阿司匹林雙嘧達莫片的含量測定及含量均勻度研究

李 宇，田海燕，崔曉雨，劉洪海△

（1.德州學院職業教育學院，山東 德州 253023； 2.山東省德州市食品藥品檢驗檢測中心，山東 德州 253015）

阿司匹林雙嘧達莫片為腸溶衣與薄膜衣的雙層包衣片，內層含阿司匹林，外層含雙嘧達莫。原標準[1]采用滴定分析法測定阿司匹林的含量，分光光度法測定雙嘧達莫的含量。實際工作中，剝離外層（雙嘧達莫片）時存在迸濺損失，以及迸濺時不確定損失的是主藥成分還是包衣材料，且試驗時間太長，吸濕及刮片也影響內外層的含量測定結果。新標準[2]采用高效液相色譜法測定其含量及含量均勻度，但色譜分析耗時較長。本研究中參考有關標準及文獻[2-4]，建立了紫外分光光度法測定阿司匹林雙嘧達莫片的含量及含量均勻度，現報道如下。

1 儀器與試藥

Tu-1901型雙光束紫外可見分光光度計（北京通用儀器有限責任公司）；XS105 DualRange型電子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Agilent 1260型高效液相色譜儀，含G7114A型紫外檢測器（美國安捷倫科技有限公司）。

阿司匹林對照品（含量99.8%，批號為100113-201405），雙嘧達莫對照品（含量 99.8%，批號為100244-201003），水楊酸對照品（含量99.3%，批號為100106-201605），均購自中國食品藥品檢定研究院。乙腈為色譜純，冰乙酸和四氫呋喃為優級純，其余均為分析純。

阿司匹林雙嘧達莫片，共3批，規格均為每片含阿司匹林75 mg、雙嘧達莫25 mg，分別購自德州博誠制藥有限公司（樣品1，批號為A20171202）、湖北百科亨迪藥業有限公司（樣品2，批號為171002）、湖北百科亨迪藥業有限公司（樣品3，批號為171003）。

2 方法與結果

2.1 測定波長選擇

取雙嘧達莫對照品適量，用0.1 mol/L鹽酸溶液溶解，并稀釋成質量濃度為10 μg/mL的溶液，在200～300 nm波長范圍內掃描，結果在233 nm和284 nm波長處有最大吸收，故以284 nm為雙嘧達莫的測定波長。

取阿司匹林對照品適量，加少量乙醇溶解，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液稀釋成質量濃度為150 μg/mL的溶液，在250～300nm波長范圍內掃描，結果在266nm波長處有最大吸收，故以266 nm為阿司匹林的測定波長。

參照雙嘧達莫層和阿司匹林層，分別將相應輔料用0.1 mol/L鹽酸溶液和pH 6.8磷酸鹽緩沖液溶解，并稀釋成相應濃度，濾過，續濾液分別在200～300 nm和250～300 nm波長處掃描，在相應的吸收波長284 nm和266 nm處無吸收，不干擾主成分的含量測定。

2.2 線性關系考察

雙嘧達莫：取雙嘧達莫對照品10 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并定容。分別吸取 1.0，2.0，3.0，5.0，6.0，7.0，8.0 mL，置 50 mL容量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液定容。在284 nm波長處測定吸光度（A），以質量濃度（C，μg/mL）對A進行線性回歸，得回歸方程C=14.884A+0.278 6，r=0.999 7（n=7）。結果表明，雙嘧達莫質量濃度在4～32 μg/mL范圍內與吸光度線性關系良好。

阿司匹林：取阿司匹林對照品30 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，用少量乙醇溶解，加pH 6.8的磷酸鹽緩沖液定容。分別吸取 2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0 mL，置20 mL容量瓶中，加pH 6.8的磷酸鹽緩沖液定容，在266 nm波長處測定吸光度（A），以質量濃度（C，μg/mL）對A進行線性回歸，得回歸方程C=327.79A-4.081，r=0.999 8（n=7）。結果表明，阿司匹林質量濃度在60～240 μg/mL范圍內與吸光度線性關系良好。

2.3 含量測定

2.3.1 紫外分光光度法

取樣品10片，置小燒杯中，加0.1 mol/L鹽酸溶液適量，超聲溶解雙嘧達莫層，并轉移至1 000 mL容量瓶中，用少量蒸餾水洗滌腸溶衣表面，洗液并入1 000 mL容量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液定容，搖勻，濾過，取續濾液2.0 mL，置50 mL容量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液定容，搖勻，照分光光度法，在284 nm波長處測定吸光度，按標準曲線法計算雙嘧達莫標示量的百分含量。詳見表1。

取上述測定雙嘧達莫后所剩的具有完整腸溶衣的內層10片，置研缽中，研細，加少量乙醇溶解，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液轉移至500 mL容量瓶中并定容，搖勻，濾過，取續濾液5.0mL，置50mL容量瓶中，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液定容，搖勻，照分光光度法在266 nm波長處測定吸光度，按標準曲線法計算占阿司匹林標示量的百分含量。詳見表1。

表1 樣品標示量百分含量測定（%）

2.3.2 高效液相色譜法

取樣品，采用 Agilent Zorbax SB C18柱（250 mm×0.6 mm，5 μm），以乙腈 -四氫呋喃 -冰乙酸 -水（20∶5 ∶5∶70，V/V/V/V）為流動相，柱溫 30℃，流速為1.0 mL/min，檢測波長 276 nm（阿司匹林）、284 nm（雙嘧達莫）[2]。

阿司匹林：理論板數按阿司匹林峰計為14 514，阿司匹林峰保留時間為6.6 min，阿司匹林峰與水楊酸峰及雙嘧達莫峰的分離度分別為5.0和19.6。含量測定結果見表1。

雙嘧達莫：理論板數按雙嘧達莫峰計為5 401，雙嘧達莫峰保留時間為5.3 min，雙嘧達莫峰與阿司匹林峰的分離度為4.9。含量測定結果見表1。

2.4 穩定性試驗

取質量濃度約為10 μg/mL的雙嘧達莫樣品溶液，室溫下放置 0，1.0，2.0，3.0，4.0 h，測定吸光度，結果的RSD為0.11%（n=5）；取質量濃度約為150 μg/mL的阿司匹林樣品溶液，室溫下放置 0，0.5，1.0，1.5，2.0 h，測定吸光度，結果的RSD為0.39%（n=5）。結果表明，2種樣品溶液室溫下在測試時間內穩定。

2.5 回收率試驗

取阿司匹林和雙嘧達莫對照品，分別按標示量的80%，100%，120%配制內層和外層輔料的混合物各3份，用含量測定方法的溶劑分別配制成相應質量濃度的供試液，依法測定，結果見表2。

表2 加樣回收試驗結果（n=9）

2.6 雙嘧達莫含量均勻度測定

3批樣品每批均取10片，分別置10個小燒杯中，加0.1 mol/L鹽酸溶液適量，分次超聲溶解外層（雙嘧達莫層），并轉移至100 mL容量瓶中，依法測定雙嘧達莫含量，得各片含量并計算3批樣品的A+2.2S分別為6.1，7.2，6.7，符合規定，表明含量均勻度較好。

3 討論

參照有關標準[2，5]，建議用2.6項下10份樣品平均標示量的百分含量作為含量的測定值，更易觀察每片雙嘧達莫層的溶解情況。新標準[2]雖然解決了外層雙嘧達莫測定時刮片引起的誤差，但依然存在測定阿司匹林時刮片的費時費力問題。測阿司匹林含量時所用腸溶衣內層應完好無損，無裂縫、崩解或軟化現象。

本研究中還考察了高效液相色譜法，測定結果與紫外分光光度法基本一致。也考察了標準所允許游離水楊酸的最大限量，對結果無影響。紫外分光光度法未采用對人體有害的有機溶劑乙腈、四氫呋喃等，健康環保，且快速準確，可作為測定阿司匹林雙嘧達莫片含量及含量均勻度的方法。