回顧分析血型紅細胞不規則抗體篩查及鑒定結果

徐勇結 邱東飚

福建醫科大學附屬第一醫院輸血科，福建省福州市 350005

不規則抗體產生于除了ABO血型系統外的其他血型系統中，也稱意外抗體。不規則抗體的產生給臨床輸血帶來了許多困擾，輕者引起寒戰、發熱，影響治療效果，重者產生溶血性輸血反應，危及生命[1]。因此，在臨床輸血前進行血型不規則抗體篩查意義重大，不可免之。本文對我院28 554例入院患者血型紅細胞進行不規則抗體篩查，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1—12月收治于我院的28 554例患者的血型標本作為觀察對象，其中男15 733例,女12 821例,年齡1～85歲,平均年齡(47.7±4.5)歲，入院前有輸血史6 089例，無輸血史22 465例；女性中有妊娠史9 738例，無妊娠史3 083例。

1.2 檢測方法

1.2.1 血型不規則抗體篩查： 所有患者在入院后(輸血治療前)第2天晨起空腹采集靜脈血5ml置于EDTA-K2抗凝管中, 室溫下離心、分離血漿。用生理鹽水將篩選紅細胞懸液配制成0.8%～1%的紅細胞懸液(10μl壓積紅細胞懸浮于1ml生理鹽水中)。取抗人球蛋白凝膠卡，每份待檢樣本標記3孔，分別標記為“Ⅰ”“Ⅱ”“Ⅲ”。每孔按照標記加入相應的0.8%～1%不規則抗體篩選紅細胞懸液各50μl。向標記的每孔中分別加入待檢者的血漿25μl，將微柱凝膠檢測卡垂直豎立，輕敲混勻加樣槽中的血漿與紅細胞懸液。置于免疫微柱孵育器中37℃孵育15min。置于專用離心機離心。離心結束后，取出觀察判定結果并記錄。結果判斷：篩選紅細胞產生凝集或溶血，即為陽性；整個過程既無溶血又無凝集，表明被檢血漿中不存在與試劑紅細胞上抗原相應的抗體，即為陰性。

1.2.2 血型不規則抗體鑒定：對于抗體篩查陽性標本進行鑒定實驗，取小試管10支，分別做1～10標記，分別加入被檢者血清2滴，然后加入1～10號譜細胞試劑各1滴。將上述混勻后，根據需要(4℃，室溫，37℃)放置數分鐘，以1 000rpm離心1min，肉眼觀察凝集度，對照細胞譜反應格局表判別抗體特異性。

1.3 統計學方法 應用SPSS18.0統計軟件進行數據分析, 計數資料以率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 28 554例入院患者血型不規則抗體篩檢結果 28 554例入院患者(輸血治療前)中檢出不規則抗體陽性96例，抗體陽性率0.34%，其中特異性抗體以Rh血型系統抗體最為多見，其余為MNs、Kidd、Duffy、Lewis血型系統的不規則抗體。特異性抗體84例占87.5%(84/96),主要為抗-E、抗-c、抗-M；非特異性抗體12例占12.5%(12/96)，主要為自身抗體。84例特異性抗體分布情況見表1。

表1 84例特異性抗體分布情況

2.2 不規則抗體在不同人群中的分布情況 本次調查中發現女性不規則抗體陽性率高于男性，差異有統計學意義(P<0.05)；不規則抗體篩查陽性者與既往是否有妊娠和輸血史密切相關，差異有統計學意義(P<0.05)。具體見表2。

表2 不規則抗體在不同人群中的分布情況

3 討論

輸血安全是臨床醫療安全的重要組成部分。隨著輸血醫學的發展和進步，臨床輸血治療前必須進行患者與獻血員的血液配對實驗，即交叉配血，配血合格的才能給患者輸注。由于不規則抗體的產生，會對血型鑒定和交叉配血產生干擾，往往需要花一定的時間才能選擇出合適的血液，這對急診搶救患者是非常不利的，錯誤的輸注含有不規則抗體的血液還有可能帶來輸血反應的風險。 為避免可能出現的輸血和醫療安全隱患，迫切需要發現血型紅細胞不規則抗體并且對其特異性做出準確鑒定，以避免因不規則抗體所引起輸血不良反應, 確保輸血安全有效。

本文結果顯示，在28 554例入院患者血型標本中檢出的不規則抗體96例，陽性率為0.34%，與朱偉彥等[2]報道的0.36%基本相符；低于姚瑞英等[3]報道的0.49%。從表1可以看出，檢出的特異性抗體中，主要為Rh血型系統，這主要是因為除了ABO血型系統之外，最具有臨床意義的就是Rh血型系統。Rh系統中抗原性最強的是RhD抗原，僅次于抗原A和抗原B，但是本研究不規則抗體中Rh血型系統卻是抗-E抗體占的比例最高，達到了73.33%(44/60)，這是因為在人血清中不存在抗Rh的天然抗體，只有當Rh陰性者在接受Rh陽性的血液后，才可能產生抗Rh的抗體。而目前Rh D抗原已經成為輸血前的常規檢查項目，Rh D陰性患者很大程度上輸注的都是Rh D陰性的紅細胞，減少了產生抗-D的機會。此外，由于我國漢族人群中Rh E陽性率為47%[4]，Rh E陰性患者輸入Rh E陽性血液的概率遠遠高于Rh D，多次輸血的患者易產生抗-E抗體。由于血型鑒定中未把抗原E、c、C、e列入常規檢測項目，抗原E、c、C、e的輸血產生抗體的概率就大大提高，對于已產生抗體的患者再次輸入含有該抗原的血液有可能誘發溶血性輸血反應。因此，對于在臨床上多次輸血的患者需要更加重視。

此外，本研究還檢出非特異性抗體12例占12.5%，為自身抗體。自身抗體是免疫疾病的重要標志，常見于系統性紅斑狼瘡、自身免疫性溶血性貧血、重癥肌無力、類風濕性關節炎等疾病。由于自身抗體對自身紅細胞有自凝效應，臨床上需要先排除自身抗體的干擾才能進行血型鑒定和交叉配血。本文還檢出了MNs、Kidd、Duffy、Lewis血型系統的不規則抗體，在臨床輸血過程中也需要引起重視，選擇該抗體對應抗原陰性血液輸注，保證輸血安全。

表2顯示不規則抗體在不同人群中分布是有差異的，女性患者陽性率明顯高于男性；有輸血史和妊娠史的患者陽性率高于無輸血史和妊娠史者。輸血和妊娠的共同點就是給人體帶來了外來免疫刺激，而女性患者帶來的刺激是雙重的(既有輸血的免疫又有妊娠的免疫)，說明不規則抗體的產生主要跟免疫刺激有關。因此，輸血前了解患者臨床資料極為重要，特別是有過輸血史的妊娠女性，進行不規則抗體篩查時需提高篩查力度和篩查級別，以免漏檢，以便指導臨床用血[5]。筆者建議輸血科醫生在患者每次需要輸血時，必須重新抽取血液標本進行不規則抗體復查，當篩查到陽性時，必須鑒定出抗體特異性，進而針對抗體特異性篩選出對應抗原陰性血液，做出正確的血液選擇，才能保證輸血安全有效；同時抗體篩查陽性結果必須記錄檔案并且永久保存，以方便查閱。

綜上所述，通過對入院患者血型標本進行常規紅細胞不規則抗體篩查，從而防止因為輸注含有某抗體相應抗原的血液而引起溶血性輸血反應，提高輸血安全性，具有臨床推廣應用的價值。