南天竹根浸液的急性毒理實驗*

邱志潔 王 滔 李茹茹 顏珍瑜

中藥南天竹根，又名鉆石黃、土黃連、山黃連等，據《福建民間草藥》記載，其性苦寒，具有清熱除濕、祛風止癢、止咳化痰等功效，常用于治療急性黃疸、各類風濕痛、瘡瘍毒腫等疾患。前期研究小組用被動皮膚過敏方法[1，2]來建立大鼠 I型過敏反應動物模型， 使用南天竹根浸液進行干預處理，結果顯示小鼠背部皮膚過敏反應明顯降低，血清中的 IgE含量也明顯減少， 從而初步肯定了南天竹根浸液對過敏反應的治療作用及抗過敏機制[3]。 為進一步研究南天竹根浸液臨床應用的安全性，本研究將通過小鼠灌胃給藥，觀察小鼠中毒癥狀，計算小鼠的半數致死量或最大耐受量，為指導臨床用藥提供依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物40只ICR小鼠，半雄性半雌性，排除特定病原體環境(SPF級)，8～12周齡，體質量18～22 g。由福建中醫藥大學實驗動物中心提供實驗動物并飼養于SPF級環境。

1.2 實驗藥物南天竹根浸液的制備：南天竹根200 g，加水浸泡30 min，煎煮2次，第1次2 h，第2次1.5 h，合并煎液，濾過，離心，濃縮到500 ml濾液備用。0.9%的氯化鈉注射液：由福建省第三人民醫院提供。

1.3 儀器電子天平(精確到0.01 mg)、醫用注射器、組織剪、有齒鑷等均由福建中醫藥大學實驗動物中心提供。

1.4 動物分組將40只ICR小鼠隨機分成南天竹根浸液組和對照組，每組小鼠20只(半雄性和半雌性)，用3%苦味酸標記小鼠，并在耳朵上使用籠牌進行標記。

1.5 灌胃方法將40只小鼠(半雌性半雄性)禁食12 h，仍然正常飲水，使用南天竹根浸液組以3次/d的頻率給予小鼠灌胃，每次給藥時間間隔8 h；對照組給予相同劑量的生理鹽水對照灌胃。

1.6 半數致死量(LD50)的測定南天竹根浸液組小鼠按最大灌胃體積0.05 ml·g-1給藥，3次/d，對照組同上。灌胃后每天早、晚各觀察1次，同時連續觀察2周。使用 Bliss’s 法觀察2組小鼠死亡數量并計算相應的 LD50。動物急性毒理實驗觀察項目見表1。

表1 動物急性毒理實驗觀察表

1.7 最大給藥量的測定每次給藥后，觀察以下檢測指標:動物自由攝取食物量和飲水量，根據表1觀察動物的一般活動和存活情況，并詳細記錄小鼠自發活動、肌肉運動、對外反應、精神狀態、呼吸飲食、大小二便及毛色、分泌物情況等；若在給藥時間段內出現小鼠死亡，則要詳細記錄該時間段內小鼠死亡發生時間、死亡數量和主要毒性反應表現等。通過2周的持續觀察，分別記錄1、4、7、14 d 體質量變化及小鼠死亡情況。在給藥第14天后，處死存活的小鼠并進行逐只處死解剖，肉眼觀察心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和胃、腸以及胸腔、腹腔等重要臟器、器官是否發生顏色變化、形態異常改變以及其他病理改變等。

2 結果

2.1 半數致死量(LD50)的測定結果給藥后，小鼠狀態正常，觀察期間，所有老鼠全部存活，未表現出明顯的異常，因此，未測得LD50。

2.2 最大給藥量的測定結果小鼠最大給藥劑量=0.4(南天竹根浸液最大濃度)×0.5(最大給藥體積)×20.4(小鼠平均質量)×3(灌胃次數)×1000(單位統一換算)=122.4 g·kg-1。灌胃給藥后，小鼠無明顯中毒反應，呼吸、心率、自主和行為活動均無明顯異常改變，未觀察到眼球出現分泌物、眼球突出等現象，大小二便情況也均無異常。觀察期間，實驗小鼠攝食飲水正常，體質量增加，一般情況良好。見表2。實驗結束后對處死動物進行解剖、形態學觀察未見明顯的臟器官改變。

表2 南天竹根浸液急性毒理實驗小鼠體質量變化 (只，

注：與對照組比較，P>0.05

3 討論

隨著城市化加劇和工業化水平的飛速提升，過敏反應性疾病的患病幾率在全世界范圍內呈現出逐年增加的勢頭，過敏性疾病已經成為現階段各個國家政府部門高度關注的全球性健康問題。世界變態反應組織(World Allergy Organization)在世界首個過敏疾病日發布了對全世界30多個國家進行的過敏性疾病流行病學調查結果，調查結果表示在這30多個國家的12億總人數中，超過22%的人口患有由傳統免疫途徑IgE介導的過敏性疾病[4]。近年來我國針對0～24個月城市小兒過敏性疾病也展開了流行病學的調查，其結果顯示小兒過敏性疾病的發病率已經超40.9%[5]，過高的發病率在給人們生命健康財產造成威脅的同時，也在經濟上帶來了沉重的負擔。有研究機構調查顯示過敏性疾病所造成的社會負擔甚至大于艾滋病與肺結核的總和。因此，進一步探索過敏性疾病的發病機制以及積極尋求有效的診療手段和治療方法已成為目前廣泛關注和亟需解決的難題。

南天竹根是福建地區特有的一味中藥，臨床上常用于小兒濕疹、皮炎等疾病的治療，且療效顯著。前期實驗已初步證實了南天竹根對過敏性小鼠皮炎有著良好的治療作用，本課題進一步研究顯示南天竹根浸液作用于小鼠的最大給藥量為122.4 g·kg-1，相當于成人用量的195.8倍，從而可以看出南天竹根口服毒性極小，其用量安全可靠。