HPV-1婦科抑菌凝膠曦曦愛(ài) 抗HPV感染的臨床有效性評(píng)價(jià)

多曉玲，侯春麗，董 凱，殷 民*

（1.濟(jì)南市第五人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東 濟(jì)南 250022； 2.陸軍軍醫(yī)大學(xué)解剖學(xué)教研室，重慶市生物力學(xué)與組織工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400038； 3.山東省榮成市人民醫(yī)院，山東 威海 264300； 4.濟(jì)南市第五人民醫(yī)院腫瘤科，山東 濟(jì)南 250022）

1974年，德國(guó)科學(xué)家Haraldzur Hausen首次發(fā)現(xiàn)人類乳頭瘤病毒 （Humanpapillomavirus， HPV）并提出HPV與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[1]。研究發(fā)現(xiàn)在約90%宮頸癌組織中可檢測(cè)到人類乳頭瘤病毒，其中HPV16和HPV18等高危型HPV感染與宮頸癌密切相關(guān)，就目前而言HPV感染是宮頸癌及其癌前病變的必要因素這一點(diǎn)已成為共識(shí)[2]。不是所有的HPV病毒都能引起宮頸癌，目前已探明的高危亞型主要16、18、31、52和58[3]，且它們?cè)趯m頸癌中比例并不相同[4]，大多數(shù)HPV病毒可被免疫系統(tǒng)清除，但也有文獻(xiàn)報(bào)道因?yàn)槟承┰颍庖呦到y(tǒng)無(wú)法清除病毒，反復(fù)感染或交叉感染最終引起宮頸癌[5]。

至今，還沒(méi)有完全能用于治療HPV感染的特效藥，而HPV疫苗主要針對(duì)HPV16、18在內(nèi)的常見(jiàn)HPV型別具有預(yù)防作用，對(duì)其它型別的交叉預(yù)防作用有限。由于各種原因，我國(guó)的預(yù)防性HPV疫苗剛剛上市，免疫接種工作正在開(kāi)展。但臨床多認(rèn)為對(duì)不同人群開(kāi)展常規(guī)HPV及宮頸細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的篩查更為重要，可做到早期預(yù)防、早期治療。江蘇潤(rùn)潔生物研發(fā)的曦曦愛(ài)HPV-1婦科抑菌凝膠（Immunoglobulin of yolk，IgY）卵黃抗體產(chǎn)品是目前為數(shù)不多的具有良好前景的制劑，他作為納米脂質(zhì)體化抗HPV抗體產(chǎn)品不僅能有效清除宮頸及陰道部游離的HPV病毒顆粒，阻斷病毒的進(jìn)一步感染，還可以滲透陰道粘膜，進(jìn)入宮頸粘膜內(nèi)中和HPV病毒及早起表達(dá)的病毒相關(guān)蛋白E6、E7。本研究選取山東濟(jì)南市立五院和榮成市人民醫(yī)院2017年10月～2018年8月HPV感染患者120例，給與曦曦愛(ài)治療，有效的抑制HPV感染，現(xiàn)做如下報(bào)道。

1 資料和方法

1.1 一般資料

“曦曦愛(ài)HPV-1婦科抑菌凝膠（卵黃抗體）”為江蘇潤(rùn)潔生物科技有限公司研制開(kāi)發(fā)的用于臨床HPV病毒感染的高科技產(chǎn)品，可用于健康人群的常規(guī)預(yù)防、HPV感染的高危人群、反復(fù)感染婦科炎癥的女性、檢測(cè)出HPV陽(yáng)性的女性以及子宮頸癌患者手術(shù)后防止復(fù)發(fā)的輔助治療。為觀察產(chǎn)品療效，總結(jié)臨床數(shù)據(jù)，分別選取2017年10月～2018年8月HPV感染陽(yáng)性患者120例使用該產(chǎn)品對(duì)比重組人干擾素a-2b凝膠進(jìn)行治療，觀察HPV陽(yáng)轉(zhuǎn)陰情況，評(píng)價(jià)曦曦愛(ài)的治療效果。

1.2 篩選標(biāo)準(zhǔn)

選擇門診及健康管理中心HPV陽(yáng)性患者120例，年齡23～62歲。納入標(biāo)準(zhǔn)包括：一過(guò)性感染、持續(xù)或反復(fù)感染患者，包括部分輕度細(xì)胞學(xué)改變（CIN Ⅰ級(jí)以下）的患者，剔除CIN Ⅱ及以上、罹患宮頸癌以及宮頸癌術(shù)后患者。兩組患者在年齡、病程、疾病特征等方面均無(wú)顯著性差異。

1.3 治療方法

曦曦愛(ài)HPV-1婦科抑菌凝膠（卵黃抗體），規(guī)格：2.5 g/支，由江蘇潤(rùn)潔生物科技有限公司生產(chǎn)提供。批號(hào)：20170601，連續(xù)使用3個(gè)月，第1、2個(gè)月除月經(jīng)期，連續(xù)使用本產(chǎn)品，每天1支；第3月隔日使用。停用8周后復(fù)查。

重組人干擾素 α-2b 凝膠,兆科藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：S20010054，生產(chǎn)批號(hào)：20170612。放在帶有刻度的陰道上藥推助器內(nèi)，緩慢將其放在宮頸表面與宮頸管上，幫助患者平躺0.5 h左右，1 g/次,隔日使用。治療3個(gè)月，停用8周后復(fù)查。

1.4 樣本采集、分析

在患者非月經(jīng)期取樣，取樣前避免陰道內(nèi)用藥；使用獲得藥監(jiān)局認(rèn)證的專用一次性宮頸細(xì)胞取樣系統(tǒng)進(jìn)行取樣，切忌使用棉拭子取樣；檢測(cè)所需樣本為宮頸脫落細(xì)胞而非宮頸分泌物，取樣前一定要求使用棉拭子將宮頸分泌物擦拭干凈，盡量避免樣本中含過(guò)多的血液及黏液；按照廠家提供一次性宮頸細(xì)胞取樣系統(tǒng)說(shuō)明書進(jìn)行取樣。采用廣東凱普生物科技股份有限公司的檢測(cè)產(chǎn)品：21種HPV分型檢測(cè)試劑盒（PCR+膜雜交法）對(duì)HPV陽(yáng)性患者治療前后進(jìn)行檢測(cè)，判定HPV陽(yáng)轉(zhuǎn)陰的情況。

HPV-DNA 核酸定量檢測(cè)方法：采用 PCR 體外擴(kuò)增法檢測(cè)(HR-HPV)DNA含量。

1.5 治療效果評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：治療3個(gè)月，隨訪8周后復(fù)查。將HPV轉(zhuǎn)陰評(píng)為痊愈；將HPV檢測(cè)后至少有一種亞型轉(zhuǎn)陰或可見(jiàn)HPV DNA核酸定量較治療前相比下降評(píng)為有效；將HPV檢測(cè)后仍表現(xiàn)為持續(xù)陽(yáng)性評(píng)為無(wú)效；以治愈及好轉(zhuǎn)之和作為總有效。

1.6 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié) 果

全部120例患者中，單一HPV感染為82例，占68.3%；兩型HPV感染者28例，占23.3%；三重感者10人，占8.4%。其中高危型以16、18、31、45、52、58型為主，低危型以6、11、42、81型為主，且治療過(guò)程中均未見(jiàn)不良反應(yīng)。

2.1 曦曦愛(ài)治療組和干擾素治療組治療前后HPV DNA核酸含量變化

曦曦愛(ài)治療組和干擾素治療組治療前HPV DNA含量無(wú)明顯差異(P＞0.05),而治療后兩組患者HPV DNA含量明顯降低，且曦曦愛(ài)治療組HPV DNA含量降低顯著（P＜0.05）。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 兩組患者治療前后HPV DNA含量檢測(cè)情況比較

表1 兩組患者治療前后HPV DNA含量檢測(cè)情況比較

分組 n HPV DNA含量（IU/ml）images/BZ_9_1393_2499_1394_2503.png治療前 治療后干擾素治療組 60 5.17±1.13 3.01±0.87曦曦愛(ài)治療組 60 5.51±1.63 0.34±0.22

2.2 曦曦愛(ài)治療組和干擾素治療組臨床有效性對(duì)比

干擾素治療組總體有效率為63.3%，曦曦愛(ài)治療組總體有效率為96.6%，曦曦愛(ài)治療組的總體有效率顯著高于干擾素治療組(x2=20.833，P=0.00001)。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者臨床療效比較[n(%)]

3 討 論

宮頸類疾病是一種常見(jiàn)的婦科疾病，可發(fā)生在各個(gè)年齡階段，患者在患有宮頸類疾病時(shí)可同時(shí)伴有HPV感染，HPV感染若無(wú)法擊時(shí)清除，可能會(huì)發(fā)展為不同級(jí)別的宮頸癌，對(duì)女性的身心健康造成巨大威脅[6]。研究表明，只有高危型HPV具有致癌能力，高危型HPV由DNA和蛋白質(zhì)外殼組成，且在多種宮頸癌細(xì)胞系中能檢測(cè)到整合進(jìn)宿主基因組內(nèi)的HPV DNA序列[7]。當(dāng)HPV在宿主細(xì)胞內(nèi)完成增殖過(guò)程以后，隨病毒顆粒釋放可感染其他細(xì)胞，造成對(duì)宿主的反復(fù)感染，持久高危型HPV感染可誘導(dǎo)宮頸細(xì)胞癌變。流行病學(xué)分析顯示，由HPV感染到宮頸癌的發(fā)生，時(shí)間跨度可長(zhǎng)達(dá)十余年[8]。因此早期控制HPV感染，可能成為宮頸防治的關(guān)鍵。

就目前來(lái)講，對(duì)于HPV的治療沒(méi)有機(jī)理明確，費(fèi)用低廉的特效藥。雖然HPV疫苗研發(fā)已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展，但疫苗接種周期長(zhǎng)，生產(chǎn)成本較高，疫苗的覆蓋面較窄，不能滿足所有HPV亞型的預(yù)防需求。目前尚無(wú)治療性疫苗用于臨床，因此，尋找一種可對(duì)抗HPV病毒感染，又具有治療作用的產(chǎn)品，是世界各國(guó)女性的迫切需求，也是當(dāng)前臨床工作的一項(xiàng)重要課題。江蘇潤(rùn)潔生物科技有限公司研發(fā)生產(chǎn)的“曦曦愛(ài)HPV婦科抑菌凝膠”是一種采用微環(huán)DNA技術(shù)制備的抗HPV特異卵黃抗體產(chǎn)品，作為一種全新的被動(dòng)免疫方法，顛覆了目前接種疫苗預(yù)防宮頸癌的傳統(tǒng)模式。這種納米脂質(zhì)體化的HPV卵黃抗體（Immunoglobulin of yolk，IgY）制劑具有很強(qiáng)的滲透能力和延效作用，會(huì)滲透陰道粘膜并進(jìn)入宮頸粘膜細(xì)胞內(nèi)中和HPV病毒顆粒及HPV早期應(yīng)答蛋白E6、E7，可用于治療和輔助治療HPV病毒感染。

在本次研究中采用的曦曦愛(ài)抗HPV婦科抑菌凝膠是一種無(wú)毒高效的抗HPV制劑，不僅含有通過(guò)微環(huán)DNA技術(shù)制備的HPV IgY抗體[9-10]，還含有高效滅菌成分鹽酸聚六亞甲基雙胍（PHMB），可能迅速作用于細(xì)菌或真菌的細(xì)胞壁細(xì)胞膜系統(tǒng)高效殺滅病原體[11]。總結(jié)其優(yōu)勢(shì)在于，曦曦愛(ài)可通過(guò)局部給藥直達(dá)患處，直接中和病變局部及其相近的組織細(xì)胞中的病毒顆粒及相關(guān)病毒表達(dá)蛋白，阻斷病毒的侵襲感染及增殖能力，從根本治療或預(yù)防HPV的感染。通過(guò)對(duì)比曦曦愛(ài)和傳統(tǒng)干擾素治療HPV感染的患者療效差異，我們發(fā)現(xiàn)曦曦愛(ài)治療組和干擾素治療組治療前后HPV DNA含量均明顯下降，且曦曦愛(ài)治療組下降更明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。干擾素治療組的總有效率僅為63.3%，但曦曦愛(ài)治療組的總體有效率高達(dá)96.6%，曦曦愛(ài)治療組總有效率明顯高于干擾素對(duì)照組(P=0.00001)。本次臨床療效觀察結(jié)果提示：曦曦愛(ài)對(duì)HPV病毒具有良好殺滅作用，且效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)治療手段干擾素，但其中仍有2例患者尚無(wú)效，其可能與患者自身機(jī)體免疫功能相關(guān)。

綜上所述，曦曦愛(ài)治療HPV感染治療方法其優(yōu)勢(shì)在于以下幾點(diǎn)：給藥方式簡(jiǎn)單，僅外用無(wú)需有源器械輔助即可給藥，患者依從性良好；可有效阻斷病毒的侵襲感染及增殖能力，達(dá)到殺滅病毒的作用；有效殺滅致病微生物，減輕婦科炎癥。采用曦曦愛(ài)抗HPV婦科抑菌凝膠治療HPV持續(xù)感染的臨床效果顯著。