火罐法對(duì)住院心血管病患者人蛋白激酶C與磷酸肌醇3-激酶的影響研究

賴家春，鄒輝標(biāo)，董立蕓，陳盛安，沈冠男，楊澤福，趙學(xué)峰，謝祥棟，楊希立

目前缺血性心血管病的治療主要以血運(yùn)重建及抗血小板、調(diào)脂等為主［1-6］，上述治療雖然明顯降低了心血管病致死、致殘率，但常規(guī)血運(yùn)重建不能降低患者的心肌梗死或死亡風(fēng)險(xiǎn)，且血運(yùn)重建減輕患者癥狀的效果僅能持續(xù)1～3年，特別是對(duì)經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療患者［7］。自心肌缺血預(yù)適應(yīng)概念的提出，且受后來(lái)的遠(yuǎn)端預(yù)缺血概念的影響，預(yù)缺血研究逐漸引起學(xué)者們的重視；目前主要是在術(shù)前、術(shù)中使用球囊多次、短時(shí)阻塞動(dòng)脈造成短暫性缺血，或是利用袖帶在上肢多次充氣和放氣，產(chǎn)生預(yù)缺血效應(yīng)，其機(jī)制主要與人蛋白激酶C（PKC）、磷酸肌醇3-激酶（PI3K）的激活及內(nèi)源性腺苷釋放增多等機(jī)制有關(guān)［8-11］。目前上述預(yù)缺血方法有創(chuàng)及不易被接受。我國(guó)傳統(tǒng)的火罐法是將火罐吸附于皮膚造成局部初始毛細(xì)血管擴(kuò)張，而后出現(xiàn)毛細(xì)血管通透性增加及損傷，導(dǎo)致預(yù)缺血，并有應(yīng)用于治療缺血性疾病的相關(guān)研究［12-16］，而皮膚是人體最大的器官，修復(fù)能力強(qiáng)，且火罐法是我國(guó)傳統(tǒng)的保健方法，易被患者接受。為此，本研究采用病例對(duì)照研究方法，探究火罐法對(duì)住院心血管病患者血清PKC、PI3K的影響，旨在為臨床治療提供更多參考。

1 資料與方法

1.1 研究標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 年齡18～70歲，性別不限，預(yù)計(jì)可住院1周以上，無(wú)出血性疾病及皮膚感染，自愿接受火罐法治療的住院心血管病患者。

1.1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中國(guó)高血壓防治指南2010》［17］進(jìn)行判定；冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《穩(wěn)定性冠心病診斷與治療指南》［2］；糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中國(guó)2型糖尿病防治指南（2010年版）》［18］；腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》［3］。

1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 本研究開始前4周內(nèi)曾參加過(guò)其他臨床試驗(yàn)；急性冠脈綜合征、高度水腫、高度神經(jīng)質(zhì)、皮膚高度過(guò)敏、皮膚破損、皮膚彈性極差、嚴(yán)重皮膚病、腫瘤、血友病、活動(dòng)性肺結(jié)核、月經(jīng)期、妊娠期、皮膚感染等情況；既往有慢性阻塞性肺疾病、暈厥、慢性胃炎、慢性腎臟病、慢性肝炎、急慢性肝衰竭、貧血、腦血管意外、慢性心功能不全、先天性心臟病、風(fēng)濕性心臟病、支氣管哮喘、類風(fēng)濕、肺結(jié)核、凝血功能異常、血小板減少等病史者。

1.1.4 剔除標(biāo)準(zhǔn) 火罐法前過(guò)饑、過(guò)飽、過(guò)勞、過(guò)渴、發(fā)熱者。1.2 一般資料 選取2017年4月—2018年5月于佛山市南海區(qū)人民醫(yī)院心血管內(nèi)科及綜合科住院的符合納入標(biāo)準(zhǔn)的患者315例。依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法將其分為對(duì)照組和試驗(yàn)組。本研究經(jīng)佛山市南海區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.3 方法

1.3.1 研究方法 對(duì)照組入院后按相關(guān)指南行調(diào)脂、抗血小板、平穩(wěn)血壓等常規(guī)治療，試驗(yàn)組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上行火罐法治療。火罐法以腰背部為火罐法部位，每次共拔4～6個(gè)火罐，連續(xù)5 d，每次以皮膚出現(xiàn)瘀青為度，避免出現(xiàn)水皰，防止感染。

1.3.2 檢測(cè)方法 入院24 h內(nèi)及完成第5天火罐法治療后24 h內(nèi)采集靜脈血3～5 ml，送本院檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測(cè)，離心分離血清（3 000 r/min離心5 min，離心半徑8 cm），取上清液，分3個(gè)0.5 ml離心管密封編號(hào)，于-80 ℃冰箱中保存待測(cè)。采用購(gòu)自上海晶抗生物工程有限公司的PKC試劑盒（ELISA 48T）、PI3K試劑盒（ELISA 48T）及PHOMO酶標(biāo)儀分別檢測(cè)血清PKC、PI3K水平。

1.4 觀察指標(biāo) 收集并比較兩組患者基線資料，包括性別、年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史、冠心病病史。其中吸煙診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中國(guó)臨床戒煙指南（2015年版）》［19］，飲酒診斷標(biāo)準(zhǔn)按《中國(guó)精神障礙分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)第三版（精神障礙分類）》［20］。分別以血清PKC、PI3K水平較基線升高30%定義為有效，比較兩組患者血清PKC水平治療有效情況、血清PI3K水平治療有效情況。比較兩組患者入院時(shí)和出院時(shí)血清PKC、PI3K水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS 8.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，兩組間比較采用成組t檢驗(yàn)，組內(nèi)治療前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者完成試驗(yàn)情況 315例患者中，因個(gè)人原因提前出院3例，中途未完成火罐法治療5例，最后住院滿1周并完成火罐法治療307例，其中試驗(yàn)組158例，對(duì)照組149例。

2.2 試驗(yàn)組與對(duì)照組患者基線資料比較 試驗(yàn)組與對(duì)照組患者性別、年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史、冠心病病史比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，見表1）。

表1 對(duì)照組與試驗(yàn)組患者基線資料比較Table 1 Comparison of baseline data between control group and experimental group

2.3 兩組患者血清PKC水平治療有效情況、血清PI3K水平治療有效情況 對(duì)照組患者血清PKC水平治療有效28例，無(wú)效121例；試驗(yàn)組患者血清PKC水平治療有效117例，無(wú)效41例；試驗(yàn)組患者血清PKC水平治療有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=97.07，P＜0.01）。對(duì)照組患者血清PI3K水平治療有效25例，無(wú)效124例；試驗(yàn)組患者血清PI3K水平治療有效126例，無(wú)效32例；試驗(yàn)組患者血清PI3K水平治療有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=121.65，P＜0.01）。

2.4 兩組患者入院時(shí)與出院時(shí)血清PKC、PI3K水平比較 對(duì)照組患者入院時(shí)與出院時(shí)血清PKC、PI3K水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；試驗(yàn)組患者出院時(shí)血清PKC、PI3K水平高于入院時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表2）。

表2 對(duì)照組與試驗(yàn)組患者入院時(shí)與出院時(shí)血清PKC、PI3K水平比較（±s）Table 2 Comparison of mean serum levels of PKC and PI3K between control group and experimental group at admission and discharge

表2 對(duì)照組與試驗(yàn)組患者入院時(shí)與出院時(shí)血清PKC、PI3K水平比較（±s）Table 2 Comparison of mean serum levels of PKC and PI3K between control group and experimental group at admission and discharge

注：PKC=蛋白激酶C，PI3K=磷酸肌醇3-激酶

組別 例數(shù) PKC（pmol/L） PI3K（μg/L）入院時(shí) 出院時(shí) t配對(duì)值 P值 入院時(shí) 出院時(shí) t配對(duì)值 P值對(duì)照組 149 5.46±1.79 5.52±1.12 -0.34 0.72 15.12±4.41 16.01±4.24 -1.77 0.07試驗(yàn)組 158 5.41±1.86 5.98±1.91 -2.68 ＜0.01 16.95±3.78 18.12±3.53 -2.84 ＜0.01images/BZ_96_1431_2994_1453_3024.png

3 討論

目前國(guó)內(nèi)外指南治療缺血性疾病的主要方法為血運(yùn)重建以改善局部病變?yōu)橹骷八幬镏委煟?-6，21］。有研究認(rèn)為對(duì)于穩(wěn)定型心絞痛患者，經(jīng)血運(yùn)重建可改善其心絞痛癥狀，但預(yù)后并不比最佳藥物治療有更大獲益，經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療并不能改善遠(yuǎn)期預(yù)后［22-23］。近年來(lái)越來(lái)越重視微血管病變的治療，隨著研究的深入也越來(lái)越重視患者對(duì)缺血的適應(yīng)性反應(yīng)［9］。而且缺血預(yù)適應(yīng)還應(yīng)用于皮瓣移植、造影劑腎病等相關(guān)研究［24-25］。中醫(yī)火罐法雖在臨床實(shí)踐中群眾接受程度高，有一定療效，但因缺乏實(shí)驗(yàn)性研究的相關(guān)基礎(chǔ)支持，故主要應(yīng)用于康復(fù)理療，較少應(yīng)用于缺血性疾病的治療。如果進(jìn)一步明確火罐法有預(yù)缺血的效果，加之火罐法已有治療冠心病等缺血性疾病的臨床實(shí)踐，故其有可能更廣泛地應(yīng)用于缺血性疾病的治療。

目前認(rèn)為機(jī)體相關(guān)部位缺血后會(huì)導(dǎo)致PKC激活、PI3K/AKt激活、內(nèi)源性腺苷釋增多等效應(yīng)［8-11］，故本研究對(duì)基線資料進(jìn)行了均衡性檢驗(yàn)，并采用自身前后對(duì)照法，分別對(duì)PKC、PI3K進(jìn)行前后平行對(duì)照。本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組與對(duì)照組高血壓病史、糖尿病病史、糖尿病病史等基線資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明試驗(yàn)組與對(duì)照組基本資料均衡，具有一定的可比性。試驗(yàn)組患者血清PKC、PI3K水平治療有效率高于對(duì)照組，試驗(yàn)組患者出院時(shí)血清PKC、PI3K水平高于入院時(shí)，表明火罐法可有效提高住院心血管病患者血清PKC、PI3K水平。而目前國(guó)內(nèi)外針對(duì)預(yù)缺血方面的研究主要集中在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及手術(shù)過(guò)程中行短暫預(yù)缺血治療［26-31］，未查閱到火罐法應(yīng)用于預(yù)缺血的相關(guān)研究。因此火罐法引起血清PKC、PI3K水平升高的機(jī)制尚不清楚，其可能與火罐法對(duì)局部組織持續(xù)負(fù)壓吸引，導(dǎo)致局部組織較長(zhǎng)時(shí)間的缺血、於血有關(guān)。此外，本研究樣本量較少，后續(xù)仍需進(jìn)一步研究。

綜上所述，火罐法可上調(diào)住院心血管病患者血清PKC、PI3K水平，提高患者生存質(zhì)量，且其本身為一種傳統(tǒng)中醫(yī)治療方法，患者容易接受，臨床開展優(yōu)勢(shì)明顯。