觀察兩組患者檢出率和惡性胸腹水上皮腫瘤標志物表達情況。 結果 觀察組經過細胞蠟塊檢查檢出例數為30例，檢出率為75.00%，對照組經過常規細胞學檢查檢出例數為20例，檢出率為51.28%，觀察組檢出率高于對照組，差異有統計學意義（χ2=14.442，P<0.05）;觀察組患者經過細胞蠟塊HE染色后背景較為干凈，同時，腫瘤細胞異型性明顯，呈腺管狀和乳頭狀排列;轉移性惡性胸腹水中的moc-31表現敏感，定位明確;在大部分腺癌中CEA具有較高的表達水平，染色背景較重。 結論 細胞蠟塊與常規細胞學檢查相比，惡性胸腹水患者檢出率明顯提高，腫瘤病灶來源可以被確定，臨床確診率升高，幫助臨床醫師做到對癥治療，減少患者痛苦，值得臨床推廣應用。

[關鍵詞] 細胞蠟塊;惡性胸腹水;細胞學檢查

[中圖分類號] R730? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）07（c）-0034-03

Diagnostic Value of Cell Wax Block for Malignant Hydrothorax and Ascites

FAN Hong-yun， HAN Ye， WANG Bei， ZENG Xiang-sheng， LI Ming

Department of Pathology， Xuyi People's Hospital， Xuyi， Jiangsu Province， 211700 China

[Abstract] Objective To observe the clinical effects of different diagnostic methods for malignant hydrothorax and ascites， and to explore the clinical application characteristics of different diagnostic methods. Methods 79 patients with advanced tumors with malignant hydrothorax and ascites from July 2018 to February 2019 were randomly selected from our hospital. They were randomly divided into control group by 39 patients： routine cytology， observation group 40 cases： the cell wax block examination was performed to observe the detection rate of the two groups of patients and the expression of tumor markers in malignant chest and abdomen. Results The number of cases detected by the cell wax block in the observation group was 30， the detection rate was 75.00%， and the number of cases detected by routine cytology in the control group was 20， the detection rate was 51.28%. The detection rate of the observation group higher than the control group，the difference was statistically significant（χ2=14.442， P<0.05）. The background of the observation group was clean after HE staining with cell wax block. At the same time， the tumor cells were abnormally shaped， and they were glandular and papillary; metastatic malignant ascites moc-31 is sensitive and well-defined; in most adenocarcinomas， CEA has a higher expression level and a heavier staining background. Conclusion Compared with conventional cytology， the detection rate of malignant hydrothorax and ascites patients is significantly improved. The source of tumor lesions can be determined and the clinical diagnosis rate is increased. It helps clinicians to achieve symptomatic treatment and reduces patient suffering. It is worthy of clinical promotion and application.

[Key words] Cell wax block; Malignant chest and ascites; Cytology

惡性胸腹水是由于癌性病變或者惡性腫瘤而引起胸腔壁層和腹腔出現彌漫性病變，患者體腔液體發生異常是該病的典型病理改變，降低患者生活質量，甚至會威脅患者生命[1]。惡性胸腹水是癌癥患者晚期的主要并發癥，提示病灶具有發生遠處轉移傾向[2-3]。分子診斷技術、免疫組織化學抗體、細胞蠟塊技術呈發展趨勢，為漿膜腔積液脫落細胞學樣本提供有效信息。細胞蠟塊可以明確漿膜腔積液的性質、以及為靶向治療提供可靠的診斷依據。有研究顯示，細胞蠟塊應用于胸腔積液中，但是在惡性胸腹水方面的研究較少[4-5]。因此，從來該院診治的2018年7月—2019年2月的晚期腫瘤合并惡性胸腹水患者中隨機抽取79例，采用隨機數字法隨機分為對照組39例：實施常規細胞學檢查，觀察組40例：實施細胞蠟塊檢查，現報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

從來該院診治的晚期腫瘤合并惡性胸腹水患者實施隨機抽取79例，37例女性，42例男性，年齡范圍在42～91歲，平均年齡為（56.34±3.25）歲，其中有20胃癌，10例卵巢癌，36例肺癌，8例卵巢癌，5例直腸癌。通過隨機數字法將79例患者隨機分為兩組，即對照組39例，其中女性18例，男性21例，平均年齡為（55.76±4.16）歲;觀察組40例，其中女性19例，男性21例，平均年齡為（55.35±3.97）歲。該研究通過該院倫理委員會的批準，并經過研究對象知情同意，自愿簽署知情同意書，兩組患者的基本資料統計學分析結果顯示差異無統計學意義（P>0.05），可以進行比較。

納入標準：被診斷為惡性腫瘤;伴隨胸腹水癥狀[6];通過病理學檢查，被確診。排除標準：伴隨嚴重的認知障礙或者嚴重結果精神類疾病患者;依從性較差患者;合并兩種或者以上腫瘤疾病患者。

1.2? 方法

對照組患者通過常規細胞學檢查，首先針對胸腹水采用離心涂片方法進行處理（TD24-WS 低速臺式離心機 ，湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司），隨后實施細胞學檢查。

觀察組實施細胞蠟塊檢查：試劑盒采用S-P試劑盒、CK、P53、CEA、Cal、DAB顯示劑（福州邁新生物試劑有限公司）。首先將每位患者的胸腹水制作為標本，將放置冰箱的溫度設置為4℃，保持20 min;標本內物質發生自然沉淀，收集標本沉淀物，并進行10 min離心，取上清，將沉淀物收集起來，將劑量定為50～100 mL，放如離心管中進行5 min離心，取上清;在上清液中加入固定液AF液（800 mL水+3 700 mL95%乙醇混合液+500 mL甲醛原液+2包PBS緩沖鹽），搖勻并靜置10分鐘;離心5～10 min（3 000 r/min），去除AF液;把標本沉渣做成細胞塊，放在10%中性甲醛固定液，放置時間為4～6 h，完成后進行脫水、石蠟包埋、切片。胸腹水蠟塊制作完成后，對切片脫蠟，經過兩次PBS緩沖液沖洗，每次持續3 min，緊接著利用3%氯化氫封存八分鐘后再用PBS緩沖液沖洗;隨后采用檸檬酸沖液進行高壓修復，時間為90 s;通過自然冷卻，經過兩次沖洗，每次沖洗保證3 min;添加一抗，在37℃孵育箱內孵育1 h;完成后，經過兩次緩沖液連續沖洗，沖洗時間為5 min/次，隨后添加二抗，在37℃孵育箱內孵育30 min，經過緩沖液沖洗后，添加DAB顯色液;隨后經過自來水充分沖洗，使用蘇木精進行復染，然后脫水、封片。

1.3? 統計方法

該研究數據的整理和分析采用SPSS 20.0統計學軟件，計數資料用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

2.1? 兩組患者的檢出率比較情況

觀察組患者檢出例數為30例，占75.00%，對照組患者檢出例數為20例，占51.28%，觀察組檢出率高于對照組，差異有統計學意義（χ2=14.442，P<0.05），見表1。

2.2? 兩組患者惡性胸腹水上皮腫瘤標志物表達情況

觀察組患者標本經過HE染色后背景較為明顯，干凈，腫瘤細胞異型性較為明顯，呈腺管狀和乳頭狀排列;轉移性惡性胸腹水中的moc-31表現敏感，定位明確;在大部分腺癌中CEA具有較高的表達水平，染色背景較重。

3? 討論

惡性胸腹水在臨床較為常見，是發生在全身性癌變或者胸腹腔惡性腫瘤所引起腹腔臟壁層和胸腔內的彌散性病變[7]。這樣的病變導致體腔液體異常增長，被稱為惡性胸腹水[8]。其發生機制復雜，與血管內外液體交換、體內外液體交換失衡有關系?；颊吆粑δ芤驗樾馗顾惓×以鲩L而受到影響，循環系統正常運行受到損傷，嚴重的患者可能發生死亡。臨床上通過腔引流術或者胸腔引流術針抽取晚期腫瘤合并惡性胸腹水患者的胸腹水，進行常規病理涂片檢查，做出診斷。但是，常規細胞學涂片內的細胞核容易發生重疊，有的涂片太厚，診斷結果受到影響。同時，受到取材限制，經過多次涂片才可以檢出異常的細胞，同時根據異常細胞不能診斷惡性腫瘤細胞，增加涂片難度，引起細胞發生變形，免疫組化鑒別受到阻撓。惡性胸腹水的明確診斷較為復雜。惡性胸腹水臨床診斷常選用細胞學檢查，與正常細胞相比容易脫落，可以通過多種方法獲得組織顆?；蛘吡鼋M織，進行性質鑒定。利用穿刺法采集深在的瘤細胞，利用印片法收集淺表瘤體表面的細胞，利用拉網法收集胃、食管所脫落的細胞，而腹腔沖洗液、胸水、痰以及腹水內的細胞的收集可用濃集法，該種方法可因為各種因素破壞惡性腫瘤細胞并將分化良好的腺癌細胞與增生細胞形態相混淆，或者脫落到漿膜腔中腫瘤細胞較少等現象，細胞學檢查具有較低的靈敏度，影響診斷惡性胸腹水的臨床效果。有研究顯示，多種生化指標聯合鑒別胸腹水性質，提高惡性胸腹水的準確度、特異度以及靈敏度，但是，該種方法只在腫瘤細胞脫落于漿膜腔積液或者胸腹腔積液內的的效果最佳[9]。

該研究顯示經過細胞蠟塊檢查觀察組檢出率為75.00%高于對照組，這與黃榕芳等[10]的研究中，細胞蠟塊組檢出率78%高于常規細胞學檢查組的結果一致;觀察組患者經過細胞蠟塊HE染色后背景較為干凈，同時，腫瘤細胞異型性明顯，呈腺管狀和乳頭狀排列;轉移性惡性胸腹水中的moc-31表現敏感，定位明確;在大部分腺癌中CEA具有較高的表達水平，染色背景較重。細胞病理學與組織病理學比較，傳統細針吸取涂片存在缺點如下：難以還原組織學結構、難以進行特殊染色、樣本量少以及無法重復切片等。主要用于惡性胸腹水篩查或者提供傾向性診斷依據。傳統細胞學所存在的缺陷可通過細胞蠟塊檢查技術進行彌補，細胞蠟塊檢查具有多種優點如微創性、可重復切片、簡便。細胞蠟塊的臨床意義如下：①細胞蠟塊在檢查腫瘤細胞可以觀察到細胞分型，有助于患者后續治療，細胞蠟塊技術的準確性比脫落細胞學高，儲存方便，診斷明確度高[11]。②細胞蠟塊切片可以避免經過常規檢查的惡性胸腹水患者因過氧化氫酶增多而產生泡沫引起脫片的現象。③細胞蠟塊腫瘤標志物可以節省試劑，避免檢查邊緣現象的發生，檢查準確性提高。

綜上所述，細胞蠟塊與常規細胞學檢查相比，惡性胸腹水患者檢出率明顯提高，腫瘤病灶來源可以被確定，臨床確診率升高，幫助臨床醫師做到對癥治療，減少患者痛苦，值得臨床推廣應用。

[參考文獻]

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[8]? 王志祥，趙秀平，禹立芳，等.免疫細胞化學和形態學分析對良惡性胸腹水鑒別診斷的作用[J].中國老年學雜志，2015， 35（5）：1258-1260.

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[10]? 黃榕芳，何誠，朱偉峰. 細胞蠟塊技術與傳統涂片技術在胸腔積液病理診斷中的應用效果比較[J].福建醫藥雜志，2016，38（2）：94-96.

[11]? 胡瓊.細胞蠟塊技術在胸腔積液診斷中的應用研究[J].世界最新醫學信心文摘，2018，18（16）：158-160.

（收稿日期：2019-04-26）