鄒學(xué)紅 汪 俊 王 芳 謝 環(huán)
(湖北省武漢市漢陽(yáng)醫(yī)院,湖北 武漢 433000)
急性盆腔炎(APID)是指女性內(nèi)生殖器及盆腔腹膜等部位的炎癥性疾病[1],主要表現(xiàn)為慢性下腹痛、嘔吐、惡心、月經(jīng)紊亂等癥狀,且由于該病炎癥擴(kuò)展范圍不同,患者臨床表現(xiàn)并不完全一致[2]。APID炎癥嚴(yán)重者可引發(fā)感染性休克、彌漫性腹膜炎等并發(fā)癥。NLRP3炎癥小體參與多種炎癥反應(yīng),可促進(jìn)白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)前體轉(zhuǎn)化為有活性的IL-1β,使其加重炎癥反應(yīng)。張強(qiáng)等研究報(bào)道NLRP3炎癥小體在腎臟炎癥損傷早期過(guò)程發(fā)揮重要作用[3]。研究報(bào)道,抑制NLRP3的表達(dá),可減弱慢阻肺、心肌損傷等疾病中的炎癥反應(yīng),但關(guān)于NLRP3在APID中的研究尚未見(jiàn)報(bào)道[4]。金剛藤顆粒具有解熱清毒、抗菌消腫的作用,可用于盆腔炎等婦科疾病的治療[5]。本研究采用金剛藤顆粒治療APID大鼠,探究其對(duì)大鼠NLRP3炎癥小體及免疫功能的影響,以期為臨床治療APID的機(jī)制提供更多的思路。現(xiàn)報(bào)告如下。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雌性SD大鼠105只由武漢大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(鄂)2014-0004,使用許可證號(hào)SYXK(鄂)2014-0013,體質(zhì)量200~220 g。按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理規(guī)定飼養(yǎng),大鼠自由飲水,保持室內(nèi)通風(fēng)良好,光照時(shí)間為8∶00~20∶00,溫度為18~28℃,濕度為40%~70%。
1.2 試藥與儀器 1)試藥。金剛藤顆粒購(gòu)于廣西潤(rùn)達(dá)制藥股份有限公司,批號(hào)Z20030062;十二烷基硫酸鈉(SDS)、蛋白酶抑制劑、RIPA裂解液購(gòu)于北京索萊寶科技有限公司;4%多聚甲醛、DEPC水購(gòu)于江蘇恒瑞醫(yī)藥有限公司;IL-1β,IL-18 ELISA試劑盒購(gòu)于北京全式金生物有限公司;Anti-NLRP3、Anti-IL-1β、Anti-Caspase-1、Anti-ASC、Anti-β-Actin購(gòu)于北京博奧森生物技術(shù)有限公司;……