子宮內(nèi)膜癌中Wnt-1、β-catenin與Cyclin D1的表達及臨床意義△

張 玉 洲

(開封市婦產(chǎn)醫(yī)院 開封 475000)

Wnt信號途徑是一類在生物體進化過程中高度保守的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，調(diào)節(jié)控制著眾多生命活動過程、細(xì)胞的增殖分化和腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。β-catenin 是一條由多肽鏈組成的胞質(zhì)內(nèi)蛋白，維持上皮極性及粘附性，是Wnt信號通路中一個重要組成部分[1]。Cyclin D1是G1周期素家族最重要的成員，如Cyclin D1表達失控，將會導(dǎo)致細(xì)胞增殖周期失調(diào)，引起腫瘤發(fā)生、發(fā)展[2]。本研究采用免疫組化SP法對子宮內(nèi)膜癌和正常子宮內(nèi)膜組織中Wnt-1、β-catenin與Cyclin D1蛋白的表達進行檢測，現(xiàn)報道如下。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

從2011年6月～2012年12月開封市婦產(chǎn)醫(yī)院所收集的子宮內(nèi)膜癌石蠟樣本中隨機抽取89例作為研究對象?；颊吣挲g40～60歲，平均年齡(41±18.1)歲。根據(jù)2009年FIGO手術(shù)病理分期標(biāo)準(zhǔn)對參與此次研究的對象進行分類：其中Ⅰ期56例，Ⅱ期18例，Ⅲ～Ⅳ期15例；無肌層浸潤15例，淺肌層浸潤56例，深肌層浸潤18例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移23例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移66例。同時，篩選出30例正常增生期子宮內(nèi)膜標(biāo)本。

1.2 方法

免疫組化試劑鼠抗人單克隆抗體Wnt-1及鼠抗人Cyclin D1單克隆抗體分別標(biāo)記, 購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，SP試劑盒及DAB顯色劑由福建邁新生物技術(shù)有限公司提供。濃縮Wnt-1抗體工作濃度為1∶50。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

此次實驗數(shù)據(jù)處理采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計分析，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05表示差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義[3]。

2 結(jié)果

2.1 Wnt-1表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

實驗數(shù)據(jù)顯示：與正常子宮內(nèi)膜組比較，子宮內(nèi)膜癌組Wnt-1表達(40.4%)明顯較高，P<0.05，見表1。

2.2 β-catenin表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

實驗數(shù)據(jù)表明：子宮內(nèi)膜癌組中的β-catenin陽性表達率(39.3%)明顯高于正常子宮內(nèi)膜組，且P<0.05，說明子宮內(nèi)膜癌中β-catenin的表達與手術(shù)分期、肌層浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05),見表1。

2.3 Cyclin D1表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示：內(nèi)膜癌組的Cyclin D1陽性表達率(44.9%)明顯高于正常子宮內(nèi)膜組(P<0.05)，說明子宮內(nèi)膜癌的手術(shù)分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與Cyclin D1的陽性表達密切相關(guān)(P<0.05),見表1。

表1 子宮內(nèi)膜癌中Wnt-1, β-catenin 和Cyclin D1與臨床病理參數(shù)的關(guān)系[n(%)]

組別水平例數(shù)Wnt-1β-cateninCyclin D1病理分級G16937(53.6)43(62.3)33(47.8)G282(25.0)6(75.0)5(62.5)G3124(33.3)6(50.0)10(83.3)手術(shù)分期Ⅰ5627(48.2)27(48.2)21(37.5)Ⅱ1812(66.7)14(77.8)10(55.6)Ⅲ～Ⅳ1513(86.7)15(100.0)15(100.0)肌層浸潤無1810(55.6)10(55.6)7(38.9)<1/25322(41.5)29(54.7)28(52.8)≥1/21814(77.8)18(100.0)12(66.7)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無6626(39.4)32(48.5)29(43.9)有2319(82.6)23(100.0)22(95.7)

3 討論

Wnt基因是一種原癌基因，其可啟動細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)途徑，稱為Wnt信號途徑。國外研究發(fā)現(xiàn)，采用Wnt-1單克隆抗體作用于Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，能促進多種腫瘤細(xì)胞的凋亡。本研究中Wnt-1在子宮內(nèi)膜癌和正常子宮內(nèi)膜中的陽性表達率分別為40.4%(36/89) 和10.0%(3/30) , 子宮內(nèi)膜癌組明顯高于正常子宮內(nèi)膜組 (P<0.05)。以上種種研究數(shù)據(jù)顯示，子宮內(nèi)膜癌的手術(shù)分期、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移等主要受 Wnt-1陽性表達率的影響。

β-catenin是一組與鈣粘素細(xì)胞內(nèi)區(qū)起作用的相關(guān)蛋白之一，具有雙重調(diào)節(jié)功能，且相互獨立地發(fā)揮作用，相關(guān)研究證實β-catenin作為經(jīng)典的Wnt信號傳導(dǎo)途徑中的核心，具有重要影響。本研究發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌組的β-catenin陽性表達率明顯高于正常子宮內(nèi)膜組，隨著子宮內(nèi)膜癌分期的增加，β-catenin表達的陽性率逐漸上升，說明β-catenin在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展中起著重要作用。

近年來，分子生物學(xué)技術(shù)不斷創(chuàng)新與發(fā)展，越來越多的證據(jù)表明，細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失去正常調(diào)控，參與腫瘤發(fā)生機制，Cyclin D1是細(xì)胞周期素家族的重要成員，在細(xì)胞周期中起正性調(diào)控作用，控制細(xì)胞由G1期進入S期[4]。研究報道，Cyclin D1蛋白的陽性表達與腫瘤的組織學(xué)分級、臨床分期呈正相關(guān)，患者預(yù)后較差[5]。本研究中Cyclin D1在子宮內(nèi)膜癌和正常子宮內(nèi)膜中的陽性表達率分別為44.9% (40/89) 和20.0% (6/30) , 子宮內(nèi)膜癌的手術(shù)分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與Cyclin D1的陽性表達密切相關(guān)。故測定子宮內(nèi)膜癌患者的Cyclin D1蛋白一方面有助于確定子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞分化程度，另一方面可以協(xié)助判斷內(nèi)膜癌的侵襲力及預(yù)后情況。