自身抗核抗體譜檢測與干燥綜合征的相關性分析

劉鑒達，周 燕

(重慶市急救醫療中心檢驗科，重慶 400014)

干燥綜合征(SS)是臨床常見的自身免疫性疾病，可為原發病灶也可繼發于其他自身免疫性疾病，其主要特征為單核細胞浸潤淚腺、涎腺等外分泌腺體及全身其他器官，產生相應自身抗體，導致患者出現口咽干燥等癥狀和體征。病理檢查結果顯示SS患者腺體間質常存在大量淋巴細胞浸潤并形成浸潤灶或異位生發中心[1-2]。SS通常起病隱匿，臨床表現復雜，導致早期診斷較為困難，治療易被延誤，患者的康復受到影響。出現自身抗體是自身免疫性疾病的典型標志，對臨床診斷、病情評估、療效觀察和預后判斷均有重要價值，在患者出現明顯癥狀之前即可被檢測到，為早期診斷和治療創造了條件[3]。目前臨床可檢測的自身抗體種類已達百余種，其中自身抗核抗體譜(ANAs)檢測應用較為廣泛，對系統性紅斑狼瘡(SE)、多發性肌炎(PM)等多種自身免疫性疾病的診斷都具有良好的診斷價值[4]。本課題組主要研究了ANAs與SS的相關性，旨在為臨床治療提供信息和參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2016年8月至2018年5月本院SS患者共117例納入本研究(SS組)。其中男31例、女86例，年齡21～76歲，平均(43.72±13.64)歲。根據中華醫學會風濕病學分會《干燥綜合征診治指南(草案)》[5]將上述患者分為原發性干燥綜合征(PSS)和繼發性干燥綜合征(SSS)兩類，其中PSS患者71例，SSS患者46例。納入標準：(1)符合SS診斷標準和分型標準；(2)臨床資料完整；(3)年齡18～80歲；(4)患者及家屬知情同意。排除標準：(1)長期應用免疫調節藥物者；(2)伴嚴重系統性疾病者。另外，選取本院同期健康體檢者120例作為對照組，其中男37例、女83例，年齡18～79歲，平均(45.03±13.27)歲。SS組和對照組性別及年齡構成情況比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2試劑與儀器 抗核抗體檢測試劑盒(德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司生產，規格：1590-1601-3G)，靶抗原包括抗核糖核蛋白抗體(nRNP/Sm)、抗Sm抗體(Sm)、抗干燥綜合征A抗體(SSA)、抗Ro-52抗體(Ro-52)、抗干燥綜合征B抗體(SSB)、抗拓撲異構酶Ⅰ抗體(Scl-70)、抗PM-Scl抗體(PM-Scl)、抗細胞質組酰-tRNA合成酶抗體(Jo-1)、抗著絲點抗體B(CENPB)、抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)、抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA)、核小體、組蛋白、核糖體P蛋白和抗線粒體M2抗體(AMA-M2)。主要檢測儀器為EuRoBlotOne全自動免疫印跡儀。

1.3方法 采集上述納入研究者空腹靜脈血3 mL，室溫保存30 min，3 000 r/min離心10 min后取上清加入緩沖液，1∶101稀釋備用，采用歐盟公司EuRoBlotOne型全自動免疫印跡儀進行檢測。

1.4統計學處理 數據分析采用SPSS19.0軟件，計數資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher精確檢驗，檢驗效能采用logistics回歸分析，若P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1兩組ANAs檢測陽性率分析 除Sm、PCNA、AMA-M2、PM-Scl及Jo-1外，SS組其余10項結果陽性率均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 ANAs檢測陽性率分析[n(%)]

注：-表示該項使用Fisher精確檢驗無χ2值

2.2不同類型SS患者ANAs檢測陽性率分析 117例SS患者中PSS占60.68%(71/117)，SSS占39.32%(46/117)。ANAs檢測結果顯示，PSS患者的nRNP/Sm、Sm、AMA-M2、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白陽性率均低于SSS患者，差異有統計學意義(P<0.05)；兩組陽性率排前三位的檢測項目均依次為SSA、Ro-52和SSB，兩組間三項目檢測的陽性率比較差異均無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同類型SS患者ANAs檢測陽性率分析[n(%)]

續表2 不同類型SS患者ANAs檢測陽性率分析[n(%)]

注：-表示該項使用Fisher精確檢驗無χ2值

2.3ANAs各項與SS相關性的logistic回歸分析 nRNP/Sm、SSA、SSB、Ro-52、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白均為SS的獨立危險因素(P<0.05)，其中SSA、SSB及Ro-52的相關性極高(P<0.001)，見表3。

表3 ANAs各項與SS相關性的logistics回歸分析

2.4ANAs各項與SS分型的logistics回歸分析 nRNP/Sm、Sm、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白與SS的類型有關(P<0.05)，見表4。

表4 ANAs各項與SS分型的logistics回歸分析

3 討 論

SS患者中女性占90%，發病高峰年齡為30～40歲，也可見于中老年人群。國外的研究顯示，普通人群中SSB抗體陽性率約為1/1 000，因而認為SS是發病率僅次于類風濕關節炎的自身免疫性疾病，而我國流行病學統計結果發現SS患病率為0.33%～0.77%，稍高于類風濕關節炎的0.3%～0.4%[6-7]。SS的病因與其他自身免疫性疾病大致相同，也是受遺傳和環境因素共同誘導的復雜疾病。近年來，隨著環境污染加重和生活節奏改變，SS的發病率呈逐年上升趨勢。SS發病后，活動期和緩解期交替出現，因缺少特效治療方法，病情遷延難愈，可導致腎功能受損等嚴重并發癥，造成患者殘疾甚至死亡。SS患者臨床表現復雜多變，缺少特異性，早期診斷較為困難，治療容易被延誤，因此積極探尋更加合理、有效的檢測方法用于SS的早期診斷對治療效果和改善預后均具有重要意義[8-9]。

ANA指以機體細胞核相關成分為靶抗原的自身抗體，其常見作用位點包括核酸、組蛋白、磷脂以及各種蛋白酶等物質，以及細胞質或細胞器中的部分成分。因SS發病主要是由各種因素導致的自身免疫功能紊亂和自身抗體反應，ANAs檢測作為臨床常用靶抗原確認實驗，對SS等自身免疫性疾病的診斷和鑒別具有重要作用[10-11]。本研究顯示，117例SS患者nRNP/Sm、SSA、SSB、CENPB、Ro-52、Scl-70、Jo-1、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白等10項ANAs檢測項目陽性率均顯著高于對照組。進一步分析不同類型SS患者ANAs檢測結果發現，PSS患者nRNP/Sm、Sm、AMA-M2、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白陽性率均顯著低于SSS患者，其原因可能是因為上述指標在SSS患者原發疾病中可出現陽性表達，可在特定情況下用于PSS和SSS的鑒別診斷。而SSA、SSB及Ro-52在117例SS患者中的陽性率分別為60.68%、30.77%、56.41%，與對照組比較陽性率差異有統計學意義，不同類型的SS患者陽性率差異無統計學意義，提示此3項指標對SS診斷具有高度特異性，與陸歡平等[12]的研究結果具有一致性。

logistics回歸是醫學研究中常用數學模型[13]。本研究采用logistics回歸分析了ANAs各項檢測與SS和SS分型的相關性，發現nRNP/Sm、SSA、SSB、Ro-52、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白與SS均具有良好的相關性，而且以SSA、SSB、Ro-52相關性最為突出，其OR值分別為4.166、4.600和5.150。SSA、Ro-52是由小分子RAN及相應蛋白組成的核糖核蛋白顆粒，SSB為小分子核糖核蛋白顆粒，其中SSA和Ro-52可在多種自身免疫性疾病發現，其用于SS診斷的靈敏度較高，但特異性稍低于SSB[3]，本研究中SS患者SSB檢測的陽性率僅為30.77%，也證實了其靈敏度較低而特異性較高的特點。進一步采用logistics回歸分析研究各項ANAs檢測指標與不同類型SS的相關性，結果顯示nRNP/Sm、Sm、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白等指標與SS的分類相關，分析原因可能是這些指標在其他免疫性疾病中呈陽性表達，而在PSS和SSS患者中的表達水平呈現明顯差異，從而可有效鑒別PSS和SSS。

4 結 論

綜上所述，ANAs檢測15項指標中SSA、SSB及Ro-52與SS的相關性極高，nRNP/Sm、Sm、PM-Scl、ds-DNA、核小體、組蛋白及核糖體P蛋白診斷SS時特異性較差，但在特定情況下與SS的類型相關，可為疾病的篩查、分類等方面提供依據。