Livin、Bcl-2在結直腸癌的表達及臨床意義

高曉虹 徐曉焱 陳遠壽 曹永

【摘 ?要】目的：研究Livin和Bcl-2在大腸癌中的表達及其與侵襲轉移之間的關系，探討Livin和Bcl-2之間的相關性。方法：采用免疫組織化學（SP）法對大腸癌34例及腺瘤10例和相應癌旁組織8例做Livin和Bcl-2的抗原標記。結果：Livin和Bcl-2與年齡、性別、Dukes分期及淋巴結轉移均無明顯相關性（P﹥0.05）。Livin與腫瘤分化程度和浸潤深度呈明顯相關（P<0.05）;Bcl-2與腫瘤浸潤深度明顯相關（P<0.05），而與腫瘤分化程度無顯著性差異（P>0.05）。Livin和Bcl-2在大腸癌表達呈正相關。結論：Livin和Bcl-2的表達與大腸癌發生和侵襲密切相關，可作為判斷大腸癌預后的指標。

【關鍵詞】大腸癌;Livin;Bcl-2

【中圖分類號】R735 ? ? ?【文獻標識碼】A ? ? ?【文章編號】1004-7484（2019）05-0056-01

惡性腫瘤是當前危害人類生命健康最常見的疾病之一。研究表明，90%以上惡性腫瘤患者最終死于腫瘤復發或轉移。凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein， IAP）家族是一類調節細胞凋亡的蛋白質，IAPs過低或過高表達影響腫瘤的發生、發展。Livin是IAPs中新近發現的一員，已發現在多種腫瘤及細胞系中高表達，而在成人正常組織中不表達或低表達。Wang TS等發現ShRNA可抑制SGC-7901細胞中Livin的表達并誘導細胞凋亡，livin可作為誘導胃癌細胞凋亡的重要靶點。大腸癌中Livin表達或抑制是否與胃癌中的相同，目前仍未明確，因此本研究擬探討Livin、Bcl-2在大腸癌的表達及與臨床病理特征之間的關系，分析其在大腸癌轉移中的作用和臨床意義。

1 材料與方法

1.1 材料 收集牡丹江市中醫醫院2010年～2014年資料完整病理存檔蠟塊52例，大腸癌34例、大腸腺瘤10例和癌旁組織8例。按Dukes分期分類：A期7例，B期15例，C期9例，D期3例;其高分化腺癌13例，中分化腺癌9例，低分化腺癌12例;腺癌30例，粘液腺癌3例，印戒細胞癌1例;腺瘤組：腺瘤性息肉10例，男性7例，女性3例，8例癌旁組織作對照。

1.2 試劑和方法 ?10%福爾馬林溶液組織固定，采用S-P（strePtavidin-Perosidase）法，BCL-2抗體（BA0412），Livin抗體（BA1743）。Livin、Bcl-2抗體以1：200比例稀釋，PBS液代替第一抗體做空白對照。

1.3 結果判定 Livin和Bcl-2在胞漿呈棕黃色或棕褐色顆粒，400倍下觀察5個視野，計算Livin和Bcl-2陽性的癌細胞數。結腸癌癌細胞陽性判定標準參照，分級方法如下：染色強度依次為0、1、2、3;陽性細胞所占百分比：無著色為0，<10%為1，10%-50%為2，>50%為3，兩種積分相加后進行半定量判斷，進行統計學分析時（+～+++）皆為陽性。

1.4 統計學處理 采用SPSS17.0統計分析，SPearman相關分析，Kruskal-Wallis檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Livin、Bcl-2的表達

Livin、Bcl-2均呈棕黃色顆粒表達于癌細胞漿，34例中有17（50.0%）呈陽性表達，大腸腺瘤和癌旁中未見表達。癌組織中Livin與癌旁、大腸腺瘤存在明顯差異（P﹤0.05）。Bcl-2在大腸癌組織、大腸腺瘤和癌旁中表達率分別為58.82%（20/34）、80.00%（8/10）和12.50%（1/8）。癌組織中Bcl-2與癌旁組織差異顯著（0.025﹤P#﹤0.05） ，與大腸腺瘤無顯著性差異（P﹥0.05）。

2.3 Livin、Bcl-2與大腸癌臨床病理特征的關系

Livin與分化程度、浸潤深度均顯著性差異（P﹤0.05）;Bcl-2與癌組織浸潤深度有顯著性差異（P﹤0.05），與腫瘤分化程度無相關性（P﹥0.05）;Livin、Bcl-2與有無淋巴結轉移均無明顯關系（P﹥0.05）;Livin、Bcl-2與年齡、性別及Dukes分期均無明顯差異（P﹥0.05）。

2.4 大腸癌中Livin與bcl-2表達相關性

Spearman分析示，大腸癌中Livin與bcl-2表達呈顯著正相關（P=0.002<0.01，r=0.519），在大腸癌發生、發展中呈相互促進作用。

3 討論

Livin作為一個新發現的IAP家族成員，在多數成人組織中不表達，但在大多數黑色素細胞系及很多人類惡性腫瘤細胞株中高表達，提示該基因可能在腫瘤的發生和發展中起著重要作用。Livin主要表達于細胞漿，但在胞質內呈絲狀表達，同時也表達于胞核，并認為Livin C末端的RING結構對介導其在亞細胞水平上的分布具有重要作用。最近研究認為，Livin的亞細胞定位決定了抗凋亡和促凋亡之間的精細平衡調節。

我們的研究結果顯示Livin主要表達于細胞漿，癌組織中表達率明顯高于腺瘤和癌旁組織。Livin表達與年齡、性別、Dukes分期及淋巴結轉移均無明顯相關性，而與腫瘤分化程度和浸潤深度明顯相關。

Bcl-2作為公認的凋亡抑制基因，許多人類腫瘤中均有Bcl-2的高表達。本研究結果示，Bcl-2在大腸癌和腺瘤組織中高表達，在癌旁組織低表達。Bcl-2表達與患者的年齡、性別、分化程度、Dukes分期及淋巴結轉移均無明顯相關關系，而與腫瘤浸潤深度明顯相關。經統計學分析，提示大腸癌組織中Livin與Bcl-2蛋白表達呈正相關。在大腸癌的發病機制上Livin基因與Bcl-2基因協同發揮抑制細胞凋亡的作用。

總之，Livin、Bcl-2均為凋亡相關基因，Livin及Bcl-2的作用是抑制細胞凋亡的發生，這些基因的異常表達或突變影響到凋亡的發生，從而可使具有惡性變的細胞繼續存活，為細胞的DNA進一步損傷或突變提供條件。本實驗以大腸癌病理組織為研究對象探討了Livin及Bcl-2蛋白在大腸癌中的作用及相互關系，為臨床以Livin及Bcl-2為治療靶點對大腸癌進行基因治療提供理論依據。

參考文獻

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