超高效液相色譜質譜聯用測定咸魚中16種有機磷農藥殘留

陳庚超 顏素娟

[摘要】本文建立了咸魚中16種有機磷農藥殘留的超高效液相色譜串聯三重四級桿質譜分析方法，線性范圍在O.5～50ng/mL，線性相關系數均分布在0.991～0.999。本文前處理方法采用的是QuEC.hERS方法，該方法回收率在75.45～100.37%，結果表明，在處理咸魚含有較多脂肪、蛋白質等復雜基質時，QuEChERS方法具有操作簡便快速、準確率高、重復性好等優點，超高效液相色譜串聯三重四級桿質譜的儀器方法與氣相色譜法相比，具有靈敏度和準確度高的優點。[關鍵詞]咸魚;有機磷農藥殘留;QuEChERS;超高效液相色譜質譜聯用

近年來，食品質量安全在我國引起了高度重視。咸魚作為一種腌制食品，在加工過程中不法商販為了防治蚊蠅、蛆蟲等滋生會向咸魚噴灑、浸泡有機磷農藥，嚴重威脅廣大人民的健康[1—2]。因此，建立準確、快速測定腌制類食品中有機磷殘留的檢測方法具有重要意義。國家標準關于肉制品中有機磷農藥的前處理方法復雜，且除脂和凈化效果不理想l 3】。近年來國際上最新發展起來的OuEChERS（Quick、Easv，Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法是一種可應用食品中農藥殘留檢測的快速樣品前處理技術，此方法快捷簡便，能將咸魚樣品中大量油脂去除，減少分析過程中的基質干擾[4]。超高效液相色譜串聯三重四級桿質譜的儀器方法與氣相色譜法相比，具有靈敏度和準確度高的優點。因此本文采用的QuEChERS前處理方法結合超高效液相色譜串聯質譜法快速檢測咸魚中有機磷農藥殘留，具有重要的指導意義。

1 材料與方法

1.1 儀器

1290Ⅱ-6460型超高效液相色譜儀串聯三重四級桿質譜儀：Agilent科技公司;ALY120型電子分析天平：日本島津公司;Elmasonic P型超聲波清洗器：德國Elma公司;Sigma 3k30型高速冷凍離心機：博勵行儀器有限公司;Seven Easy pH汁：梅特勒一托利多儀器公司;ATR AutoVap S60型樣品全自動氮吹儀：力德生物科技上海有限公司;Milli-Q型純水儀：密理博公司。

1.2 試劑

甲酸、乙腈均為色譜純：德國Merck公司;乙腈、丙酮、二氯甲烷、硫酸鈉等均為分析純：廣州分析化學試劑廠;實驗用水除特殊說明均為一級水;甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、久效磷、敵百蟲、樂果、敵敵畏、殺撲磷、亞胺硫磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、三唑磷、喹硫磷、倍硫磷、治螟磷、毒死蜱標準品的濃度均為lOOmg/L：農業農村部環境保護監測所。

1.3 標準溶液配制

準確移取上述16種標準品適量，用乙腈作溶劑，配置成l.OOmg/L的混合標準溶液，進一步配置成濃度依次為0.50μg/mL、1.00 μg/mL、-5.00μg/mL、10.00μg/mL、20.00μg/mL、50.00μg/mL的系列標準工作液。

1.4 樣品前處理

準確稱取制備好的咸魚樣品5.OOg，加入lOmL冰凍好的乙腈，混合搖勻或均質器勻漿，加入OuEChERS凈化包的陶瓷均質子，加入Agilenl BondElut QuEChERS提取包（也可采用其他廠商的類似產品）。劇烈震蕩3min后，在1000r/min、4℃條件下冷凍離心3～5min，之后移取上清液過0.22μm有機相濾膜，待上機測試[5—6]。

1.5 儀器條件

色譜條件：色譜柱AgilenlCl8（ 2.1×lOOmm），進樣量lOμL，柱溫45℃，流動相為0.2%甲酸水+乙腈，梯度洗脫程序見表1，流速為0. 3mL/min。

質譜參數：電噴霧離子源（ ESI），多反應檢測MRM模式，離子對參數見表2[7]。

2結果與分析

2.1 線性范圍及檢出限

樣晶經上機測試，在充分優化條件后得到濃度為10μg/mL的16種有機磷標準溶液的理想色譜圖，具體見圖1。

按1.3配制濃度為0.50ng/mL、l.OOng/mL、5.OOng/mL、lO.OOng/mL、20.OOng/mL、50.OOng/mL的混合標準系列溶液，按本方法分析，以16種有機磷農藥濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標做線性回歸方程[8]。本文所述方法在線性范圍0.50～50.OOng/mL，16種有機磷農藥殘留的線性相關系數都很理想，均為0.991～0.999。在通過對各日標化合物的特征離子色譜峰信噪比（S/N）>10，可計算得到該方法各個目標化合物的定量檢出限（ LOQ），具體見表3[9]

。2.2 精密度及回收率

稱取不含待測組分的咸魚樣品50.Og共20份，其巾2份按照實驗方法正常操作，另外18份分成3組，分別添加含有16種有機磷農藥的混合標準溶液，制成1.00μg/kg、5.00μg/kg和20.00μg/kg的不同濃度的樣品進行三水平六平行的添加回收試驗。結果表明，16種有機磷農藥的平均回收率為75.5%～100.5%，精密度為0.3%～2.O%（n=6），具體見表4[10-12]。

3 結論

本文采用QuEChERS前處理技術結合超高效液相色譜質譜聯用的方法對咸魚中16種有機磷農藥進行檢測，結果表明，該方法不僅具有前處理簡單、操作方便、凈化除脂效果好等優點外，還具有分離效果好、分析快速、檢出限低、靈敏度和精密度高等特點，適用于對咸魚中有機磷農藥殘留的檢測。

參考文獻

[1]龔麗，李浩權，劉清化，等.半干咸魚的加工工藝[J].食品與 發酵工業.2004 （9）：130-132.

[2]唐黎標.蔬菜農藥殘留標準現狀分析[J】山東農藥信息，2019（1）：17-18.

[3]劉麗麗，劉巍.食品中農藥殘留檢測技術的研究[J].科學技術 創新，2019 （2）：33-34.

[4]曹俊杰，于霞，胡畔.探討QuEChERS方法在食品農獸藥殘留檢 測中的應用[J]現代食品，2018 （23）：83-85+89.

[5]易江華，段振娟，方國臻，等.QuEChERS方法在食品農獸藥殘 留檢測中的應用[J]中國食品學報，2013 （2）：153-158.

[6]劉婷.QuEChERS結合GC-MS/MS和LC-MS/MS高通量檢測果蔬農 藥多殘留研究[D]，長沙：中南林業科技大學，2018.

[7]王耀，劉少彬，謝翠美，等.加速溶劑萃取凝膠滲透色譜/固 相萃取凈化氣相色譜質譜法測定咸魚中有機磷農藥殘留[J]分 析化學.2011 （1）：67-71.

[8]彭喜春，賴毅東.咸魚制品中有機磷農藥殘留的毛細管GC-NPD 法測定[J]食品科學，2006 （9）：226-228.

[9]吳南村，劉舂華，樂淵，等.QuEChERS-超高壓液相色譜一串聯 質譜法檢測黑胡椒中6種農藥殘留[J】分析試驗室，2018（12）： 1431-1435.

[10]劉美辰，路宏博，趙小旭，等.膠體金免疫層析法快速定量檢測糙米中重金屬離子鉛[J]糧食科技與經濟，2018 （2）：61-64.

[11]林濤，邵金良，劉興勇，等.QuEChERS-超高效液相色譜一串聯質譜法測定蔬菜中41種農藥殘留[J].色譜，2015 （3）：235-241

[12]劉國棟，微波消解一原子吸收一原子熒光法快速測定糧食中鉛、鎘、汞、砷[J]糧食科技與經濟，2017 （6）：46-48.